胡新玲
- 作品数:7 被引量:22H指数:3
- 供职机构:中国林业科学研究院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市教委科技发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 紫杉烷14β-羟基化酶基因片段的克隆及其植物表达载体的构建被引量:8
- 2006年
- 采用CTAB法提取中国红豆杉基因组DNA,利用PCR技术克隆得到紫杉烷14β-羟基化酶(简称14OH)基因前半段,测序结果表明DNA片段序列为915bp,与报道的14OH基因同源性为98.3%。然后将获得的DNA片段(915bp)正反向插入到二元载体pZh01的GUS两端,构建成14OHRNAi植物表达载体pZ14a,又选其中与羟基化酶家族其他成员同源性低的部分(390bp),正反向插入到二元载体pZh01的GUS两端,构建成14OHRNAi植物表达载体pZ14b。同时将克隆得到的DNA片段(915bp)反向插入到二元载体pZh01中,构建成14OH反义RNA植物表达载体pZ14c。经PCR和酶切图谱分析鉴定,确认载体构建成功。
- 胡新玲徐妙云刘德虎邱德有
- 关键词:RNA干扰反义RNA表达载体构建
- 一种有效抑制曼地亚红豆杉细胞生物合成C-14位氧化紫杉烷的方法
- 本发明涉及一种有效降低曼地亚红豆杉(Taxus x media)细胞合成C-14位氧化紫杉烷(C-14 oxygenated taxoids)的方法,属于基因工程的技术领域,是通过根癌农杆菌介导的双元载体转化系统将针对红...
- 邱德有李凤岚胡新玲
- 文献传递
- 红豆杉紫杉烷7--木糖基转移酶基因鉴定及功能研究
- 紫杉醇(Paclitaxel)是从红豆杉的树皮中分离得到的一种二萜类化合物,其抗癌活性广谱而高效。7-木糖基紫杉烷类的木糖基化代谢处于紫杉醇等7-羟基紫杉烷生物合成的分支途径,是影响红豆杉紫杉醇含量的重要步骤,其关键酶为...
- 胡新玲
- 关键词:红豆杉基因鉴定基因功能
- 文献传递
- 一种利用RNA干涉技术降低曼地亚红豆杉细胞C-14位氧化紫杉烷含量的方法
- 本发明涉及一种有效降低曼地亚红豆杉(Taxus x media)细胞合成C-14位氧化紫杉烷(C-14 oxygenated taxoids)的方法,属于基因工程的技术领域,是通过根癌农杆菌介导的双元载体转化系统将针对红...
- 邱德有李凤岚胡新玲
- 文献传递
- 草莓基因工程研究进展被引量:11
- 2007年
- 综述了近20年来国内外在草莓抗病虫、耐盐碱、抗冻、品质特性、耐贮运性、抗除草剂基因工程的研究概况与进展,对当前草莓基因工程育种工作中存在的问题进行了探讨,对其发展前景进行了展望,指出了多基因转化和利用转录因子、小RNA等调控基因进行转化这2个发展方向并提出了把草莓作为果树基因组学研究的模式植物之一的观点。决定草莓品质(风味、香气和颜色)的物质多是萜类和黄酮类次生代谢物质,这说明今后我国开展草莓次生代谢基因工程对其品质改良的重要性。
- 金晓磊沈元月胡新玲滕文静董清华邱德有
- 关键词:草莓基因工程
- 红豆杉紫杉烷14β-羟基化酶基因植物表达载体的构建及转化的研究
- 紫杉醇(tax01)首次从短叶红豆杉(Taxus Brevifolia Nutt)树皮中分离得到,是迄今为止少数几个最具抗癌活性的天然化合物之一,对卵巢癌、乳腺癌等均有显著疗效。由于紫杉醇在植物体内的含量相当低,而且红豆...
- 胡新玲
- 关键词:紫杉烷反义RNARNA干扰红豆杉植物表达载体
- 文献传递
- 紫杉烷13α-羟基化酶基因的克隆及其转化烟草的研究被引量:4
- 2008年
- 利用东北红豆杉(Taxus cuspidata)cDNA文库作为模版,通过PCR技术扩增得到我国东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶(Taxane13α-hydroxylase,简称13OH)的全长cDNA,将PCR产物克隆到pGM-T载体后测序结果表明该序列长度为1458bp。同源性比较分析结果表明:其碱基序列与已经报道的东北红豆杉(Taxus cuspidata)的13OH基因的一致性为99.38%,其氨基酸序列同与已经报道的东北红豆杉的13OH氨基酸序列的一致性为99.18%。将获得的cDNA全长序列正向插入到含有GUS报告基因的pCambia1305.1后成功地构建出东北红豆杉13OH植物表达载体pC13OH,通过电击法把pC13OH转入根癌农杆菌GV3101中。利用该工程菌株对普通烟草进行了转化,在潮霉素选择压力下获得了完整的再生植株。利用13OH基因特异引物,通过PCR技术筛选到4株阳性再生植株。在这4株再生植株中,有3株植株GUS报告基因的组织化学染色呈现阳性反应,表明该植物载体表达载体中与13OH相融合的GUS基因成功地得到了表达。为今后深入研究13OH基因在烟草中的表达和开展紫杉烷13α-羟基化酶基因对红豆杉细胞的转化以及研究作用于该基因的小RNA调节子打下了基础。
- 滕文静胡新玲王伟程克棣邱德有
- 关键词:紫杉烷全长CDNA烟草