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牛支原体P48膜蛋白的原核表达及生物信息学分析被引量：3: 2020年; 对牛支原体(M.bovis)主要免疫蛋白P48蛋白的保守性和蛋白结构与功能进行分析,为进一步对P48蛋白的免疫特性和致病机制研究奠定基础。本研究通过获取M.bovis Ningxia-1菌株P48蛋白基因序列,构建pET28a-P48质粒并导入大肠杆菌BL21感受态细胞进行原核表达,并通过Ni柱进行重组蛋白纯化、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠试验进行验证;利用生物信息学工具分析P48蛋白核酸序列的保守性和蛋白序列的理化性质、二级结构、疏水区、跨膜区、信号肽、亚细胞定位、抗原表位、三级结构及不同碱基的突变对该蛋白功能的影响。结果表明,通过大肠杆菌原核表达系统可以成功表达重组P48蛋白,并且该蛋白可以激发小鼠产生较高水平的抗体;P48蛋白核酸序列保守,在不同M.bovis菌株中碱基序列无差异;P48蛋白相对分子质量为51159.08,含有468个氨基酸,其中强酸性氨基酸57个,强碱性氨基酸63个,极性氨基酸116个,疏水氨基酸169个,等电点为8.776;1~24位为P48蛋白的信号肽,具有较强的疏水性,并且为跨膜螺旋区;二级结构包含alpha helix、beta sheet、beta turn、random coil 4种形式;抗原表位有13个区域;P48蛋白位于细胞内膜上,是膜脂蛋白家族中ABC转运体的溶质结合蛋白2;该蛋白存在多个突变敏感区域,该区域的改变可能直接影响P48蛋白的功能。本研究的开展为M.bovis P48蛋白的免疫特性和致病机制研究奠定了基础,为M.bovis抗体检测试剂的研制和M.bovis病原的诊断提供了科学的依据。; 郭亚男罗海峰司朵朵曹晓真段洪威何生虎; 关键词：牛支原体原核表达生物信息学

银川地区某奶牛场牛支原体病的诊断被引量：10: 2015年; 为确诊银川市某奶牛场成年奶牛病因,本研究对两头表现明显临床症状的犊牛进行解剖,无菌采集肺脏、肺积液、关节液及患临床型乳房炎的奶牛乳样1份进行病原分离,分离到2株巴士杆菌、2株链球菌、1株大肠杆菌和3株支原体,通过革兰氏染色、菌落形态观察、特异性PCR鉴定和16S r RNA序列比对,结果显示引起此次流行的主要病原为牛支原体。采用比利时进口牛支原体ELISA诊断试剂盒对银川地区12个规模化奶牛场的230份奶牛血清进行牛支原体血清学调查,结果显示牛群平均阳性率26.52%,牛场阳性率高达100%,表明牛支原体病在银川地区呈高感染率。; 郭澍强蒋万罗海峰葛松王静杨萌萌何生虎; 关键词：牛支原体血清学调查

宁夏某地区牛支原体病的流行病学调查及分子进化分析: 牛支原体(Mycoplasma bovis)是一种能够导致牛发生多种疾病,且感染率极高的病原,2013年11月宁夏某牛场成年奶牛出现以肺炎、乳房炎及犊牛出现重呼吸困难、关节炎等为主要特征的病例,发病的犊牛和成年奶牛使用青...; 郭澍强罗海峰葛松王静何生虎; 关键词：牛支原体流行病学调查分子进化分析

宁夏牛支原体病的血清学调查报告被引量：3: 2014年; 为掌握宁夏牛场牛支原体的感染状况,应用牛支原体间接ELISA检测试剂盒对宁夏银川市、吴忠市、中卫市的16个规模化养殖场的460份牛血清进行了牛支原体抗体的检测,结果显示:有148份血清牛支原体抗体阳性,阳性率为32.17%。说明宁夏地区牛支原体隐性感染普遍存在,应做好各牛场的管控和防治工作。; 郭澍强罗海峰葛松蒋万何生虎杨萌萌; 关键词：牛支原体牛血清血清学调查间接ELISA

宁夏某地区牛支原体病的流行病学调查及分子进化分析: 牛支原体(Mycoplasma bovis)是一种能够导致牛发生多种疾病,且感染率极高的病原,2013年11月宁夏某牛场成年奶牛出现以肺炎、乳房炎及犊牛出现重呼吸困难、关节炎等为主要特征的病例,发病的犊牛和成年奶牛使用青...; 郭澍强罗海峰葛松王静何生虎; 关键词：牛支原体流行病学调查分子进化分析

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罗海峰

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