王剑锋
- 作品数：8 被引量：40H指数：5
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅科研项目湖南省科技厅社会发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鸡FDM后极部巩膜MMP-2活性表达的动态变化被引量：5
- 2005年
- 目的:研究形觉剥夺对小鸡后极部巩膜基质金属蛋白酶2(MMP2)活性的影响以阐明小鸡形觉剥夺性近视眼(FDM)巩膜重塑的可能机制。方法:50只1d龄来亨雏鸡采用半透明塑料眼罩单眼遮盖制备FDM动物模型,按实验时间随机分为FDM4,7,14,21,30d5组,每组10只。对侧非遮盖眼作为自身对照。另外,每组随机选取10只同龄、非遮盖小鸡作为正常对照。于预定实验时间分别采用视网膜镜与A超检测实验眼屈光度与眼轴长度,采用明胶酶谱法检测各组小鸡后极部巩膜明胶酶活性变化。结果:各FDM组后极部巩膜MMP2活性增高,与自身对照、正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);随着剥夺时间延长,其后极部巩膜MMP2活性水平逐渐升高,至21d达高峰,其后稍下降,但仍维持于较高水平,不同FDM组组间差异有统计学意义(P<0.01);小鸡FDM后极部巩膜MMP2活性动态变化与眼轴长度、屈光度变化呈高度一致;后极部巩膜MMP2活性与眼轴长度呈正相关(r=0.989,P<0.01),与屈光度呈负相关(r=-0.989,P<0.01)。结论:后极部巩膜MMP2活性特异性增高极可能为启动小鸡FDM巩膜细胞外基质(ECM)主动重塑的原因之一。
- 刘双珍吴文灿王剑锋谭星平江海波
- 关键词：形觉剥夺性近视眼巩膜小鸡
- 小鸡形觉剥夺性近视眼巩膜基质金属蛋白酶2mRNA表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨小鸡形觉剥夺性近视眼 (FDM)后极部巩膜基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )mRNA表达水平的时间动态性变化以揭示小鸡FDM巩膜细胞外基质 (ECM)主动重塑的可能分子机制。方法 :取 1d龄来亨雏鸡以半透明眼罩分别遮盖右眼 4 ,7,14 ,2 1,30d制备FDM动物模型 ,对侧眼未遮盖眼为自身对照眼 ,并随机选取同龄小鸡作为正常对照眼 ,每组 10只。实验前及各预定实验时间进行视网膜检影验光及眼轴长度测量。采用一步法逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)检测每组小鸡后极部巩膜MMP 2mRNA表达水平。结果 :与正常对照组、自身对照组相比 ,FDM组小鸡后极部巩膜MMP 2mRNA表达明显增高 (P <0 .0 0 1) ;不同遮盖时间组MMP 2mRNA表达水平不同 ,随遮盖时间延长其表达逐渐上调 ,至 14d达最高峰 ,但以后轻度下降 ,且维持在一较高水平 ;自身对照组MMP 2mRNA表达水平较同龄正常对照组呈上调趋势 ,但组间比较无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :后极部巩膜MMP 2mRNA表达增高极可能为启动FDM巩膜ECM早期主动重塑的始发原因。
- 吴文灿刘双珍王剑锋谭星平江海波
- 关键词：小鸡形觉剥夺性近视眼FDM巩膜基质金属蛋白酶2MRNA表达
- 基质金属蛋白酶-2在实验性近视眼鸡巩膜成纤维细胞的表达
- 2005年
- 目的研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在形觉剥夺性近视眼(formdeprivation myopia,FDM)鸡巩膜成纤维细胞的表达。方法20只1d龄来亨雏鸡以半透明眼罩遮盖右眼14d制备FDM动物模型,随机取10只FDM眼去除遮盖7d作为恢复组,均以对侧未遮盖眼作为对照组。将各组小鸡眼后极部巩膜成纤维细胞作体外培养并传2代,行光镜与透射电镜形态学观察,并采用SABC免疫细胞化学染色法检测MMP-2的表达,进行计算机图像分析及统计学检验。结果培养的正常鸡巩膜成纤维细胞胞浆表达MMP-2,阳性灰度值为192·2319±1·2521。FDM组细胞MMP-2染色阳性灰度值为168·1730±5·0039,较对照组MMP-2表达明显增高(P<0·01)。恢复组阳性灰度值为180·4001±2·3522,其MMP-2表达较FDM组有所回降(P<0·01),但与对照组相比仍有升高,差异有显著性(P<0·01)。结论MMP-2参与形觉剥夺性近视眼的发生发展与恢复的过程,在近视发生机制中起重要作用。
- 蒋莉刘双珍王剑锋
- 关键词：形觉剥夺性近视眼成纤维细胞基质金属蛋白酶-2
- 尿激酶型纤溶酶原激活剂诱导巩膜内源性TGF-β1表达抑制小鸡FDM形成被引量：1
- 2005年
- 目的:研究外源性尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)对小鸡形觉剥夺性近视眼(FDM)形成的影响及其可能的分子机制。方法:随机选取1d龄来亨雏鸡100只单眼遮盖(MD)制备FDM动物模型,同时球后注射uPA500U(50μL)、PAI-150U(50μL)或PBS50μL进行干预,1次/d。阴性对照组仅单纯遮盖。另随机选1d龄来亨雏鸡100只进行上述相同干预处理作为各自对照组。上述各组每组小鸡25只。实验前、14d后每组随机抽取10只用A超及带状视网膜检影镜测量眼轴长度及屈光度变化。摘除眼球,取后极部巩膜,HE染色法行组织病理学观察,免疫组化法检测后极部巩膜TGF-β1表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)一步法检测TGF-β1mR-NA表达变化。结果:uPA可明显抑制MD眼轴延长及近视性屈光度增加,与阴性对照组、PBS组比较差别有统计学意义(P<0.01),而PAI-1无作用;uPA可抑制正常小鸡眼轴延长及远视屈光度降低(P<0.05),而PAI-1作用正好相反,具明显促进作用(P<0.01)。正常小鸡后极部巩膜均可检测到较丰富的TGF-β1阳性表达,而FDM明显降低。uPA干预后TGF-β1阳性表达信号显著增加,而PAI-1干预后表达显著减弱。单纯MD眼后极部巩膜TGF-β1mRNA表达较正常对照组显著降低(P<0.01)。与阴性对照组、PBS组比较,uPA可上调MD与正常眼TGF-β1mRNA表达,而PAI-1对正常小鸡起下调作用(P<0.01),对MD眼无作用。结论:uPA可显著抑制小鸡FDM形成,其作用机制可能与诱导后极部巩膜内源性TGF-β1表达与活化密切相关。
- 吴文灿刘双珍王剑锋谭星平颜文韬李文生
- 关键词：形觉剥夺性近视眼尿激酶型纤溶酶原激活剂TGF-Β1巩膜
- 外源性视黄酸对鸡后巩膜基质MMP-2/TIMP-2表达作用的动态观察被引量：6
- 2005年
- 目的探讨外源性视黄酸(RA)对小鸡后极部巩膜基质MMP-2表达的作用。方法新孵化来亨鸡90只随机分为三组,实验组右眼球后注射RA,隔日1次;左眼为自身对照;阴性对照组右眼球后注射生理盐水;正常对照组不做任何处理。于4、8、14 d时各组取10只测量眼轴和屈光度后摘取眼球,采用一步法逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR法)检测每组小鸡后极部巩膜MMP-2与TIMP-2 mRNA转录水平。结果实验组眼轴明显延长,屈光度增加,后极部巩膜MMP-2 mRNA转录明显增高,与正常组与阴性对照组比较,差异有显著性统计学意义(P<0.01)。注射后随时间延长眼轴及屈光度逐渐增加,组内不同时间差异有显著性统计学意义(P<0.01),MMP-2 mRNA转录上调,组内不同时间差异无显著性统计学意义(P>0.05)。TIMP-2 mRNA转录与之相反。自身对照组眼轴及屈光度均有增加,MMP-2 mRNA转录较同龄正常对照组有轻度上调,TIMP-2有下调,与正常组与阴性对照组比较,差异有显著性统计学意义(P<0.01)。结论外源性RA能够调节巩膜MMP-2/TIMP-2的转录,并可能通过这一途径促进眼轴及屈光度的增加。
- 王剑锋刘双珍吴文灿
- 关键词：视黄酸眼轴屈光度基质金属蛋白酶2
- 小鸡形觉剥夺性近视眼后极部巩膜MMP-2与TIMP-2 mRNA表达的动态变化被引量：19
- 2004年
- 目的 探讨小鸡形觉剥夺性近视眼 (form deprivationmyopia,FDM )后极部巩膜基质金属蛋白酶 2 (matrixmetalloproteinase 2 ,MMP 2 )及其特异性组织抑制剂 (tissuein hibitorofmatrixmetalloproteinase 2 ,TIMP 2 )mRNA表达的时间动态性变化。方法 5 0只 1d龄来亨雏鸡以半透明眼罩分别遮盖右眼 4、7、14、2 1、30d制备FDM动物模型 ,每组10只 ,未遮盖眼为自身对照眼 ,并随机选取同数目同龄小鸡作为正常对照眼。实验前及预定实验时间进行视网膜检影验光和眼轴长度测量。摘除眼球 ,提取后极部巩膜总RNA ,采用一步法逆转录 聚合酶链反应检测每组小鸡后极部巩膜MMP 2、TIMP 2mRNA表达水平。结果 与正常组、自身对照组相比 ,FDM后极部巩膜MMP 2mRNA显著增高 ,TIMP 2mRNA表达明显降低 ,组间差异非常显著 (P <0 .0 1)。随遮盖时间延长 ,MMP 2mRNA表达逐渐上调 ,7～ 2 1d达最高峰 ,以后轻度下降 ,但仍维持于一较高水平 ,不同遮盖时间组间差异显著 (P <0 .0 1) ,而TIMP 2mRNA表达与之相反。自身对照组MMP 2mRNA表达较同龄正常对照组有轻度上调趋势 ,TIMP 2有下调趋势 ,但组间均无统计学差异 (P >0 0 5 )。结论 MMP 2 /TIMP
- 吴文灿刘双珍王剑锋谭星平江海波
- 关键词：形觉剥夺性近视基质金属蛋白酶2
- 外源性视黄酸对鸡后巩膜基质MMP-2表达作用的动态观察被引量：11
- 2004年
- 注射后随时间延长眼轴及屈光度逐渐增加,不同时间组间差异极显著(P<0.01),MMP-2mRNA表达上调,不同时间组间差异无显著性(P>0.05)。自身对照组眼轴及屈光度均有增加,MMP-2mRNA表达较同龄正常对照组有轻度上调,组间差异极显著(P<0.01)。免疫组化显示,MMP-2表达的增高主要在巩膜成纤维细胞层。结论外源性视黄酸能够上调巩膜MMP-2的转录和表达,并可能通过这一途径促进眼轴及屈光度的增加。
- 王剑锋刘双珍吴文灿谭星平江海波
- 关键词：MMP-2巩膜眼轴屈光度视黄酸
- 小鸡形觉剥夺性近视眼巩膜TIMP-2 mRNA表达的时间动态变化被引量：9
- 2003年
- 目的 探讨小鸡形觉剥夺性近视眼(FDM)后极部巩膜基质金属蛋白酶2组织抑制剂(TIMP-2)mRNA表达水平的动态变化。方法 取1d龄来亨雏鸡以半透明眼罩分别遮盖右眼4、7、14、21、30d制备FDM动物模型,未遮盖眼为自身对照眼,并随机选取同数目同龄小鸡作为正常对照眼。实验前及预定实验时间进行视网膜检影验光和眼轴长度测量,摘除眼球,提取后极部巩膜总RNA,采用一步法逆转录-多聚酶链反应检测每组小鸡后极部巩膜TIMP-2 mRNA表达水平。结果 与正常组、自身对照组相比,FDM后极部巩膜TIMP-2 mRNA表达明显降低,组间差异非常显著(P<0.01)。随遮盖时间延长其表达降低,7～21d降低最明显,FDM组间差异显著(P<0.01)。自身对照组TIMP-2 mRNA表达水平较同龄正常对照组存在下调趋势,但组间无统计学差异(P>0.05)。结论 后极部巩膜TIMP-2表达抑制极可能作为导致巩膜ECM主动重塑的始发因素之一而参与FDM形成。
- 吴文灿刘双珍王剑锋谭星平江海波
- 关键词：小鸡形觉剥夺性近视眼巩膜TIMP-2MRNA表达
