白贵杰
- 作品数：8 被引量：40H指数：4
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程理学轻工技术与工程更多>>
- 肺炎链球菌荚膜多糖分子大小及分子量分析方法的比较被引量：9
- 2015年
- 目的 3种方法分析10个血清型肺炎链球菌荚膜多糖（pneumococcal capsular polysaccharides,Pn Ps）样品的分子大小及分子量,并对这3种方法进行比较。方法采用Sepharose CL-4B凝胶排阻层析（SEC）技术检测1型、2型、4型、8型、9N型、12F型、14型、18C型、19A型和23F型Pn Ps各2～3批次样品在色谱柱中的分配系数（KD）和样品组分特征;采用高效凝胶排阻色谱-示差折光检测器（high performance size-exclusion chromatography with refractive index,HPSEC-RI）法建立Pullulan标准品分子量标准曲线,计算各Pn Ps样品的重均分子量（weight-average molecular weight,Mw）;采用高效凝胶排阻色谱-多角度激光光散射仪/示差折光检测器联用技术（high performance size-exclu-sion chromatography with multi-angle laser light scattering and refractive index,HPSEC-MALLS/RI）检测各Pn Ps样品的Mw、数均分子量（number-average molecular weight,Mn）、多分散水平（Mw/Mn）及均方根旋转半径（root mean square ratio of gyration,Rg）;对HPSEC-RI法和HPSEC-MALLS/RI法检测Pullulan分子量标准品的结果进行比较。结果 SEC技术不同化学方法检测的同批次Pn Ps样品的KD值十分接近,且主峰形态也比较近似,个别批次Pn Ps不同化学方法获得的峰形有差别。经HPSEC-RI检测Pullulan分子量标准品获得的回归方程为y=-0.278 x＋10.13,r2=0.998,各Pn Ps样品的分子量为1.812×105～1.246×106。HPSEC-MALLS/RI联用技术检测的各批Pn Ps样品的Mw分布于9.898×105～1.471×105,Rg为84.9～25.4 nm,同一血清型不同批次样品Rg间的大小关系与其Mw间的大小关系具有较好一致性。结论结合多种方法检测多糖样品的分子大小和分子量,可更客观、全面地了解Pn Ps分子的各种性质。
- 张轶张新庄王玺刘倩陈晓航任克明白贵杰王剑虹沈荣
- 关键词：分子大小分子量
- A+C群脑脊髓膜炎球菌多糖菌苗生产工艺与内毒素含量研究被引量：3
- 2000年
- A群及C群流脑多糖抗原用 10 0 0 0 0×g离心或不经超速离心处理 ,经用鲎试验法测定内毒素含量 ,2种工艺生产的A群及C群流脑多糖抗原的内毒素含量均很低。用未经超速离心处理的A群及C群流脑多糖抗原制成的A +C群流脑多糖菌苗 ,经鲎试验法测定 ,内毒素含量也很低 ;经家兔升温法进行热原质试验 ,家兔体温未明显升高。证明A +C群流脑多糖菌苗生产工艺不经 10 0 0 0 0×g离心去除内毒素步骤是可行的。所制备的流脑多糖抗原内毒素含量符合要求。
- 崔萱林曹俊高红杨明龚春梅白贵杰韩素勤
- 关键词：内毒素生产工艺热原检测
- 响应面法优化14型肺炎链球菌荚膜多糖的超滤工艺被引量：1
- 2013年
- 目的利用响应面法优化14型肺炎链球菌荚膜多糖的超滤工艺。方法选择跨膜压力、切向流量及多糖浓度为自变量,膜包处理能力为响应值,采用Box-Behnken设计分析各自变量及其交互作用对膜包处理能力的影响;利用Design Expert软件对数据进行回归分析,得到回归方程的预测模型,取3批14型肺炎链球菌荚膜多糖水溶液,对优化的工艺参数进行验证;按照最佳超滤工艺对3批14型肺炎链球菌荚膜多糖水溶液进行等体积透析,确定超滤终点;并对纯化的荚膜多糖进行各项检定。结果优化的14型肺炎链球菌荚膜多糖超滤工艺为:跨膜压力12.8 Psi,切向流量66 L/h,多糖浓度0.86 g/L,最适透析倍数为5倍,在该条件下,膜包处理能力的理论值为91.7 g/(h·m2),实际值为91.9 g/(h·m2)。3批纯化的14型肺炎链球菌荚膜多糖水溶液的多糖组分均符合《欧洲药典》7.0版相关规定,均未检出残余脱氧胆酸钠和乙醇,3批多糖的相对分子质量均大于420 000,抗原性良好,且抗原物质成分无差异。结论响应面法优化的14型肺炎链球菌荚膜多糖超滤工艺显著提高了工作效率,降低了生产成本,为14型肺炎链球菌荚膜多糖的规模化生产提供了实验依据。
- 任克明张轶王剑虹王玺白贵杰沈荣
- 关键词：肺炎链球菌多糖超滤响应面
- 肺炎链球菌发酵过程中质控方法的应用被引量：1
- 2013年
- 目的建立肺炎链球菌发酵过程中的质控方法。方法应用革兰染色镜检与荚膜肿胀试验监测菌种的退化及发酵罐染菌情况,或用于退化菌种的复壮;应用发酵过程中测定培养液光密度(A600)的方法监测发酵状况、确定培养液初始浓度以及收获时间;应用血糖仪测定发酵过程中的葡萄糖含量,保证发酵过程中碳源的及时补充;应用渗透压仪检测发酵过程中培养液渗透压的变化,确定补料策略。结果确立了细菌革兰染色、荚膜肿胀试验、葡萄糖含量、渗透压、光密度(A600)等作为肺炎链球菌发酵过程中的质控方法。结论实验研究中建立的肺炎链球菌发酵过程质控方法能够较好地监测和评价肺炎链球菌的发酵过程。
- 张新庄白贵杰张轶熊明郁任克明王玺沈荣
- 关键词：肺炎链球菌发酵质控方法
- 经验放大法对肺炎链球菌规模化发酵工艺条件的研究被引量：1
- 2016年
- 目的应用经验放大法探索肺炎链球菌规模化基本发酵工艺条件。方法复苏肺炎链球菌菌种,传代培养,最后接种于30 L发酵罐中,以细菌发酵的培养时间、收获液菌浓度A600 nm值、荚膜多糖产率为指标评价发酵工艺;以纯化多糖的功能基团含量、相对分子质量大小(色谱分配系数KD值)、生物活性为指标评价多糖质量。以4型、19F型肺炎链球菌为首选菌株,用于筛选高产菌株、优化传代方法、培养基及30 L发酵罐的通气条件,并应用经验放大法至270 L及1 200 L发酵罐,并将发酵条件推演到其他血清型肺炎链球菌。结果筛选出肺炎链球菌4型和19F高产菌株,利用市售复合培养基,经3代种子液体-液体传代法,0.03 VVM通气条件下,4型和19F菌株在3 0 L发酵罐中获得良好的培养结果;并采用经验放大法至1 200 L发酵罐,获得良好结果。采用此发酵工艺条件,其他20个血清型肺炎链球菌在1 200 L发酵罐中也获得较理想结果。结论应用经验放大法初步探索了肺炎链球菌在1 200 L发酵罐中的发酵工艺条件。
- 张新庄白贵杰张轶任珍芸张丽芝张钦沈荣
- 关键词：肺炎链球菌菌种筛选培养基
- A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗的制备及其接种人体后的血清学效果被引量：7
- 2001年
- 在现行的A群脑膜炎球菌多糖原液制造工艺的基础上 ,经部分改进后进行C群脑膜炎球菌多糖原液的生产。 3批中试A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗经全面检定后 ,各项指标均符合WHO《生物制品规程》的要求。该疫苗在接种人体后 ,5～ 13岁儿童组 ,抗A群及抗C群脑膜炎球菌的血清杀菌抗体 4倍增长率为 96 5 9%和 92 15 % ;≤2岁儿童组 ,抗A群及抗C群脑膜炎球菌的血清杀菌抗体 4倍增长率为 6 8 6 0 %和 6 9 77%。 2组儿童接种后 1个月的抗A群及抗C群膜炎球菌血清杀菌抗体几何平均滴度 (GMT )与接种前均有显著性差异 (P <0 0 0 1)
- 崔萱林曹俊杨明龚春梅白贵杰韩素勤
- 关键词：A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗几何平均滴度
- 14型肺炎链球菌荚膜多糖纯化工艺中两种去除蛋白方法的比较被引量：6
- 2013年
- 目的苯酚抽提法和脱氧胆酸钠沉淀法去除14型肺炎链球菌荚膜多糖中蛋白质的效果比较。方法将3批次14型肺炎链球菌发酵培养液经超滤、乙醇沉淀等方法初步纯化后,平分成两份,分别采用苯酚抽提法和脱氧胆酸钠沉淀法去除蛋白,通过比较多糖收获量、多糖组分检定结果、多糖分子质量、多糖抗原活性、多糖核磁共振图谱,以此评价这两种蛋白去除方法的效果。结果与苯酚抽提法相比,脱氧胆酸钠沉淀法制备的14型肺炎链球菌纯化荚膜多糖除收获量较高,蛋白和核酸杂质含量较低外,氨基己糖含量、多糖分子质量、抗原活性和多糖核磁共振图谱的检定分析结果无显著性差异(P>0.1)。结论作为14型肺炎链球菌荚膜多糖纯化工艺中的除蛋白方法,脱氧胆酸钠沉淀法优于苯酚抽提法。
- 任克明王玺张新庄刘韵乐张轶白贵杰王剑虹沈荣
- 关键词：肺炎链球菌苯酚纯化
- 核磁共振波谱法在肺炎球菌荚膜多糖检定中的应用被引量：19
- 2013年
- 目的建立1H-NMR波谱法检定23价肺炎球菌荚膜多糖结构的方法。方法用1H-NMR方法分析肺炎球菌荚膜多糖,选择(5.89～4.64)ppm区作为‘指纹’鉴定区,以默克公司公布的肺炎球菌荚膜多糖波谱为参照谱图,将检定样品的波谱与其相比较。对1H-NMR波谱进行专属性和耐用性验证。结果实验中应用1H-NMR波谱分析法对23价肺炎球菌多糖疫苗包含的所有血清型多糖的检定结果与默克公司公布的结果完全一致,该方法有很好的专属性和耐用性。结论实验中建立的1H-NMR波谱法适用于肺炎球菌荚膜多糖的检定,与传统方法相比,该方法有检测速度快,样品易于准备的优点等。
- 王玺任克明陈晓航白贵杰张新庄张轶沈荣
- 关键词：肺炎球菌荚膜多糖核磁共振检定
