田音
- 作品数：8 被引量：19H指数：4
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- O型糖链合成阻滞对肠上皮细胞MUC2表达及细菌黏附的抑制作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨肠上皮细胞O型糖链的合成阻滞对该细胞肠分化标记物MUC2表达及细菌黏附的影响。方法采用O型糖链抑制剂benzyl-α-GalNAc抑制结肠上皮细胞HT-29及其分化型细胞(HT-29-Gal)O型糖链的合成,经benzyl-α-GalNAc处理的HT-29和HT-29-Gal细胞分别命名为HT-29-OBN和HT-29-Gal-OBN。采用Real-time PCR和Western blotting方法检测上述4种细胞中MUC2基因的转录和蛋白表达水平,并将上述细胞与致病性大肠埃希菌(EPEC)和肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7共培养,采用系列稀释菌落计数法观察细菌在上述细胞表面的黏附情况。结果 Realtime PCR和Western blotting结果显示,经benzyl-α-GalNAc处理后,HT-29和HT-29-Gal细胞MUC2的mRNA和蛋白表达均明显减少(P<0.05)。HT-29-OBN和HT-29-Gal-OBN细胞与致病性大肠埃希菌EPEC和EHEC O157:H7的黏附明显少于HT-29和HT-29-Gal细胞(P<0.05)。结论抑制肠上皮细胞O型糖链的合成可阻碍细菌黏附及MUC2的表达。
- 宋丽丽叶钧刘韵潘琼钟小莉李姗姗田音彭志红汪荣泉
- 关键词：肠黏膜细菌黏附大肠埃希菌
- Ascl2 RNA干扰对结肠癌LS174T细胞EMT相关microRNA表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的探讨转录因子Ascl2对结肠癌细胞上皮间质转化(EMT)相关的微小RNA(microRNA)的影响。方法对结肠癌LS174T细胞进行Ascl2的RNA干扰质粒转染,对照质粒shRNA-control/EGFP和干扰质粒shRNA-Ascl2/EGFP转染LS174T细胞,经G418筛选建立了稳定转染的细胞系,并分别命名为shRNA-Ctr/LS174T和shRNA-Ascl2/LS174T细胞,实时荧光定量PCR(real-time PCR)和蛋白印迹(Western-blot)实验确定干扰效果后,采用Transwell小室侵袭实验观察Ascl2干扰对细胞侵袭能力的影响,再进一步行microRNA芯片筛选与EMT相关的microRNA并行real-time PCR验证。结果干扰后细胞中Ascl2的mRNA和蛋白质表达均明显减少(P<0.01)。Ascl2干扰后LS174T细胞的侵袭能力明显下降(P<0.01)。microRNA芯片筛选出与EMT相关的microRNA-200家族(包括microRNA-200b、microRNA-200a、microRNA-429、microRNA-200c、microRNA-141)在Ascl2干扰后均出现2倍以上的上调(P<0.01)。结论 Ascl2可能通过转录调节microR-200家族,进而调控EMT从而影响结肠癌的浸润转移。
- 朱蓉田音汪荣泉
- 关键词：微RNAS上皮间质转化结肠肿瘤
- 干扰结肠癌上皮细胞Ascl2的表达致其向杯状细胞表型分化被引量：5
- 2012年
- 目的探讨转录因子Ascl2对结肠癌细胞分化的影响。方法采用Ascl2分子干扰质粒和对照质粒对结肠癌HT-29和LS174T细胞进行转染,通过G418筛选建立稳定转染的细胞系,采用RT-PCR和Western blot方法检测干扰Ascl2分子表达对肠杯状细胞标志物Muc2和TFF3表达的影响。结果成功构建了shRNA-Ascl2/EGFP质粒以及对照质粒shRNA-control/EGFP,经测序与预期相符,G418筛选获得shRNA-Ascl2/HT-29、shRNA-Ctr/HT-29、shRNA-Ascl2/LS174T和shRNA-Ctr/LS174T稳定转染细胞。RT-PCR和Western blot检测证实干扰质粒能够有效地抑制HT-29和LS174T细胞内的Ascl2的表达(P<0.01)。RT-PCR检测发现Muc2和TFF3 mRNA表达水平在Ascl2干扰后的HT-29细胞内均明显上调(P<0.05);Muc2 mRNA表达水平在Ascl2干扰后的LS174T细胞内明显上调,差异有统计学意义(P<0.05),但是TFF3 mRNA表达水平在Ascl2干扰后的LS174T内升高不明显(P>0.05)。Western blot检测发现Muc2蛋白质表达水平在Ascl2干扰后明显上调(P<0.05)。结论干扰结肠癌HT-29和LS174T细胞内Ascl2的表达导致其向杯状细胞的表型分化。
- 李晓桓朱蓉田音汪荣泉
- 关键词：结肠肿瘤肿瘤细胞细胞分化杯状细胞
- Core 2和Core 4 O-型糖链参与大肠杆菌对肠上皮细胞的黏附与侵袭被引量：3
- 2014年
- 目的探讨大肠杆菌对Core 2和Core 4 O-型糖链合成障碍的肠上皮细胞的黏附和侵袭的影响。方法采用针对C2GnT-2的干扰质粒和对照质粒对结肠癌HT-29细胞进行转染,通过G418筛选建立稳定转染的细胞系,采用Realtime PCR和Western blot方法检测干扰效率,选取干扰最有效的稳定细胞系与肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)和肠出血性大肠杆菌(EHEC O157∶H7)37℃共培养。最后采用系列稀释克隆计数法观察干扰Core 2和Core 4 O-型糖链合成的C2GnT-2的HT-29细胞对细菌黏附及侵袭的影响。结果成功筛选获得shRNA-C2GnT-2及shRNA-Ctr稳定转染的HT-29细胞。Real-time PCR和Western blot检测证实干扰质粒能够有效地抑制HT-29细胞内C2GnT-2的mRNA及蛋白水平表达(P<0.01),黏附于shRNA-C2GnT-2/HT-29细胞表面的EPEC或EHEC O157∶H7的数量较对照细胞显著减少(P<0.01,P<0.05),而侵袭入shRNA-C2GnT-2/HT-29细胞内的EPEC或EHEC O157∶H7的数量较对照细胞显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论 Core 2和Core 4 O-型糖链参与了肠上皮细胞细菌的黏附与侵袭。
- 刘韵叶钧宋丽丽田音潘琼彭志红汪荣泉
- 关键词：大肠杆菌细胞黏附
- Ascl2表达抑制对结肠癌细胞上皮-间质转化的影响被引量：5
- 2013年
- 目的探讨肿瘤干性因子Ascl2对结肠癌细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法将Ascl2的shRNA干扰质粒转染至结肠癌HT-29和LS174T细胞,采用G418筛选建立稳定转染的细胞系,MTT及平板克隆形成实验观察Ascl2干扰对细胞增殖和克隆形成能力的影响,Real-time PCR和Western blotting检测Ascl2干扰对EMT相关蛋白E-钙黏蛋白和波形蛋白表达的影响。结果 MTT检测发现,转染Ascl2干扰质粒后72h和96h,HT-29和LS174T细胞的增殖速率明显降低(P<0.05);平板克隆形成实验结果显示,干扰后的HT-29和LS174T细胞克隆形成数明显少于未转染及转染对照质粒的HT-29和LS174T细胞(P<0.05)。Real-time PCR和Western blotting检测发现,干扰后的HT-29和LS174T细胞E-钙黏蛋白mRNA和蛋白表达水平上调(P<0.05),波形蛋白的mRNA和蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论 Ascl2 RNA干扰可导致结肠癌HT-29和LS174T细胞增殖能力下降及EMT逆转。
- 田音朱蓉汪荣泉
- 关键词：结肠肿瘤上皮细胞间质细胞
- 肠分化细胞黏蛋白O-型糖链合成抑制导致MUC2表达减低以及对细菌侵袭易感被引量：4
- 2013年
- 目的探讨O-型糖链合成的抑制对肠分化细胞内细菌侵袭数量和细胞内MUC2表达水平的影响。方法对肠分化细胞(HT-29-Gal)用O-型糖链抑制剂(benzyl-N-acetyl-α-D-galactosaminide,benzyl-α-GalNAc)处理,采用Real-time PCR和Western blot检测MUC2 mRNA和蛋白的表达情况。并将HT-29-Gal细胞及benzyl-α-GalNAc处理的HT-29-Gal细胞分别与肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic E.coli,EPEC)和肠出血性大肠杆菌(EHEC O157∶H7)37℃孵育2 h,再加入100μg/mL的庆大霉素,杀灭细胞外及粘附于细胞表面的细菌。最后采用系列稀释克隆计数法观察benzyl-α-GalNAc处理的HT-29-Gal细胞对细菌侵袭的影响。结果 Real-time PCR和Western blot检测发现经benzyl-α-GalNAc处理的HT-29-Gal细胞MUC2的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。侵袭入benzyl-α-GalNAc处理的HT-29-Gal细胞的EPEC和EHEC O157∶H7的数量较对照细胞显著增加(P<0.05)。结论抑制HT-29-Gal细胞黏蛋白O-型糖链的合成导致侵袭入细胞内细菌数量增加和MUC2的表达降低。
- 叶钧宋丽丽刘韵田音潘琼彭志红汪荣泉
- POEM治疗贲门失弛缓症的临床疗效和并发症分析被引量：2
- 2017年
- 目的观察分析经口内镜下肌切开术(POEM)治疗贲门失弛缓症(AC)的临床疗效及并发症情况。方法运用随机抽签法从我院2014年9月—2015年8月期间收治的贲门失弛缓症患者中选取60例作为观察对象,给予所有患者POEM治疗,观察临床治疗效果及并发症情况。结果本组患者手术成功率为100%,术后4 d即可食用流质食物,临床症状显著缓解;术后3 d食管动力学指标改善情况显著优于术前;术后未见严重并发症。结论采用经口内镜下肌切开术治疗贲门失弛缓症可取得理想的短期疗效,能够迅速缓解患者症状,且术后并发症少,但远期疗效及并发症还有待考证。
- 魏作林彭贵勇韩容田音
- 关键词：贲门失弛缓症POEM疗效并发症
