王臻
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 供职机构：厦门大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学历史地理更多>>
- 肺癌靶向血栓蛋白hu3D3V_H-tTF的表达及活性鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的制备一种用于肺癌血管靶向栓塞治疗的融合蛋白hu3D3VH-tTF,并鉴定其生物学活性。方法利用重叠PCR技术构建tTF与hu3D3VH的融合基因,克隆至表达载体pET22 b(+),在E.coliBL21(DE3)中表达,镍亲和色谱柱纯化目的蛋白。ELISA检测融合蛋白hu3D3VH组分与肺腺癌细胞A549选择性结合活性,凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白tTF组分的促凝血活性。结果获得序列正确的hu3D3VH/tTF/pET22 b(+)重组子,融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达。纯化后的融合蛋白与肺腺癌细胞A549具有选择性结合活性,并能活化FⅩ、有效促发血液凝固。结论成功构建hu3D3VH/tTF/pET22 b(+)重组子,hu3D3VH/tTF融合蛋白具有hu3D3VH的选择性结合能力同时具有TF的促凝血活性,为开展选择性肺肿瘤血管血栓性栓塞研究奠定了基础。
- 颜江华王生育王阶平王勇军黄志平王臻
- 关键词：TTF血栓肺癌
- 通用效应因子tTF//SA选择性诱发肿瘤组织血管栓塞
- 选择性诱发肿瘤组织血管血栓性栓塞从而导致肿瘤组织的缺血性坏死是一种很有前景的抗肿瘤策略。tTF融合蛋白利用导向载体将截短的组织因子tTF选择性地定位于肿瘤组织血管,可以诱发肿瘤组织血管栓塞,阻断肿瘤营养物质和氧气的供给,...
- 王臻
- 关键词：血管栓塞
- 文献传递
- 凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白的表达及活性鉴定
- 2007年
- 制备凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白,并鉴定其生物学活性。利用PCR技术构建tTF与链霉亲和素SA的融合基因,克隆至表达载体pET22b(+),在E.coliBL21(DE_3)中表达,镍亲和层析柱纯化tTF/SA融合蛋白。凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白中tTF的活性,ELISA鉴定融合蛋白中SA与生物素Biotin结合的活性。获得序列正确的tTF/SA/pET22b(+)重组子,融合基因在E.coliBL21(DE_3)中高效表达。纯化后的融合蛋白具有活化FⅩ、引起血液凝固的能力,且能与生物素结合。融合基因已成功在E.coliBL21(DE_3)中表达,tTF/SA融合蛋白具有TF和SA活性。融合蛋白tTF/SA可作为通用效应因子,与生物素化的肿瘤组织血管特异性载体联用,实现选择性诱发肿瘤组织血管栓塞的多点治疗。
- 王臻颜江华王阶平谢莲英吴娜
- 关键词：融合蛋白血管栓塞
- 瑶里釉果矿及绕南瓷石加工遗址考古调查
- 2022年
- 瑶里,古称窑里,因是景德镇陶瓷发祥地而得名。瑶里镇,隶属于江西省东北部景德镇市的浮梁县,位于浮梁县东部,距离景德镇市区和浮梁县城50千米。地处祁门、休宁、婺源、浮梁四县交界处,东与北分别与安徽休宁、祁门两县交界,东南与婺源县毗邻,西南与鹅湖镇相连,西北与金竹山乡接壤。境内人文旅游及自然资源都非常丰富,素有“瓷之源、茶之乡、林之海“的美称。瑶里境域地势较高,由四周向中间倾斜。
- 刘淼刘淼李蔚(整理)曹心悦(整理)马俊(整理)苏润(整理)马俊钟颖琦(整理)姜武威(整理)王臻(整理)
- 关键词：遗址考古景德镇陶瓷人文旅游
- 人源化抗人肺癌单域抗体基因的构建、表达及活性分析被引量：6
- 2006年
- 目的:构建人源化的抗人肺癌单域抗体hu3D3VH基因,在大肠杆菌中表达,对其蛋白活性进行分析。方法:采用CDR移植技术对mAb3D3的重链可变区进行人源化,通过重叠PCR获得hu3D3VH的基因。构建pET22(b+)/hu3D3VH表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达。表达产物通过Ni亲和层析柱纯化。采用间接ELISA和竞争抑制ELISA法进行活性分析。结果:通过重叠PCR获得序列正确的目的基因。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,目的蛋白的纯度达95%以上。hu3D3VH具有与亲本抗体相同的抗原反应性,并能抑制mAb3D3与L342细胞的结合。结论:获得的人源化单域抗体hu3D3VH,保留了与mAb3D3相同的反应性和特异性,为进一步临床应用奠定了基础。
- 王阶平庄国洪杨桂旺王臻李文珠谢莲英颜江华
- 关键词：人源化活性分析
- RILP通过与RaIGDS相互作用调控乳腺癌细胞的迁移与侵袭
- RILP（Rab7-interacting lysosomal protein）是小分子GTP酶Rab7和Rab34的下游效应因子，其可以被活化形式的Rab7募集到晚期内体和溶酶体膜上，并且RILP可以募集功能性的dyn...
- 王臻
- 关键词：乳腺癌
- 重组人瘦素的基因构建、表达及活性鉴定被引量：1
- 2006年
- 根据NCBI中公布的人瘦素cDNA序列，设计并合成了6个89bp左右的DNA小片段，经重叠延伸PCR扩增获得464bp的rhLep的完整基因片段。构建pET22b（＋）／rhLep表达载体，转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达。目的蛋白以包涵体的形式表达，表达量占菌体总蛋白的50％以上。表达产物用Ni^2＋亲和层析柱纯化，SDS-PAGE结果表明，含6×His标签的目的蛋白的相对分子量约16kD。MTT比色法实验显示，当低剂量（10～30ng／mL）时，rhLep具有促进内皮细胞生长的作用；在高剂量（50-225ng／mL）时，rhLep具有杀伤人内皮细胞的活性。其最大杀伤率达到98．8％。吖啶橙荧光染色观察到高剂量rhLep对人内皮细胞有明显的凋亡作用。以上工作为进一步了解瘦素的体内体外生物活性奠定了基础。
- 吴娜张长弓谢莲英王臻颜江华
- 关键词：瘦素基因构建细胞存活率
- 肺癌靶向通用载体hu3D3／cSA融合蛋白的制备和活性分析
- 2008年
- 目的制备一种新型的肺癌靶向通用载体hu3D3与核心链霉亲和素（core-streptavidin，cSA）的融合蛋白hu3D3／cSA，并鉴定其活性。方法PCR扩增cSA基因，克隆至质粒hu3D3／pET-22b（＋）而获得表达载体hu3D3／cSA／pET-22b（＋），并在E.coli BL21（DE3）中表达，镍亲和层析柱纯化hu3D3／cSA融合蛋白，采用TEA缓冲液进行复性。SDS-PAGE和Westem blot鉴定融合蛋白四聚体的形成。FTTC标记hu3D3／cSA，通过荧光显微镜分析hu3D3组分的抗原反应性和特异性，流式细胞术比较hu3D3／cSA和hu3D3与靶点的结合能力；ELISA和Westem blot鉴定cSA组分结合生物素（biotin）的能力。结果获得序列正确的hu3D3／cSA／pET-22b（＋）重组子，融合基因在E.coli BL21（DE3）中主要以包涵体的形式表达。纯化复性后的融合蛋白能够形成四聚体复合物，保留了cSA结合生物素的活性，hu3D3组分能与肺癌细胞表面抗原结合，且结合能力与单体hu3D3相比有明显增强。结论成功制备了具有结合靶抗原和生物素活性的hu3D3／cSA融合蛋白，同时改善了hu3D3组分结合其靶点的亲合力（avidity）。因此，hu3D3／cSA可以作为一个通用的肺癌靶向载体，与多种生物素化的抗肿瘤药物或试剂联用，有望为多药物联合靶向治疗肺癌提供一种可行的方法。
- 王勇军颜江华王阶平王臻黄志平陈彩霞
- 关键词：单域抗体肺癌
- 重组人脂联素基因构建、表达、纯化及活性鉴定被引量：2
- 2007年
- 根据脂联素cDNA序列设计并合成9条寡聚核苷酸片段,经重叠PCR技术获得重组人脂联素基因.构建pET-22b(+)/ADPN表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上.表达产物通过Ni-NTA柱纯化,SDS-PAGE分析显示,其分子量约为30 ku,与预期结果一致.内皮细胞生长抑制实验证实,重组人脂联素生理浓度下具有抑制人内皮细胞生长的活性并呈时间依赖性.以上工作为进一步研究脂联素的生物学功能奠定了基础.
- 谢莲英张长弓吴娜王臻颜江华
- 关键词：脂联素基因构建蛋白表达
- Rh催化的c-H键的活化及c-C和c-N键的形成
- C—X键(X=C，N，O，S，P，etc.)的形成是有机化学中最重要、最基础的研究内容之一。近年来，过渡金属参与的导向基团辅助的C—H键的活化及C—X键的形成反应取得重要进展。本论文以Rh的配合物为催化剂，探索并发展了几...
- 王臻
- 关键词：碳-碳键活化机理铑配合物
- 文献传递
