苏丹
- 作品数：11 被引量：19H指数：3
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 基因重组BDNF蛋白在大肠杆菌中的表达纯化与功能鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的构建脑源性神经营养因子(BDNF)基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,以获取高产量、低成本、高纯度且具有生物学活性的BDNF蛋白。方法以人的全长BDNFcDNA为模板,用PCR方法扩增成熟区BDNF的cDNA,应用基因重组技术将人BDNFcDNA克隆到质粒pET-30a(+)中,进行限制性内切酶酶切分析和DNA测序鉴定。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)LysS,经IPTG诱导表达后,用Ni-NTA亲和层析纯化获取蛋白,用SDS-PAGE和westernblot方法鉴别,噻唑蓝(MTT)法检测重组蛋白对PC12细胞增殖的影响。结果扩增出的人BDNFcDNA片段克隆进了原核表达载体,经酶切和核酸测序鉴定,得到了正确的重组质粒pET-BDNF,并在大肠杆菌中获得了表达。纯化后的蛋白经考马氏亮蓝染色呈单一条带;用抗BDNF的抗体进行westernblot分析证明目的蛋白获得了表达。基因重组BDNF蛋白能够促进PC12细胞增殖。结论本研究成功构建了表达基因重组人BDNF的原核表达载体,基因重组人BDNF蛋白在大肠杆菌中获得了表达和纯化,所获得的基因重组蛋白具有较好的生物学活性。
- 马蕾蕾苏丹季爱民
- 关键词：脑源性神经营养因子大肠杆菌蛋白纯化生物学活性
- 壳聚糖-siRNA分子纳米载体的制备、鉴定和基因沉默效应
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是生物体内的一种自然现象：导入生物体内的或内源性转录生成的一种双链RNA分子，与同源的mRNA结合并使其降解，可介导对应基因转录后的沉默。一方面，干扰RNA技术可作...
- 苏丹
- 关键词：壳聚糖纳米粒RNA干扰FHL2药剂学
- 文献传递
- 壳聚糖纳米基因载体的制备和鉴定被引量：5
- 2007年
- 目的制备载基因壳聚糖纳米粒,研究纳米粒的结构特征以及对细胞的基因转染效率。方法用表达绿色荧光蛋白的质粒(pGFP)作报告基因,采用复凝聚法制备壳聚糖-pGFP纳米粒。琼脂糖凝胶电泳分析壳聚糖和pDNA的结合能力,通过比色法检测其包封率,用纳米粒度仪和原子力显微镜对纳米粒的形态和粒径分布进行考察;通过荧光显微镜观察壳聚糖纳米粒介导pGFP在体外培养的人结肠腺癌细胞LoVo中的表达。结果琼脂糖凝胶电泳分析结果表明,pDNA与壳聚糖之间通过静电作用而完全结合,包封率大于90%。制备的壳聚糖-pGFP纳米粒为结构紧密的不规则球形,平均粒径为209nm,多分散指数为0.15。体外细胞转染的结果表明,壳聚糖-pGFP纳米粒能介导pGFP转染LoVo细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白。结论壳聚糖可以有效凝聚pDNA,采用复凝聚法可制得100￣500nm范围荷正电的纳米粒,有较高的包封率。壳聚糖纳米粒在体外能将基因递送到细胞内,并且报告基因能在细胞内表达。因此,壳聚糖作为非病毒基因载体具有介导核酸类生物大分子的应用价值。
- 苏丹季爱民
- 关键词：壳聚糖纳米粒基因载体转染
- 白细胞介素1β抑制心肌成纤维细胞胶原合成并促进其分解(英文)被引量：5
- 2008年
- 本文应用^3H-胸腺嘧啶核苷（^3H-thymidine，^3H-TdR）掺入法及^3H-脯氨酸（^3H-proline，^3H-Pro）掺入法观察白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）对Spague-Dawley乳鼠心肌成纤维细胞DNA及胶原合成的影响，并用明胶酶谱法和Western blot检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）MMP-2、MMP-9活性及MMP-2和MMP-9蛋白表达，用RT-PCR检测MMP-2、MMP-9的mRNA表达。结果显示：（1）0.1、1、10、100ng／mL的IL-1β作用于细胞24h后，各组^3H-TdR掺入量明显较对照组低（P〈0．05，P〈0．01），同时^3H-Pro掺入量明显降低（P〈0．05，P〈0．01）：而0.01ng／mL的IL-1β作用于细胞后，对^3H-TdR掺入量和^3H-Pro掺入量无明显影响。（2）不同剂量（0．01-100ng／mL）的IL-1β均刺激MMP-2和MMP-9活性升高，并呈剂量依赖性。IL-1β增加MMP-2和MMP-9蛋白表达（P〈0．05，P〈0．01）。（3）IL-1β（0.01-100ng／mL）刺激MMP-2和MMP-9mRNA表达升高（P〈0．05，P〈0．01）。以上结果表明，IL-1β通过减少心肌成纤维细胞的细胞分裂来降低胶原的合成，同时促进MMP-2和MMP-9的转录及转录后的表达来促进胶原的分解，提示其在心肌重塑过程中起一定作用。
- 肖华季爱民李志粱宋旭东苏丹陈爱华
- 关键词：白细胞介素1Β成纤维细胞胶原基质金属蛋白酶
- 壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究（英文）
- 本文进行了壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究。对壳聚糖/siRNA纳米粒的物化性质如粒子体积、表面电荷、形态学和稳定性等进行了评价。壳聚糖/siRNA纳米粒表面呈不规则片状或树突状,其动态直径约148nm,...
- 季爱民苏丹车鸥李文适孙靓张忠义杨彬
- 关键词：SIRNAFHL2基因沉默
- 文献传递
- 通过血脑屏障脑源性神经营养因子的制备及功能
- 目的来源于人类免疫缺陷病毒（HIV）-I型编码的反式激活蛋白（TAT）中的蛋白质转导域（PTD）,能介导生物大分子通过血脑屏障。本文拟制备一种经血管途径给药后能通过血脑屏障（BBB）进入大脑的脑源性神经营养因子（BDNF...
- 季爱民马蕾蕾苏丹马翰章李晓东王秉钧张忠义
- 关键词：脑源性神经营养因子血脑屏障免疫组织化学
- 文献传递
- 壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究（英文）
- 本文进行了壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究。对壳聚糖/siRNA纳米粒的物化性质如粒子体积、表面电荷、形态学和稳定性等进行了评价。壳聚糖/siRNA纳米粒表面呈不规则片状或树突状,其动态直径约148nm,...
- 季爱民苏丹车鸥李文适孙靓张忠义杨彬
- 关键词：SIRNAFHL2基因沉默
- 文献传递
- siRNA分子的生物体内给药系统被引量：2
- 2005年
- 小分子干扰RNA(small interference RNA,siRNA)能特异性地沉默靶基因的表达,具有治疗某些基因异常引起的疾病的应用前景。但是siRNA分子在生物体内应用时存在很多缺陷,要发挥其疾病治疗作用,就必需对其进行稳定性结构修饰并设计合适的生物体内给药系统。
- 苏丹季爱民
- 关键词：SIRNA给药系统
- 一种携带神经营养因子穿过血脑屏障的融合蛋白及其编码基因与用途
- 本发明公开了含蛋白质转导域的神经营养因子融合蛋白基因的克隆，蛋白质的表达和纯化，融合蛋白的生物学活性，及其生物体内穿过细胞膜，特别是血脑屏障的功效。该融合蛋白包括与神经营养因子至少75％序列同源的第一区，和与蛋白转导结构...
- 季爱民车瓯马蕾蕾苏丹马翰章李晓东孙靓王秉钧张忠义
- 文献传递
- 可通过血脑屏障脑源性神经营养因子的制备及功能
- 目的:来源于人类免疫缺陷病毒(HIV)-Ⅰ型编码的反式激活蛋白(TAT)中的蛋白质转导域(PTD),能介导生物大分子通过血脑屏障.本文拟制备一种经血管途径给药后能通过血脑屏障(BBB)进入大脑的脑源性神经营养因子(BDN...
- 季爱民马蕾蕾苏丹马翰章李晓东王秉钧张忠义
- 关键词：脑源性神经营养因子血脑屏障蛋白表达蛋白纯化免疫组织化学神经退行性疾病
- 文献传递
