王峰
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
- 供职机构：华侨大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金福建省厦门市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组腺相关病毒规模化生物包装技术被引量：8
- 2009年
- 重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus,rAAV)的诸多优点使其成为具有巨大潜力的人类基因治疗载体。人类基因治疗临床前和临床研究以及基因治疗产品的市场化要求rAAV载体生产的规模化。自1989年野生型的腺相关病毒序列被Samulski报道以来,rAAV的生产工艺已经从传统的质粒共转染发展到应用包装细胞系和生产细胞系,包装细胞也从"人体细胞"衍化到"昆虫细胞"。目前rAAV的生产规模和病毒载体质量都完全可以符合临床应用要求,有效地促进rAAV在基因治疗临床上的广泛运用。以下将着重介绍rAAV规模化生物包装技术的发展趋势,尤其各种规模化生产系统的要点。
- 王峰刁勇肖卫东许瑞安
- 关键词：重组腺相关病毒生物技术昆虫细胞规模化生产
- 重组腺相关病毒载体在肺癌治疗中的应用被引量：5
- 2009年
- 重组腺相关病毒(recombination Adeno-associated virus,rAAV)突出的特点使其成为基因治疗载体中的佼佼者,本文综述了rAAV基因药物在肺癌治疗中取得的进展并对其未来发展趋势进行了探讨。
- 王峰刁勇许瑞安
- 关键词：重组腺相关病毒载体肺癌
- 人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子在肿瘤基因治疗中的应用被引量：2
- 2012年
- 目前肿瘤靶向基因治疗是肿瘤基因治疗领域中非常具有应用前景的疗法之一。大量研究表明肿瘤中端粒酶会异常表达。与常用启动子相比,人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子能够靶向端粒酶阳性细胞如肿瘤细胞等,而成为肿瘤治疗研究的热点。本文就hTERT启动子介导毒性基因、自杀基因、溶瘤病毒等进行肿瘤的基因治疗,以及hTERT启动子优化策略进行阐述。
- 王峰刁勇许瑞安
- 关键词：基因治疗人端粒酶逆转录酶
- 表达Kallistatin的9型重组腺相关病毒的制备及其体外表达效率被引量：1
- 2013年
- 采用三质粒磷酸钙共转染生产系统,制备出可以表达内源性抗肿瘤血管生成因子(Kallistatin)的9型重组腺相关病毒(rAAV2/9)和2型重组腺相关病毒(rAAV2/2).rAAV经银染法鉴定其纯度;采用WesternBlotting法比较rAAV2/9和rAAV2/2外壳蛋白的大小;qPCR方法检测rAAV的滴度.使用rAAV2/9-Kal-listatin和rAAV2/2-Kallistatin分别感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后,RT-PCR和ELISA法分别检测Kallistatin的mRNA和蛋白表达水平.结果表明:纯化的病毒纯度达到98%以上;rAAV9外壳蛋白比rAAV2的大.感染HUVEC后,rAAV2/9介导Kallistatin在mRNA和蛋白表达水平都要比rAAV2/2高.
- 王峰许瑞安
- 关键词：KALLISTATIN人脐静脉血管内皮细胞
- 腺相关病毒载体介导人组织激肽释放酶结合蛋白的胞内生物活性研究被引量：1
- 2014年
- 人组织激肽释放酶结合蛋白(Kallistatin,KAL)是一种分泌型蛋白,其通过与胞外受体结合来调控多条下游信号通路,但尚未有KAL的胞内活性研究以及胞内KAL是否具有与胞外相似生物学活性的报道。通过构建无信号肽的KAL腺相关病毒表达载体(rAAV-NSK)来探索KAL蛋白的胞内活性。转染rAAV-NSK后,所有受试细胞均有KAL胞内表达但不分泌,其中HUVEC的增殖、迁移和小管形成均受到抑制;NCI-H460、NCI-H446和A549受到不同程度抑制。这一细胞水平研究,不仅证实了KAL的胞内活性,也暗示着KAL将可能作为一种"平衡因子"参与多靶点调控,也为解释目前有关KAL在PI3K-Akt信号通路的调控矛盾提供了新的思路。
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