胡小云
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- RD细胞肠道病毒71型受体的筛选被引量：2
- 2012年
- 目的筛选和鉴定RD细胞能与肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白结合的受体蛋白,为进一步深入研究EV71病毒受体特性和功能提供实验依据。方法提取RD细胞膜蛋白,双向凝胶电泳分离RD细胞膜蛋白后,通过Far-western印迹实验筛选能与EV71病毒VP1蛋白相互作用的RD细胞膜蛋白,同时设立阴性对照,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),对特异性结合的蛋白点进行鉴定。结果通过Far-western印迹检测,从RD细胞筛选到4个能与EV71结合的蛋白点;质谱分析仅鉴定出一个膜蛋白,即stomatin-like protein2(SLP-2)。结论至少有4个蛋白可以与EV71的VP1蛋白相互作用,其中RD细胞膜上的SLP-2蛋白能够与EV71病毒的VP1特异性结合,可能是EV71病毒候选受体或受体辅助分子之一,其在EV71病毒感染RD细胞过程中的作用有待进一步研究。
- 胡小云王长兵朱冰钟家禹邝璐
- 关键词：肠道病毒71型双向电泳飞行时间质谱SLP-2
- 肠道病毒71型的快速纯化及其鉴定
- 胡小云朱冰王长兵邝璐肖密丝
- 关键词：肠道病毒71型病毒纯化超速离心
- RD细胞上EV71病毒候选受体的筛选
- 目的筛选和鉴定RD细胞膜上能与肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白结合的受体蛋白,为进一步深入研究EV71病毒受体特性和功能提供实验依据。方法提取RD细胞膜蛋白,双向凝胶电泳分离RD细胞膜蛋白后,通过Far-wester...
- 胡小云王长兵朱冰钟家禹邝璐
- 关键词：肠道病毒71双向电泳飞行时间质谱SLP-2
- 文献传递
- 肠道病毒71型的快速纯化及其鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的建立一种简单、快速有效的从细胞培养物中纯化肠道病毒71(EV71)的方法。方法 EV71病毒在恒河猴肾细胞(LLC-MK2)中增殖后,将获得的细胞培养物经反复冻融、聚乙二醇6000沉淀、超速离心、氯化铯垫层超速离心的方法纯化病毒。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western blot)和透射电镜(TEM)的方法对纯化病毒进行鉴定,并测定其感染性的滴度及回收率。结果 SDS-PAGE显示出3个条带,相对分子质量分别为3.6×103、3×103和2.6×103与EV71的VP1、VP2和VP3相符合。Westernblot证实为EV71特异性条带。经磷钨酸负染后电镜观察,能看到典型病毒颗粒。采用终浓度为10%的聚乙二醇6000沉淀后的病毒的感染性回收率为82.0%,再经氯化铯垫层超速离心后浓缩病毒的感染性回性率为29.0%。结论聚乙二醇6000沉淀结合氯化铯垫层超速离心的方法比氯化铯密度梯度区带离心方法更简便,易于操作,并且比单独聚乙二醇6000沉淀有更高的纯度,是一种简便、有效的病毒纯化方法。
- 胡小云朱冰王长兵邝璐肖密丝
- 关键词：肠道病毒71型病毒纯化超速离心
