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突触囊泡蛋白synaptotagmin XI的过表达对PC12细胞和聚集小体形成的影响: 2007年; 目的构建突触囊泡蛋白synaptotagmin XI(SytXI)重组质粒,观察其在PC12细胞中的表达,以及其对细胞和聚集小体形成的影响。方法运用人胚脑的cDNA文库作为模板,pcDNA3.1myc-His(-)B质粒作为载体,运用基因克隆技术构建重组质粒,限制性内切酶酶切,测序鉴定重组质粒;运用脂质体将重组质粒导入PC12细胞,Annexin V-PI双染色和免疫荧光观察对细胞的影响。结果测序鉴定质粒构建成功,过表达SytXI导致细胞死亡,增加α-synuclein和vimentin阳性聚集小体的形成。结论成功构建SytXI重组表达质粒,过表达造成对PC12细胞的毒性作用,并促进聚集小体的形成。; 郑汭王志全盛呈雨周海燕丁健青陈生弟; 关键词：SYNAPTOTAGMIN 帕金森病

DJ-1基因异常在帕金森病发病和诊断中的作用及其相关机制: 帕金森病(PD)是一种中老年人常见的神经系统变性疾病,其发病被认为与遗传和环境因素有关,DJ-1 基因是一个较为重要的PD 致病基因,参与了家族性及散发性PD 的发生.DJ-1 作为分子伴侣,帮助细胞抵抗氧化应激攻击,但...; 陈生弟王志全熊燃康文岩盛呈雨陈依梦刘军丁健青

DJ-1基因异常在帕金森病发病和诊断中的作用及其相关机制: 帕金森病(PD)是一种中老年人常见的神经系统变性疾病,其发病被认为与遗传和环境因素有关,DJ-1基因是一个较为重要的PD致病基因,参与了家族性及散发性PD的发生。DJ-1作为分子伴侣,帮助细胞抵抗氧化应激攻击,但是对于其...; 陈生弟王志全熊燃康文岩盛呈雨陈依梦刘军丁健青; 文献传递

内向整流钾通道6.2亚基对鱼藤酮诱导PC12细胞毒性的调节作用及其相关信号通路的实验研究: 2012年; 目的:探讨ATP敏感性钾离子通道亚基内向整流钾通道(Kir)6.2过表达对鱼藤酮诱导的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞毒性作用的调节作用及其相关信号通路。方法:转染Kir6.2质粒于PC12细胞48 h后,分别采用细胞免疫荧光和Western blot方法观察Kir6.2的表达,然后用水溶性四氮唑盐(WST-1)法检测3组细胞(正常对照组、转染组、空载体组)在500 nmol/L鱼藤酮处理24 h后的细胞活力;Western blot检测胞内蛋白激酶C(PKC)及磷酸化PKC(p-PKC)的变化。结果:细胞免疫荧光及Western blot结果显示转染组Kir6.2在细胞中表达较正常组和空载体组明显增高,WST-1检测发现转染组细胞活力较其他2组增高(P<0.05);Western blot结果显示鱼藤酮处理后p-PKC较处理前表达量增加,且转染组p-PKC表达量较其他2组均增高(P<0.05)。在Kir6.2过表达的PC12细胞中,p-PKC的活性上调,且不被PKC抑制剂所抑制。结论:Kir6.2过表达可拮抗鱼藤酮诱导的PC12细胞毒性,且这一神经保护作用与PKC信号通路相关,尤其是p-PKC。; 刘小坤王刚田立鹏张煜盛呈雨陈生弟; 关键词：ATP敏感钾通道鱼藤酮

大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达被引量：1: 2008年; 目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果:Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论:成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。; 王刚曾洁盛呈雨任汝静周海燕陆国强丁健青陈生弟; 关键词：基因表达调节 PC12细胞株

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盛呈雨