王传彬
- 作品数：180 被引量：639H指数：12
- 供职机构：中国动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>
- 中国不同地区商品猪中戊型肝炎病毒感染情况调查被引量：72
- 2003年
- 葛胜祥田克恭多海刚李纯玲陈凡王传彬彭耿夏宁邵
- 关键词：商品猪戊型肝炎病毒感染流行病学
- PRRSV GP5和M抗原中和表位的融合表达与纯化以及间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2022年
- 为建立检测猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的间接ELISA方法,分析了PRRSV结构蛋白GP5和M的二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,选取GP5的47~61、143~156和186~199位氨基酸,M蛋白的63~70、133~146和156~169位氨基酸作为免疫原,构建带接头序列的GP5/M中和表位融合表达质粒;通过优化大肠杆菌表达和蛋白纯化条件,免疫印迹鉴定GP5/M特异抗原,获得了可溶性的GP5/M中和表位融合蛋白。基于纯化的GP5/M中和表位融合抗原,建立了检测猪血清中PRRSV中和抗体的间接ELISA方法。采用建立的间接ELISA方法对6种其他猪源病原阳性血清进行检测,结果均无交叉反应;敏感性试验显示,将血清中和试验鉴定的PRRSV阳性对照血清稀释到1:12800时仍呈阳性;重复性试验显示,批内重复变异系数为2%~10%,批间重复变异系数小于15%;符合性试验显示,同时用建立的间接ELISA方法和血清中和试验对420份临床血清样品进行检测,结果符合率为95.24%。结果表明,该方法操作简单、耗时短,敏感性、特异性、重复性及符合性均良好,具有较好的应用推广价值。
- 李雷斌李晓霞王睿男周智刘玉良赵柏林孙航冯冰陈玲王传彬李义平孙雨
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒通用微芯片荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用被引量：2
- 2021年
- 为建立一种可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)通用的核酸检测技术,本研究根据已发表的多株PRRSV ORF6(M)基因保守序列,设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,成功建立了一种可用于PRRSV通检的微芯片荧光RT-PCR检测方法。结果显示,该方法特异性强,与多种常见的猪病病毒均无交叉反应;通检性好,可以检出包括美洲型、欧洲型、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒以及NADC30-like等多种基因型PRRSV毒株;灵敏性好,检测下限为1×10^(1)TCID_(50)/mL,与常规荧光RT-PCR方法一致;重复性好,批内和批间重复性变异系数均小于4%;且成本低,模板用量少,反应快速,全程仅需61 min;对80份临床样品的检测结果与常规荧光RT-PCR的符合率为100%。本研究建立的微芯片荧光定量RT-PCR技术为PRRSV的快速、通用型检测提供了有力的技术支撑。
- 陈玉红徐琦刘玉良王传彬周智张硕倪建强刘洋
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量RT-PCR微芯片
- 口蹄疫病毒非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3基因的克隆、表达及VPg1-2抗体持续时间的研究被引量：1
- 2007年
- 目的表达口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3,用于FMDV感染与灭活疫苗动物鉴别诊断和其蛋白功能研究。方法对O型口蹄疫病毒太保毒株3ABC基因片段中的VPg1-2(3B1-2)、VPg2-3(3B2-3)、VPg3(3B3)基因进行扩增和亚克隆,并将它们分别插入pGEX-4T-1表达载体构建了重组表达质粒,经IPTG诱导后,进行Western blotting分析。以纯化的VPg1-2表达蛋白为抗原建立间接ELISA,对背景清楚的实验牛血清进行检测。结果表达的VPg1-2、VPg2-3蛋白可与FMDV阳性血清发生特异性反应,表达的VPg3蛋白没有反应。VPg1-2表达蛋白与对照组(C组)和灭活疫苗反复免疫组(CI组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)血清均发生反应,与部分免疫后攻毒组(I组)(4/7)血清发生反应,与部分I组(3/7)血清不发生反应;D组和I组VPg1-2表达蛋白抗体持续时间最长可达90 d以上,最早检出相应抗体的时间为攻毒后第10天。结论表达的VPg1-2抗原用于健康牛群、免疫后未感染牛群以及未免疫感染牛群的鉴别诊断的特异性、敏感性达到100%,对免疫后感染牛群进行检测时可能有一定的漏检现象。
- 孙明王宏伟田克恭王传彬陈西钊遇秀玲金萍曹振许燕辉赵心力
- 关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白抗体消长
- O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法的建立被引量：4
- 2020年
- 为建立动物血清中O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的O型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体,制备了O型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。结果表明:该方法能够定量检测猪、牛、羊血清中的O型口蹄疫病毒VP1蛋白抗体,与其他偶蹄类动物病原无交叉反应,具有良好的重复性;对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,同国产O型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率92.62%,阴性样品符合率92.14%,总符合率92.45%;重复性试验组内与组间变异系数分别低于10%和15%。综上,该研究建立的O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。
- 孙雨宋晓晖肖颖王睿男李秀梅任雪建李雪刚魏巍杨林王传彬
- 关键词：O型口蹄疫病毒化学发光免疫分析
- 犬细小病毒VP2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：5
- 2007年
- 目的表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究。方法采用PCR方法对CPV VP2基因进行扩增,将CPV VP2基因克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPICZαA中,构建真核重组表达载体pPICZαA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下表达CPV VP2,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白。结果成功扩增了CPV VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZαA-VP2在毕赤酵母菌中表达出约64.35 kD蛋白。Western blotting鉴定表明,表达VP2蛋白与犬细小病毒阳性血清有反应性。结论在毕赤酵母中成功地表达了CPV VP2蛋白,能被犬细小病毒阳性血清识别。
- 张云霞丁银巧赵铁柱杨璐孙明曹振王传彬陈西钊田克恭
- 关键词：毕赤酵母真核表达
- PRRSV经典株与高致病性变异株双重实时荧光RT－PCR鉴别检测方法
- 本发明公开了一种鉴别检测PRRSV经典株与高致病性变异株的双重实时荧光RT－PCR方法，以及用于该方法的针对PRRSV经典株与高致病性变异株的RT－PCR扩增引物和探针。本发明的方法与现有技术相比，具有快速简便、特异性强...
- 田克恭陈南华陈西钊遇秀玲王传彬曹振
- 文献传递
- 日本乙型脑炎病毒反转录聚合酶链反应试验方法
- 本标准规定了日本乙型脑炎病毒反转录聚合酶链反应试验的技术要求。本标准适用于动物脑组织中日本乙型脑炎病毒核酸的检测。
- 王宏伟孙明王传彬陈西钊田克恭
- 关键词：畜牧业家畜疾病检疫
- 文献传递
- 不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长规律的比较研究被引量：11
- 2018年
- 为比较不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长的规律,以便为种鸡场净化提供科学指导,本研究以鸡白痢沙门氏菌活菌和灭活免疫原分别接种SPF鸡,采用平板凝集、微量凝集和ELISA试验定期检测血清中的特异性抗体,并以Kappa检验判定不同检测方法之间的一致性程度。结果显示,平板凝集试验在接种后检出抗体阳转的时间早于ELISA,但ELISA检出抗体阳性的持续时间更长,且更符合抗体消长规律;3种检测方法的结果之间仅具有微弱一致性(Kappa系数为0.002~0.295)。本研究结果表明,不同鸡白痢沙门氏菌抗体检测方法之间存在较大差异,但从总体来看,ELISA无假阳性干扰,检出抗体的持续时间较长,更符合抗体消长规律,在单一鸡白痢沙门氏菌感染的情况下,更有利于种鸡场对该病进行净化。
- 刘洋李丹王传彬霍斯琪刘玉良顾小雪
- 关键词：鸡白痢沙门氏菌抗体平板凝集试验ELISA
- 一种O型口蹄疫病毒人工重组抗原及其制备与应用
- 本发明公开一种O型口蹄疫病毒人工重组抗原及其制备与应用，属于生物制剂领域。所述人工重组抗原的氨基酸序列包含如Seq ID No.4所示的肽段。所述人工重组抗原的氨基酸序列具体如Seq ID No.5所示。本发明还请求保护...
- 孙明田克恭王宏伟王传彬遇秀玲陈西钊曹振刘巧荣
- 文献传递
