王俊瑞
- 作品数：92 被引量：218H指数：8
- 供职机构：内蒙古医科大学附属医院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金内蒙古自治区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学化学工程自动化与计算机技术更多>>
- CDK2干扰RNA对人脑胶质瘤细胞质蛋白质组的影响
- 2012年
- 目的构建人CDK2的干扰RNA真核表达载体,稳定转染人脑胶质细胞瘤SHG44细胞,经RT-PCR检测后,运用双向电泳-图像分析-质谱技术研究人脑胶质瘤细胞质蛋白质组的改变,探讨CDK2在SHG44细胞中的作用,为人脑胶质瘤的发生、发展的研究及诊断与治疗提供有价值的资料。方法 (1)构建CDK2干扰RNA真核表达载体并用双酶切和测序鉴定。(2)G418筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染的SHG44细胞系。(3)通过RT-PCR比较转染后CDK2mRNA的表达量。(4)双向凝胶电泳-质谱技术-数据库搜索,比较转染前后细胞质蛋白质组的变化。结果 (1)成功构建了CDK2干扰RNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo-CDK2-1。(2)获得稳定转染细胞系,命名为PCDK2-1-SHG44细胞。(3)通过双向电泳-图像分析-质谱技术得到细胞质未见表达的蛋白质5个,包括醛缩酶A、波形蛋白等蛋白质。结论成功建立稳定转染CDK2干扰RNA的SHG44细胞系。质谱鉴定得到的这些差异表达的蛋白质涉及细胞的增殖、细胞凋亡的信号转导调节、正常细胞的恶性转化及发育调控以及肿瘤的发生、发展和耐药性形成。
- 呼格吉乐张军力段美庆王俊瑞高乃康
- 关键词：神经胶质瘤蛋白质组学干扰RNACDK2
- 槲皮素增敏阿霉素抗白血病效应的实验研究
- 2014年
- 本研究采用槲皮素作用于P388白血病移植瘤裸鼠模型,探讨其在体内抗白血病机制及增强阿霉素化疗效果的机制。取对数生长期的P388白血病细胞注入BALB/c裸鼠皮下,建成白血病皮下移植瘤裸鼠模型;采用槲皮素、阿霉素及二者联合用药作用于白血病小鼠,观察小鼠生存期的变化;定期复查血象,计数外周血细胞数;通过流式细胞术测定细胞周期,观察槲皮素对细胞增殖的影响;通过ELISA法检测Caspase-3蛋白表达水平,并通过实时荧光定量PCR、Western-blot技术检测NF-κB、BCL-2、BAX基因及蛋白的变化。结果表明,槲皮素和阿霉素均能显著延长P388白血病移植瘤裸鼠的生存期,且两者联合作用于动物的生存期较单一药物组的延长更明显;槲皮素和阿霉素单独及联合应用均可使白血病小鼠瘤组织G0/G1期细胞比例减少,S期及G2/M细胞比例增加,且槲皮素、阿霉素联合用药组作用更显著;槲皮素可激活Caspase-3酶,诱导白血病小鼠白血病细胞的凋亡;同时,槲皮素可以下调抗凋亡基因BCL-2及NF-κB的表达并上调促凋亡基因BAX的表达。结论:槲皮素可在体内通过调控凋亡相关基因的表达来抑制白血病细胞增殖,促进癌细胞凋亡,并可增敏蒽环类药物阿霉素的化疗效果,具有进一步研发为高效抗白血病药物的潜能。
- 韩艳秋红宇苏秀兰王俊瑞
- 关键词：槲皮素白血病阿霉素细胞凋亡
- 以血培养为基础的布鲁菌快速鉴定方法研究被引量：10
- 2017年
- 目的 探讨快速、简便的以血培养为基础的布鲁菌鉴定方法，为布鲁菌病的及时诊治提供依据。方法 应用培养仪进行血培养，通过观察阳性报警瓶生长曲线特征，对可疑布鲁菌生长的培养物通过革兰染色和生化反应进行快速鉴定。验证采用传统的阳性血清、单相特异性血清（A、M和R）凝集试验，布鲁菌噬菌体裂解试验（Tb、BK2）对布鲁菌可疑菌株进行种／型鉴定。对鉴定为布鲁菌的菌株采用PCR方法［布鲁菌表面蛋白-31（BCSP31）-PCR和牛种、羊种、绵羊附睾和猪种布鲁菌（AMOS）-PCR］鉴定分型。结果 61份培养物细菌生长曲线特征：迟缓期曲线较平坦，生长期曲线短，稳定期曲线平坦；在血培养仪上，72 h左右出现阳性报警。64株（其中3人培养2次）菌株尿素水解试验、革兰染色、柯氏染色鉴定为布鲁菌。选取27株菌株经细菌学鉴定为羊种布鲁菌，其中，21株为羊种Ⅲ型，6株为羊种Ⅰ型；经BCSP31-PCR鉴定均为布鲁菌，经AMOS-PCR方法鉴定均为羊种布鲁菌。结论 布鲁菌的快速鉴定可以缩短培养和鉴定时间，通过经典细菌学和PCR方法验证，此方法鉴定布鲁菌结果快速、可靠。
- 郭素芳王俊瑞范文兵王艳艳崔步云韩艳秋
- 关键词：布鲁菌生物学鉴定细菌分型技术
- 呼和浩特地区腹泻患者艰难梭菌检测方法比较、临床分离株的毒素特征及药物敏感性分析被引量：4
- 2020年
- 目的了解呼和浩特地区艰难梭菌腹泻患者临床分离株的毒素特征及艰难梭菌药物敏感性,为艰难梭菌治疗和防控提供参考数据。方法收集2018年7月至2019年6月间本院疑似艰难梭菌感染的252例腹泻患者的粪便标本。同一样本分别检测:粪便艰难梭菌培养和鉴定、VIDAS酶联荧光法粪便直接检测艰难梭菌毒素A/B(CDAB)和艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(GDH)。培养获得的艰难梭菌进行PCR扩增毒素基因和二元毒素基因(tcdA、tcdB、cdtA、cdtB),以明确是否为产毒菌株;琼脂稀释法测定艰难梭菌对抗菌药物的敏感性。结果艰难梭菌毒素A/B(CDAB)阳性7例,灰区5例;谷氨酸脱氢酶(GDH)阳性39例;培养出艰难梭菌37株;PCR扩增毒素基因检测30株为产毒株,毒素基因tcdA(-)/tcdB(+)型3株,tcdA(+)/tcdB(+)型27株,二元毒素基因检测均为阴性;克林霉素、头孢西丁耐药率较高,分别为100%和97.3%,莫西沙星耐药率54.1%。万古霉素、甲硝唑无耐药株检出。结论 GDH法具有较好的灵敏性,可作为艰难梭菌感染的筛查;CDAB检测特异性较高,但敏感性较低;毒素基因检测有较高的敏感性和特异性,tcdA(+)/tcdB(+)型艰难梭菌为我院主要流行株;96.7%的临床感染患者为I级;克林霉素、莫西沙星耐药率较高,需限制使用;全部菌株对甲硝唑、万古霉素敏感,可以经验用药。
- 郭素芳王俊瑞王艳艳申慧敏吕莹莹韩艳秋
- 关键词：艰难梭菌药敏试验
- 一种医学微生物培养瓶
- 本实用新型属于微生物培养技术领域，尤其为一种医学微生物培养瓶，包括瓶筒，瓶筒的内壁四周固定有密封垫，瓶筒的内部从下至上依次设置有一号培养皿、二号培养皿和三号培养皿，一号培养皿、二号培养皿和三号培养皿的上端外部四周均固定有...
- 郑文琪王俊瑞韩艳秋王晓磊李春阳冯学敏
- 文献传递
- 亚抑菌浓度亚胺培南对MRSA体外增殖及毒力相关基因mRNA表达水平的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨亚抑菌浓度亚胺培南对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物学活性的影响,阐明碳青霉烯类抗生素对MRSA活性的抑制作用及其机制,为临床应用碳青霉烯类抗生素治疗MRSA感染提供依据。方法:选取5株ST239型MRSA临床分离株,采用1/10和1/2最小抑菌浓度(MIC)亚胺培南与其体外共培养1.5、6.0和12.0h,分为对照组(培养液中不加亚胺培南)、1/10MIC组(培养液中添加1/10MIC浓度亚胺培南)和1/2MIC组(培养液中添加1/2MIC浓度亚胺培南)。采用荧光定量PCR方法检测各组MRSA株毒力相关基因纤维黏连蛋白A(fnbA)、葡萄球菌蛋白A(spa)、α溶血素(hla)、白细胞毒素D(lek-D)和E(lek-E)、肠毒素A(sea)mRNA相对表达水平,分光光度法检测各组MRSA株体外增殖活性。结果:与对照组比较,体外共培养6.0和12.0h时,1/2MIC组MRSA株增殖活性明显降低(P<0.01);培养1.5和6.0h时,6个MRSA毒力相关基因mRNA相对表达水平均明显低于对照组(P<0.01);培养12h时,1/10MIC和1/2MIC浓度组MRSA株各毒力相关基因mRNA表达未能检测到。结论:亚抑菌浓度亚胺培南对ST239型MRSA多种毒力相关基因mRNA表达具有明显抑制效应,高浓度亚胺培南可抑制MRSA的体外增殖,提示亚胺培南对于重症MRSA感染患者具有潜在的应用价值。
- 王俊瑞段美庆额尔德木图孙鹏魏常梅韩艳秋
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌毒力亚胺培南
- 内蒙古地区皮肤化脓性感染部位分离的金黄色葡萄球菌耐药及毒力特征研究被引量：1
- 2022年
- 目的分析皮肤化脓性感染部位分离的金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)耐药、毒力及分子流行病学特征,为临床抗感染用药提供实验依据。方法收集内蒙古医科大学附属医院2020年5-12月皮肤科住院患者皮肤化脓性感染部位及鼻腔分泌物样本进行细菌分离培养。采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定疑似金葡菌菌落,用微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验,PCR扩增金葡菌毒力基因,实时荧光定量PCR检测tsst-1、pvl、hla、clfA 4种毒力基因在不同来源金葡菌菌株中的相对表达量。对金葡菌菌株进行多位点序列分型(MLST)。耐药率及毒力基因检出率比较采用χ2检验或Fisher确切概率法,计量资料组间比较采用t检验或曼-惠特尼U非参数检验。结果在210例住院患者中,共分离金葡菌85株,包括皮肤化脓性感染部位54株(病例组),鼻腔部位31株(对照组)。药敏试验结果显示,85株金葡菌中14株为耐甲氧西林金葡菌(MRSA)。85株菌对青霉素耐药率[90.59%(77/85)]最高;对克林霉素和红霉素耐药率分别为60.00%(51/85)、61.18%(52/85),未发现对利福平、万古霉素和利奈唑胺耐药菌株。PCR显示,病例组菌株pvl基因检出率(33.33%,18/54)高于对照组(12.90%,4/31,χ2=4.28,P=0.038)。实时荧光定量PCR显示,对照组菌株clfA相对表达量[3.87(2.30,5.94)]高于病例组[1.63(0.95,2.62),P=0.007]。85株金葡菌分型共得到17个ST型别,其中主要优势型别为ST398-甲氧西林敏感金葡菌(20/71)和ST22-MRSA(9/14)。ST22-MRSA菌株毒力基因pvl检出率(14/14)明显高于非ST22型MRSA(0,P<0.001)。结论皮肤化脓性感染部位分离的金葡菌对青霉素、克林霉素和红霉素耐药率较高,这些抗生素不应作为临床经验治疗的首选药;皮肤金葡菌感染性疾病发病可能与毒力基因pvl有关;金葡菌鼻腔定植可能与clfA基因有关。
- 孙建林张阳张宇鹏吕新翔王俊瑞
- 关键词：金黄色葡萄球菌化脓微生物敏感性试验耐药
- 免疫抑制大鼠MRSA定植模型构建
- 目的:建立免疫抑制大鼠鼻粘膜耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)定植模型,为进一步研究宿主免疫抑制状态对MRSA毒力、耐药性的影响及其机制提供基础。方法:采用环酰胺肌肉注射方法建立免疫抑制大鼠模型,进一步经鼻粘膜注射MR...
- 王俊瑞杨丽敏崔晶花张军力
- 文献传递
- 鲍曼不动杆菌外膜蛋白A的克隆表达及纯化被引量：1
- 2015年
- 目的:通过分子克隆方法制备鲍曼不动杆菌外膜蛋白A(OmpA)纯化蛋白,为进一步研究鲍曼不动杆菌OmpA蛋白的生物学活性提供基础.方法:首先采用PCR方法扩增鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC19606株外膜蛋白A编码基因(OmpA),构建其原核表达载体pET30a/ompA,所得产物经PCR方法和测序进行鉴定.之后筛选阳性表达载体,将其转化至大肠杆菌表达宿主菌BL21,最后将表达的蛋白质进行纯化.结果:重组表达载体pET30a/ompA构建成功,并经PCR方法和测序方法进行鉴定;重组蛋白在所构建的原核表达系统中实现了高表达,纯化后得到了高纯度的OmpA蛋白.结论:本次试验通过分子克隆技术,使鲍曼不动杆菌OmpA蛋白在构建的原核表达系统中成功表达,并且获得了高纯度的目标蛋白,为进一步研究鲍曼不动杆菌外膜蛋白A的生物学活性及抗体的保护作用奠定了基础.
- 魏常梅王俊瑞孙鹏张军力
- 关键词：鲍曼不动杆菌外膜蛋白A
- 铜绿假单胞菌耐药基因及毒力因子分布特征分析被引量：1
- 2015年
- 目的:了解我院铜绿假单胞菌毒力因子及耐药基因分布情况,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法:采用ROCHE COBAS E601电化学发光分析仪检测疑似细菌性感染病人降钙素原(PCT)水平,PCT显著升高病人且微生物送检标本单纯检出的12株铜绿假单胞菌为研究对象;采用PCR方法对毒力因子(tox A、exo U、exo S、exo T、Pvoein protein、nor A、las B)及耐药基因(TEM、SHV、PER、VEB1、OXA-10、Amp C、0pr D、KPC)表达情况进行分析;结果:12株铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药率为91.7%(11/12),毒力因子阳性率最高者为Tox A和exo T(91.7%),耐药基因阳性率最高者为Amp C和Opr D(91.7%)。结论:铜绿假单胞菌毒力因子Tox A、exo T及耐药基因Amp C和Opr D携带率较高,不同菌株间耐药特征差异明显,在疑似铜绿假单胞菌感染病人时应依据抗菌药物敏感试验结果针对性选择抗生素,特别对于无菌部分分离的铜绿假单胞菌。
- 张建忠赵子玲王俊瑞
- 关键词：铜绿假单胞菌毒力因子耐药基因
