王丹妮
- 作品数：10 被引量：20H指数：3
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：北京市教委科技发展计划国家重点基础研究发展计划北京市优秀人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 羊膜上皮细胞条件培养液对大鼠骨髓基质细胞神经分化的影响
- 骨髓基质细胞 (bone marrow stromal cells,BMSCs)体外诱导分化为神经细胞的研究,不仅具有重要的理论意义,而且具有广阔的应用前景,是目前生命科学领域的一大研究热点。本研究的目的在于探讨羊膜上皮...
- 王丹妮季凤清孙海梅李荣平赵春礼杨慧
- 文献传递
- 人脐血间充质干细胞与大鼠骨髓间充质干细胞神经分化的实验研究
- 目的:干细胞是具有自我复制和多向分化潜能的细胞，是形成生命机体各种组织器官的起源细胞。研究发现脐带血(human umbilical cord blood，HUCB)和骨髓(bonemarrow)中都含有间充质干细胞(m...
- 王丹妮
- 关键词：间充质干细胞细胞生长神经分化潜能
- 文献传递
- 不同诱导因子对人脐带血非造血干细胞神经分化的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨诱导人脐带血非造血干细胞向神经细胞分化的最佳条件。方法通过密度梯度离心法原代培养脐带血非造血干细胞;用流式细胞术分析脐带血获得的贴壁细胞的CD34、CD90、CDl66、HLA-ABC、HLA-DR等免疫表型;并用不同诱导因子组合:1.维甲酸(RA);2.表皮生长因子(EGF)+碱性成纤维细胞生长因子(bFGF);3RA+EGF+bFGF;4二甲基亚砜(DMSO)+丁羟基茴香醚(BHA)诱导后,用免疫荧光化学法检测各组脐带血非造血干细胞中β-微管蛋白-Ⅲ(β-tubulin-Ⅲ)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖苷酶-C(Gal-C)等神经细胞、星型胶质细胞及少突胶质细胞的特异性标记抗原的表达。结果脐带血非造血干细胞CD90、CD166、HLA-ABC表达阳性;无论那一种诱导因子组合,分化为少突胶质细胞的比率均高于神经元及星型胶质细胞;即各组分化为少突胶质细胞数>神经元的细胞数>星型胶质细胞数。对于少突胶质细胞(Ga-C)以RA+EGF+bFGF组合诱导率最高,达57.02%,其次是DMSO+BHA诱导组。而对于神经元及星型胶质细胞的分化各组比较,以RA组最高,其次是DMSO+BHA诱导组合。结论RA对神经元及星型胶质细胞的诱导作用较好,而RA+EGF+bFGF组合对于少突胶质细胞诱导作用最明显。
- 季凤清王屹孙海梅李荣平王丹妮曾晓蓓赵春礼王秀琴杨慧
- 关键词：神经细胞胶质细胞人脐带血
- 羊膜对人脐血干细胞分化为多巴胺能神经元的作用被引量：7
- 2008年
- 目的探讨羊膜上皮细胞对人脐血干细胞定向分化为多巴胺能神经元的作用。方法体外分离、原代培养人羊膜上皮细胞,通过高速离心制备成条件培养液(CM)对P1代脐血干细胞进行诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,应用免疫荧光染色和免疫印迹法检测其酪氨酸羟化酶(TH)及多巴胺转运体(DAT)蛋白的表达情况。结果P1代脐血干细胞经羊膜上皮细胞条件培养液诱导后,TH及DAT阳性细胞率明显高于对照组,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),免疫印迹分析结果与免疫荧光染色结果一致。结论羊膜上皮细胞能诱导人脐血间充质干细胞定向分化为多巴胺能神经元。
- 李荣平季凤清孙海梅王丹妮曾小蓓赵春礼杨慧
- 关键词：干细胞诱导分化多巴胺能神经元羊膜上皮细胞人脐带血
- 羧基荧光素乙酰乙酸与四甲基偶氮唑盐法检测人脐血间充质干细胞刺激脾淋巴细胞增殖作用的比较
- 2009年
- 目的比较羧基荧光素乙酰乙酸（CFSE）与四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测人脐血间充质干细胞（CB-MSCs）和神经分化的CB-MSCs对大鼠脾淋巴细胞（LCs）刺激作用的敏感程度。方法分别制备刺激细胞和LCs,将刺激细胞分为4组：1.CB-MSCs组;2.Dif-CB-HSCs组：脐血间充质干细胞培养7d后维甲酸（RA）处理4d诱导其神经分化细胞;3.SH-SY5Y组：人源SH-SY5Y细胞（人神经母细胞瘤细胞系）作为阳性对照组;4.Auto-LC组：自体大鼠LCs作为阴性对照组。分别将上述各组刺激细胞与LCs进行混合培养,分别通过酶标仪（MTT法）,流式细胞术（CFSE法）检测LCs增殖情况（n=3）。结果CFSE法和MTT法检测结果均显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组刺激LCs增殖明显弱于阳性对照组（SH-SY5Y细胞组）,但CFSE法检测结果显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组细胞刺激LCs增殖百分率高于阴性对照Auto-LC组,MTT法检测结果显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组的吸光度（A）值稍低于阴性对照Auto-LC组。结论CFSE法比MTT法能更加客观地...
- 孙海梅季凤清王屹王丹妮赵春礼杨慧
- 关键词：脐血间充质干细胞淋巴细胞增殖
- 羊膜上皮细胞条件培养液对大鼠骨髓基质细胞神经分化的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨羊膜上皮细胞条件培养液对大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的作用。方法体外分离、培养羊膜上皮细胞及大鼠骨髓基质干细胞,流式细胞术检测其表面抗原,免疫组织化学染色技术检测巢蛋白(Nestin)以及增殖细胞相关核抗原(ki67)在细胞中的表达。采用羊膜上皮细胞条件培养液对其进行诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,免疫荧光染色技术检测神经特异烯醇化酶(NSE)以及多巴胺能神经元标志物酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)在诱导后细胞中的表达,并进行定量比较分析。结果羊膜上皮细胞条件培养液能够诱导大鼠骨髓基质细胞向神经细胞方向分化。结论羊膜上皮细胞条件培养液可以诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经元样细胞和多巴胺能神经元样细胞。
- 王丹妮孙海梅李荣平杜娟赵春礼郑德宇季凤清杨慧
- 关键词：骨髓基质细胞羊膜上皮细胞分化多巴胺能神经元
- 优化脐血间充质干细胞的新方法
- 目前在脐带血间充质干细胞分离纯化过程中,往往出现纯度不高,有大量混杂的细胞。人羊膜组织是胚胎发育的早期产物,由于人羊膜具有无毒、无菌、无刺激性、抗微生物、不表达人HLA-ABC和HLA-DR抗原、易于获得和处理等特性,近...
- 孙海梅季凤清王丹妮曾晓蓓杨慧
- 人脐血非造血干细胞免疫原性的实验研究被引量：7
- 2008年
- 目的探讨人脐血非造血干细胞免疫原性,为脐血非造血干细胞的应用提供依据。方法通过流式细胞术检测人脐血非造血干细胞的免疫表型;体外混合淋巴细胞培养观察人脐血非造血干细胞原代、P1代、诱导分化细胞及干扰素-γ(IFN-γ)刺激异种T淋巴细胞增殖活化作用。结果人脐血非造血干细胞表达HLA-ABC,微弱表达HLA-DR,经IFN-γ处理后,未明显改变HLA-ABC、HLA-DR的表达水平。混合淋巴细胞培养未见各处理组人脐血非造血干细胞明显刺激T淋巴细胞的增殖。结论人脐血非造血干细胞无论原代、传代细胞、分化细胞及IFN-γ处理的细胞免疫原性均较弱。
- 季凤清王屹孙海梅王丹妮曾晓蓓赵春礼杨慧
- 关键词：人脐带血免疫原性脾淋巴细胞共培养
- 优化脐血间充质干细胞的新方法
- 2008年
- 目前在脐带血间充质干细胞分离纯化过程中，往往出现纯度不高，有大量混杂的细胞。人羊膜组织是胚胎发育的早期产物，由于人羊膜具有无毒、无菌、无刺激性、抗微生物、不表达人HLA—ABC和HLA—DR抗原、易于获得和处理等特性，近十几年来羊膜在组织工程和移植治疗的临床应用较为广泛。
- 孙海梅季凤清王丹妮曾晓蓓杨慧
- 关键词：间充质干细胞脐血纯化过程细胞分离无刺激性抗微生物
- 胆脂瘤型中耳炎合并胆固醇肉芽肿临床研究
- 目的 探讨胆脂瘤型中耳炎合并胆固醇肉芽肿的病因,二者的相互关系以及相应的治疗措施.方法 分析总结北京同仁医院2001年1月-2002年2月收治的经术中所见及术后病理证实为慢性化脓性中耳炎(胆脂瘤型)合并胆固醇肉芽肿的12...
- 王丹妮
- 关键词：中耳胆脂瘤胆固醇肉芽肿听力重建外科手术
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