罗锐
- 作品数：32 被引量：35H指数：4
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家生猪现代产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒修饰型GP5和M蛋白增强DNA疫苗免疫应答的研究被引量：5
- 2007年
- 为了增强猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗免疫效力,分别以PRRSV ORF5m(修饰型ORF5基因)及ORF6为候选基因,构建了单基因或双基因共表达的真核表达质粒pCI-ORF5m、pCI-ORF6及pCI-ORF5m/ORF6。转染BHK-21细胞,Western blot检测证实ORF5m和ORF6基因均获得正确表达,并且共表达的GP5m和M蛋白能够形成异源二聚体。将构建的表达质粒免疫小鼠,首免后6周共表达ORF5m和ORF6基因的pCI-ORF5m/ORF6免疫组小鼠血清中和抗体全部阳转,8周时最高可达到1:32,同时还可检测到较高的特异性细胞免疫应答,明显高于单独表达ORF5m基因的pCI-ORF5m免疫组。进一步将DNA疫苗免疫断奶仔猪,pCI-ORF5m/ORF6免疫组同样能诱发优于pCI-ORF5m免疫组的中和抗体和细胞免疫反应。上述研究结果表明采用ORF5m和ORF6双基因共表达策略能够显著提高PRRSV DNA疫苗效力,为PRRSV新型疫苗的研制提供了有用的数据。
- 江云波肖少波方六荣潘永飞罗锐陈焕春
- 关键词：ORF6双基因共表达
- 鸭呼肠孤病毒单克隆抗体NDRV-σC及其检测试剂盒和应用
- 本发明公开了一种鸭呼肠孤病毒单克隆抗体NDRV‑σC及其检测试剂盒和应用；它是由保藏编号为CCTCC NO：C2022276的杂交瘤细胞株NDRV‑MAb‑7C6所分泌得到。所述试剂盒包括上述的鸭呼肠孤病毒单克隆抗体ND...
- 罗锐金卉李卓飞栾沁瑶周鹏王荡
- 猪流行性腹泻病毒抗体捕获ELISA检测方法及应用
- 本发明属于动物免疫学技术领域。具体涉及猪流行性腹泻病毒抗体捕获ELISA检测方法及应用。本发明以抗猪流行性腹泻病(PEDV)N蛋白的单克隆抗体包被酶标板，捕获原核表达的PEDV N蛋白作为抗原建立检测猪血清中猪流行性腹泻...
- 方六荣肖少波董楠王荡曾松林罗锐
- 文献传递
- ASFV、CSFV、PRRSV多重荧光PCR检测方法的建立与应用被引量：5
- 2021年
- 非洲猪瘟病毒(ASFV)、经典猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是目前影响猪群和我国养殖业的重要的3种病原,且3种疾病临床表现相似,因此,建立一种可以快速检测、区分3种病原的方法十分必要。本研究依据ASFV、CSFV、PRRSV的基因保守片段设计特异性引物和探针,建立了多重荧光PCR检测方法。结果显示,所建立的多重荧光PCR可同时检测ASFV、CSFV、PRRSV 3种病原,特异性好、灵敏度高,对3种病原的检测下限分别达到13,16,26个拷贝;重复性良好,组内及组间重复试验的变异系数(CV)均在2%以内。将ASFV OIE标准、CSFV、PRRSV国家标准荧光qPCR作为金标准,同时对180份样品进行检测对比,结果显示,本研究方法对CSFV灵敏性和特异性分别为94.59%和100.00%,总符合率为98.89%;对PRRSV灵敏性为92.68%,特异性为98.56%,总符合率为97.22%;未检测到ASFV。使用所建立的方法对839份临床样品进行检测,结果显示,CSFV、PRRSV是当前猪群疾病的主要病原,且育肥阶段猪只CSFV、PRRSV核酸检出率均显著高于保育阶段猪只(P<0.01)。结果表明,本研究所建立的方法具有较高的灵敏性和特异性,可用于临床样品检测,猪场在防控非洲猪瘟的同时也须加强对CSF、PRRS的防控工作。
- 牛伟杰于学祥高宇库旭钢何启盖何启盖
- 关键词：非洲猪瘟猪繁殖与呼吸综合征
- PRRSV感染抑制Ⅰ型和Ⅲ型干扰素及激活NF-κB的分子机制研究
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的新发病毒性传染病。自1987年首次在美国报道以来,PRRS已遍及世界各主要养猪国...
- 罗锐
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒天然免疫反应干扰素
- 猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2007年
- 本研究通过RT-PCR方法从用ConA刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪IL-15(pIL-15)编码序列的cD-NA,将其克隆至T载体pMD18-T后,序列测定表明pIL-15基因长度为489 bp,编码162个氨基酸。进一步通过PCR方法获得缺失其N端48 aa的信号肽序列的成熟pIL-15蛋白基因,将其亚克隆到原核表达载体pET-28a的6×His下游,构建重组表达质粒pET-pIL15,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导,重组菌体裂解物经SDS-PAGE可检测到分子量约为15 ku的重组蛋白,其表达量占总菌体蛋白量的17.5%。Western blot试验也证实表达的重组融合蛋白6×His-pIL15能够很好地与抗6×His单抗发生反应。猪IL-15基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。
- 江云波方六荣肖少波张辉潘永飞罗锐李彬陈焕春
- 关键词：基因克隆原核表达
- 人工合成的猪繁殖与呼吸综合征病毒多表位基因及应用
- 本发明涉及动物病毒学与动物传染病学及基因工程学技术领域。具体涉及一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗原多表位基因的合成与应用。其特征是将高致病性PRRSVWUH3株GP3、GP4、GP5、M和N蛋白的T细胞...
- 方六荣肖少波王荡罗锐吴群峰李振曾松林
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒抗体捕获ELISA检测方法及应用
- 本发明属于动物免疫学技术领域。具体涉及猪流行性腹泻病毒抗体捕获ELISA检测方法及应用。本发明以抗猪流行性腹泻病(PEDV)N蛋白的单克隆抗体包被酶标板，捕获原核表达的PEDV N蛋白作为抗原建立检测猪血清中猪流行性腹泻...
- 方六荣肖少波董楠王荡曾松林罗锐
- 文献传递
- 猪圆环病毒3型的分离及致病性分析被引量：4
- 2023年
- 猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)是2016年由美国首次报道引起母猪繁殖障碍的一种新型猪圆环病毒,该病毒的致病性尚不完全清楚。为研究PCV3对断奶仔猪的致病性,本研究用PK-15细胞自临床病料分离到1株PCV3毒株,命名为PCV3/CH/HB/XY/2018,全基因组测序分析表明,该毒株属于PCV3a-IM基因亚型。分别用PCV3阳性病料初始匀浆液和第8代细胞培养物采用滴鼻和肌肉注射2种方式感染28日龄断奶仔猪,每组试验猪5头,并设置空白对照组。通过观察和分析试验猪的临床表现、体温、增重、病毒血症、各组织的病毒载量和病理变化等方面评价仔猪感染试验结果。结果显示:PCV3阳性病料初始匀浆液和细胞培养物在感染断奶仔猪后均会引起仔猪出现体温上升、消瘦、皮炎和生长缓慢等现象;病毒血症时间超过14 d,但21 d消失,病毒的组织分布结果表明,PCV3主要感染扁桃体、淋巴结等免疫器官,在脾、肺和扁桃体等组织中的病毒载量最高;感染猪可出现间质性肺炎、淋巴小结增生和嗜酸性粒细胞增多等病理变化。本研究表明PCV3/CH/HB/XY/2018毒株对断奶仔猪有致病性,为PCV3的致病机制研究奠定了基础。
- 库旭钢于学祥孙琪李盼盼张梦佳罗锐罗锐钱平
- 关键词：病毒载量
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入和释放依赖细胞膜胆固醇被引量：2
- 2011年
- 胆固醇是细胞膜脂质的重要组成成分.目前的研究发现细胞膜胆固醇在病毒的感染中扮演十分重要的作用.本研究对细胞膜胆固醇在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染MARC-145细胞中的作用进行了探讨.通过TCID50检测和Real-Time RT-PCR分析发现,用胆固醇萃取剂甲基-β-环糊精预处理消除细胞膜胆固醇可显著抑制PRRSV的感染,并呈剂量依赖性;而补充外源性胆固醇后可部分恢复PRRSV的感染性,提示PRRSV感染能力的下降确实是由于细胞膜胆固醇的去除而导致的.进一步的研究证实,细胞膜胆固醇的去除对PRRSV感染性的影响主要是通过影响PRRSV的侵入和释放过程.上述结果表明,细胞膜胆固醇是影响PRRSV感染的一个重要因子.
- 孙颖肖少波王荡罗锐李彬陈焕春方六荣
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒胆固醇
