王旭初
- 作品数:8 被引量:43H指数:2
- 供职机构:中国科学院植物研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一种蛋白质凝胶内酶解的方法
- 本发明公开了一种蛋白质凝胶内酶解的方法。该方法包括下述步骤:1)将含有目标蛋白的凝胶用超纯水洗涤;将凝胶脱水,干燥;2)将干燥后的凝胶用酸化过的胰蛋白酶工作液浸泡0.5-1.5h后,吸去多余酶工作液;所述酸化过的胰蛋白酶...
- 李银心王旭初
- 文献传递
- 适用于盐生植物的双向电泳样品制备方法被引量:27
- 2006年
- 比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)、三氯乙酸沉淀法(E-TCA)和酚抽法(Phe)3种方法对盐生植物盐角草(SalicorniaeuropaeaL.)总蛋白的提取效果。3种方法分别得到579、343和535个蛋白点;TCA和E-TCA法所得图谱均存在严重的横向纹理,Phe法所得图谱则背景干净,基本上没有纹理。说明Phe法不仅能很好地提取盐角草蛋白,而且能有效去除样品中的盐分。对Phe法的提取液进行了改进,所得图谱背景更加清晰,蛋白点数增加。为其他盐生植物以及嗜盐微生物蛋白质的提取提供了重要参考。
- 李肖芳韩和平王旭初范鹏祥李银心
- 关键词:蛋白质提取盐角草
- 一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法被引量:16
- 2007年
- 在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果。
- 王旭初范鹏祥李银心
- 关键词:蛋白质组双向电泳肽质量指纹图谱质谱分析
- 一种考马斯亮蓝染色法及其专用凝胶固定液和染色剂
- 本发明公开了一种考马斯亮蓝染色法及其专用凝胶固定液和染色剂。该考马斯亮蓝染色法包括以下步骤:1)将SDS-PAGE胶置于本发明的凝胶固定液中,常温下固定0.5-2.0小时;2)将胶转移至体积百分浓度为0.5-3.0%的醋...
- 李银心王旭初
- 文献传递
- 一种蛋白质凝胶内酶解的方法
- 本发明公开了一种蛋白质凝胶内酶解的方法。该方法,包括下述步骤:1)将含有目标蛋白的凝胶用超纯水洗涤;将凝胶脱水,干燥;2)将干燥后的凝胶用酸化过的胰蛋白酶工作液浸泡0.5-1.5h后,吸去多余酶工作液;所述酸化过的胰蛋白...
- 李银心王旭初
- 文献传递
- 一种考马斯亮蓝染色法及其专用凝胶固定液和染色剂
- 本发明公开了一种考马斯亮蓝染色法及其专用凝胶固定液和染色剂。该考马斯亮蓝染色法包括以下步骤:1)将SDS-PAGE胶置于本发明的凝胶固定液中,常温下固定0.5-2.0小时;2)将胶转移至体积百分浓度为0.5-3.0%的醋...
- 李银心王旭初
- 文献传递
- 一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液
- 本发明公开了一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液。该植物总蛋白提取液是含有乙二胺四乙酸80-120mM,三羟甲基氨基甲烷80-120mM,四硼酸钠40-60mM,维生素C 40-60mM,质量体积浓度为0.8-1.2%...
- 李银心王旭初
- 文献传递
- 一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液
- 本发明公开了一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液。该植物总蛋白提取液是含有乙二胺四乙酸80-120mM,三羟甲基氨基甲烷80-120mM,四硼酸钠40-60mM,维生素C 40-60mM,质量体积浓度为0.8-1.2%...
- 李银心王旭初
- 文献传递