王扬
- 作品数：21 被引量：100H指数：5
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CIK细胞的制作及对不同肿瘤细胞株体外抗肿瘤作用的研究被引量：31
- 2005年
- 目的:制备细胞因子激活杀伤(CIK)细胞并观察其生物学特性及对不同肿瘤细胞株的杀伤作用。方法:外周血单个核细胞用无血清培养基经干扰素γ(IFNγ),CD3McAb,白介素2(IL2),白介素1α(IL1α)诱导,制作CIK细胞,以淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)作为对照,流式细胞仪检测CIK细胞的免疫表型,MTT法检测其对不同肿瘤细胞株的杀瘤活性。结果:CIK细胞与LAK细胞相比增殖速度快、最终增殖倍数高。CIK细胞主要由CD3和CD56双阳性细胞构成。CIK细胞对多种肿瘤细胞具有较强的杀伤活性。结论:CIK细胞过继免疫治疗是一种非常有前景的抗肿瘤治疗方法。
- 隋承光孟凡东王晓华王扬蒋涛戚新王晓颖姜又红
- 关键词：肿瘤过继免疫治疗
- 干扰素-γ增强全反式维甲酸诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)和全反式维甲酸(all-trans retinoicacid,ATRA)联合作用抑制人肝癌细胞株SMMC-7721生长及诱导细胞凋亡的作用。方法用IFN-γ和ATRA处理SMMC-7721细胞后,应用MTT法检测SMMC-7721细胞的增殖抑制率,电镜观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测核因子(Nuclear Factor-kappaB,NF-κB)的表达变化。结果ATRA作用于SMMC-7721后,细胞生长受到抑制,并且诱导细胞凋亡发生,和IFN-γ联合作用后,这种作用加强;SMMC-7721细胞中NF-κB的表达在ATRA作用后减少,ATRA与IFN-γ联合作用后进一步减少。结论IFN-γ可以增强ATRA对于肝癌细胞的生长抑制及诱导细胞凋亡的作用,并且明显下调了NF-κB的表达。
- 尹元琴王晓华马萍付立业王扬
- 关键词：肝细胞肝癌全反式维甲酸干扰素-Γ核因子-ΚB
- 乙肝疫苗增强细胞因子诱导的杀伤细胞对于转乙型肝炎病毒基因小鼠的治疗作用被引量：3
- 2010年
- 目的观察乙肝疫苗是否增强细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cell，CIK）对于乙型肝炎病毒转基因小鼠（hepatitis Bvirustransgenicmice，HBV—Tg）的抗病毒作用。方法给予HBV—Tg腹腔注射CIK细胞，皮下注射乙肝疫苗，用荧光定量PCR检测外周血中HBV DNA水平变化，流式细胞仪检测外周血中T淋巴细胞亚群，并用HE染色观察肝脏的组织病理改变。结果CIK细胞降低了HBV—Tg鼠外周血中病毒载量，血中CD3^＋、CD4^＋及CD8^＋细胞增多，乙肝疫苗和CIK细胞联合应用后，这种作用增强。结论乙肝疫苗增强了CIK对于HBV—Tg小鼠的治疗作用，这种增强作用是否通过增加体内CD3^＋、CD4^＋及CD8^＋细胞，尤其是CD8^＋细胞而实现，有待进一步研究。
- 尹元琴都姝妍王扬戴晓淳舒红隋承光孟凡东姜又红
- 关键词：乙型肝炎转基因小鼠CIK细胞乙肝疫苗
- 肾癌细胞和G250单克隆抗体复合物致敏树突状细胞肿瘤疫苗的制备
- 2012年
- 目的:以肾癌细胞和G250单克隆抗体(G250 monoclonal antibody,G250 mAb)复合物致敏树突状细胞(dendriticcells,DC)制备肾癌DC疫苗,并检测其活化水平,为临床应用DC肿瘤疫苗提供依据。方法:制备凋亡的肾癌细胞与G250mAb形成的复合物(G250 mAb IgG-complexed apoptotic tumor cell,IC-ATC)。取健康人新鲜外周血分离单个核细胞(peripheralblood mononuclear cell,PBMC),以GM-CSF和IL-4诱导PBMC成未成熟的树突状细胞(immature dendritic cells,iDC),将iDC分别负载凋亡肿瘤细胞(apoptotic tumor cell,ATC)、IC-ATC、G250 mAb,并均以TNF-α诱导成熟树突状细胞(mature dendriticcells,mDC),将未负载的DC作为对照组。流式细胞术检测各组mDC的免疫表型、ELISA试剂盒检测IL-12分泌水平,CCK-8法检测mDC刺激淋巴细胞增殖的能力。结果:成功制备IC-ATC致敏的DC疫苗。相对于负载ATC、G250mAb和未负载的DC,负载IC-ATC的DC疫苗显著上调CD86、CD80、CD83、HLA-DR的表达[(42.04±3.42)%vs(28.34±1.16)%、(33.77±1.61)%、(26.52±2.14)%,P<0.05;(38.17±2.55)%vs(23.79±2.41)%、(31.94±3.29)%、(24.32±3.23)%,P<0.05;(79.39±1.44)%vs(69.06±2.01)%、(74.49±1.35)%、(66.71±3.83)%,P<0.05;(35.52±2.72)%vs(26.90±2.82)%、(29.45±1.58)%、(27.42±2.11)%,P<0.05]和IL-12分泌水平(25.04 vs 5.27、13.32、7.53,P<0.05),且能更有效地刺激淋巴细胞增殖(4.02 vs 1.73、1.22、1.41,P<0.01)。结论:IC-ATC可有效促进DC成熟和活化,IC-ATC致敏的DC疫苗诱导淋巴细胞增殖能力显著增强。
- 孙海燕刘晓辉马楠王扬蒋涛刘云鹏姜又红
- 关键词：树突状细胞肾癌肿瘤疫苗
- Wnt/β-catenin信号通路中Wnt基因对肾癌细胞的生物学影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨Wnt基因对肾透明细胞癌Caki-2细胞的生物学影响。方法细胞分3组:Caki-2组(空白对照)、shRNA+Wnt+Caki-2组(慢病毒沉默Caki-2细胞中的Wnt基因)、空载体组(实验对照),CCK-8法观察不同时间各组细胞的增殖情况;透射电镜观察沉默Wnt基因对Caki-2细胞凋亡的影响;Transwell小室方法检测各组细胞侵袭能力的变化;实时PCR观察Wnt/β-catenin信号通路中下游基因的变化和凋亡相关基因的变化。结果 shRNA+Wnt+Caki-2组出现了细胞增殖抑制,其增殖能力与其他2组相比差异有统计学意义(P<0.05)。sh RNA+Wnt+Caki-2组表现出明显的细胞凋亡变化,出现凋亡小体。侵袭实验显示,shRNA+Wnt+Caki-2组迁出的细胞数明显低于其他2组(P<0.05);shRNA+Wnt+Caki-2组中Wnt mRNA、β-catenin mRNA和Bcl-2 mRNA的表达水平均低于其他2组(P<0.05)。结论慢病毒沉默Wnt基因,影响了肾透明细胞癌Caki-2细胞的增殖,促进了细胞的凋亡,抑制了Caki-2细胞的侵袭。
- 孟凡东李妍吴迪蒋涛王扬隋承光姜又红
- 关键词：肾癌WNTΒ-CATENIN
- 树突状细胞分泌的exosomes体外诱导特异性CTL抗肾癌的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的提取树突状细胞外来体(DC)分泌的外来体(exosomes),检测其体外刺激同源T细胞活化和诱导特异性细胞毒性T细胞(CTL)抗肾癌769-P的免疫效应。方法从健康志愿者外周血单个核细胞中诱导培养DC,流式细胞术检测DC的表型;通过超速离心法结合超滤法制备DC分泌的exosomes,透射电镜观察exosomes的形态,MTT法检测DC分泌的exosomes诱导T细胞的增殖和特异性CTL对769-P的体外杀伤活性。结果超速离心法结合超滤法能从DC上清中分离exosomes,并且肿瘤抗原致敏DC分泌的exosomes能有效促进T细胞的增殖及特异性CTL抗769-P效应,T细胞增殖倍数达(1.68±0.22)%,CTL杀瘤活性为(38.23±2.16)%。结论抗原致敏DC分泌的exosomes能有效诱导激活具有较强杀瘤活性的肿瘤特异性CTL。
- 王新利李卿高婷付立叶王扬蒋涛姜又红
- 关键词：外来体细胞毒性T细胞肾癌
- 人皮肤成纤维细胞原代培养及生物学特性被引量：11
- 2010年
- 目的探索和建立人皮肤成纤维细胞原代培养的方法,为皮肤成纤维细胞在临床医学中的应用提供可靠的科学依据。方法胰蛋白酶消化法分离培养人皮肤成纤维细胞;细胞生长曲线及MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪测定细胞生长周期及细胞增殖指数;倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态;HE染色观察细胞爬片下的形态及着色;免疫组织化学染色观察成纤维细胞中间丝波形蛋白;电子显微镜下观察成纤维细胞超微结构。结果体外用胰蛋白酶消化法建立了人皮肤成纤维细胞;传5代内细胞及传5代内冻存复苏后人皮肤成纤维细胞增殖能力均很强;倒置镜下观察、HE染色、波形蛋白免疫组化染色及电镜下观察鉴定培养细胞的形态及生物学特性符合成纤维细胞。结论本研究确立了体外人皮肤成纤维细胞原代培养。
- 王晓华王扬蒋涛付立业姜又红
- 关键词：皮肤原代培养成纤维细胞细胞增殖指数细胞形态学
- 重组腺病毒载体Ad-CRT/MAGE-A3抑制肺腺癌细胞A549侵袭的体外研究
- 2012年
- 目的:探讨同时携带CRT基因及MAGE-A3基因的重组腺病毒载体转染人肺腺癌细胞A549后基因的表达及其对体外增殖、侵袭、凋亡及血管形成能力的影响。方法:Ad-CRT/MAGE-A3转染A549细胞,转染48h后以Western blotting法检测CRT及MAGE-A3蛋白的表达;MTT法检测Ad-CRT/MAGE-A3对A549细胞增殖的影响;Transwell方法检测Ad-CRT/MAGE-A3对A549细胞侵袭的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测Ad-CRT/MAGE-A3对A549细胞凋亡的影响;小管形成实验检测Ad-CRT/MAGE-A3对血管形成的影响。结果:转染48h,Western blotting结果显示转染Ad-CRT/MAGE-A3的A549细胞能够表达CRT及MAGE-A3蛋白;MTT检测结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制A549细胞的增殖;Tran-swell检测结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制A549细胞的侵袭能力;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够诱导A549细胞凋亡;小管形成实验结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制血管形成。结论:Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制A549的增殖及侵袭能力,诱导其凋亡,并能明显抑制血管内皮细胞血管生成,其作用机制可能与CRT及MAGE-A3蛋白同时表达后相互作用有关,提示Ad-CRT/MAGE-A3可以作为潜在的肺癌基因治疗的新方法。
- 刘新莉赵丹李晓曦王扬李岩马萍
- 关键词：CRT重组腺病毒载体血管形成
- 姜黄素对酒精诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用被引量：4
- 2016年
- 目的探讨姜黄素在酒精诱导的Hep G2细胞氧化损伤中的保护作用,揭示姜黄素抗酒精性肝损伤的作用机制。方法不同浓度的姜黄素处理Hep G2细胞24 h后,加入酒精诱导细胞损伤。采用MTT检测姜黄素对损伤细胞活力的影响,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量以及活性氧(ROS)水平,采用Real-time PCR检测SOD1、SOD2和CAT m RNA的表达。结果 300 mmol/L酒精可致近50%的细胞死亡,4μmol/L的姜黄素对酒精引起的细胞毒性作用保护效果最为显著,可明显改变细胞内SOD活性、MDA含量及ROS水平。与酒精组比较,4μmol/L的姜黄素可显著上调细胞内SOD1、SOD2和CAT m RNA的表达水平。结论姜黄素通过调节细胞的抗氧化能力削弱酒精对肝癌Hep G2细胞的损伤作用。
- 孟凡东隋承光蒋涛王扬
- 关键词：姜黄素
- 卵巢癌患者自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗前后免疫功能的检测与分析被引量：8
- 2006年
- 目的观察卵巢癌患者自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗前后患者外周血淋巴细胞亚群的变化,为综合评价临床应用CIK细胞疗法治疗卵巢癌的效果提供依据。方法2004-2005采集中国医科大学附属第一医院5例卵巢癌患者的外周血单个核细胞,经多种细胞因子诱导制成CIK细胞,回输前及回输后取患者外周血,流式细胞仪测定外周血淋巴细胞亚群的变化。结果诱导培养后,CD3+/CD56+效应细胞的比例明显升高;CIK细胞回输后患者外周血CD3+、CD3+/CD8+、CD3+/CD56+阳性淋巴细胞亚群的比例明显升高。结论CIK细胞疗法可以提高卵巢癌患者的细胞免疫功能,提高对肿瘤细胞的杀伤作用。
- 孟凡东隋承光王晓华王扬蒋涛付立业姜又红
- 关键词：杀伤细胞细胞表型
