牛洪琳
- 作品数：18 被引量：58H指数：5
- 供职机构：河北医科大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省卫生厅医学科学研究重点课题河北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 基质金属蛋白酶12表达对糖尿病肾病及高脂肾损伤的肾保护作用及其机制的研究
- 随着世界经济的飞速发展和人们生活水平的普遍升高，饮食结构中高糖、高脂成分所占比率逐年提高，致使人类糖尿病及高脂血症的发病率逐年增加。我国作为世界上最大的糖尿病流行地，超过1.3亿的糖尿病患者给社会和家庭带来沉重的负担，糖...
- 牛洪琳
- 关键词：基质金属蛋白酶12糖尿病肾病肾脏纤维化
- 贝那普利对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞整合素连接激酶及α平滑肌肌动蛋白表达的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察贝那普利对高糖培养下肾小球系膜细胞（GMC）中整合素连接激酶（ILK）及α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响，探讨贝那普利肾脏保护作用的调节机制。方法将GMC常规培养分为4组：正常糖对照组（D-葡萄糖5．5mmol／L，NG组）、甘露醇组（甘露醇20mmo／／L，MG组）、高糖组（D-葡萄糖30mmol／L，HG组）、高糖＋贝那普利干预组（D-葡萄糖30mmol／L＋贝那普利10μmol／L，ACEI组）。于实验开始后3h、6h、12h、24h、48h、72h分别收获4组细胞，应用RT—PCR法、Western印迹法和细胞免疫荧光法检测各组GMC中ILK、α-SMA的表达。结果高糖环境下GMC中ILK、α-SMAmRNA和蛋白表达水平较正常对照组显著升高（均P〈0．05），ILK在48h达到最高（P〈0．05），α-SMA在72h达到最高（P〈0．01）。贝那普利干预后上述指标较高糖组表达水平下降，但未能恢复至正常糖对照组水平。同时间点甘露醇组ILKmRNA和蛋白水平与正常糖组差异无统计学意义（P〉0．05）；同时间点甘露醇组α-SMAmRNA和蛋白水平显著高于正常糖对照组（均P〈0．05）。结论贝那普利可能通过降低ILK和α-SMA的异常表达来延缓糖尿病肾病的肾脏纤维化进程和高糖介导的系膜细胞表型转化。系膜细胞在糖尿病。肾病中的表型转化可能同时存在渗透浓度依赖性。
- 牛洪琳李英刘茂东迟雁青张涛王秀芬
- 关键词：系膜细胞整合素连接激酶贝那普利
- 3种细胞裂解液提取总蛋白在Western blot中的效果分析被引量：8
- 2019年
- 目的寻找一种适用于培养血管平滑肌细胞总蛋白提取的细胞裂解液配方,以更好地应用于Westernblot分析。方法采用3种常用的细胞裂解液(Ⅰ液,Ⅱ液和Ⅲ液),提取总蛋白后Bradford法测定蛋白含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离提取的蛋白,Western blot检测PDGFR-β、Akt、GAPDH和SM22α等不同分子量的蛋白表达情况。结果 3种细胞裂解液得到的蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05)。小分子量蛋白(<50 000),细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05);中等分子量蛋白(50 000～80 000),细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ,细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅱ(P<0.05);高分子量蛋白(>80 000),细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05)。Western blot结果显示:PDGFR-β,细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05);Akt,细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ,细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅱ(P<0.05);GAPDH,细胞裂解液Ⅱ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ和细胞裂解液Ⅲ(P<0.05);SM22α,细胞裂解液Ⅱ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ和细胞裂解液Ⅲ(P<0.05)。结论确定了一种裂解效果更好、能满足对不同分子量蛋白进行Western blot检测的裂解液配方,为以Western blot为主的蛋白检测相关研究提供了一定的参考。
- 庞雅湘聂启昊刘晓宁王帅冯琦牛洪琳
- 关键词：细胞培养技术
- Megsin对高糖环境中肾小球系膜细胞p38MAPK通路、ICAM-1及MCP-1表达的影响
- 李英王明铭张丽红牛洪琳丁芳张艳玲李荣芬
- 血液透析患者胸廓出口综合征一例
- 高健王保兴迟雁青牛洪琳康英丽韩宁郭帅李英
- 红景天苷对高糖环境中小鼠足细胞凋亡及氧化应激的影响
- 目的 应用高糖培养的永生化小鼠足细胞,以红景天苷为干预药物,采用分子生物学技术和免疫荧光技术检测高糖环境足细胞活性氧(ROS)水平和细胞凋亡情况,探讨红景天苷在改善足细胞凋亡、抑制氧化应激的作用机制.方法 将条件永生化小...
- 鲁华李英张涛刘茂东迟雁青王保兴王月华牛洪琳
- 尿毒症腹膜透析患者并发胰腺癌一例报道
- 王秀芬张涛牛洪琳李英张俊霞张一冉蕾
- 高浓度尿酸对人近端肾小管上皮细胞氧化应激的影响被引量：8
- 2014年
- 目的观察高浓度尿酸对人近端肾小管上皮细胞氧化应激的影响,探讨其可能的作用途径。方法体外培养人近端肾小管上皮HK-2细胞,以720μmol/L的尿酸干预0、12、24、48 h后收集细胞;DCHF-DA染色检测细胞内活性氧(ROS)含量,分光光度计检测细胞上清液中的丙二醛(MDA)、总超氧化物岐化酶(T-SOD),MitoSOXTM染色观察活细胞线粒体中ROS的生成情况。结果尿酸干预12 h时细胞内总ROS含量较未干预时无明显变化,细胞上清中MDA含量、T-SOD活性亦较未干预时无明显差异(P均>0.05);干预24 h时总ROS含量有所升高,MDA含量上升,T-SOD活性降低,48 h时上述变化更为明显(P均<0.05);线粒体内ROS也在尿酸干预24 h时合成上调,48 h时升高更为显著(P<0.05)。结论高浓度尿酸可诱导HK-2细胞氧化应激反应,线粒体ROS合成增多可能是其作用基础。
- 张涛牛洪琳康英丽李英
- 关键词：代谢性疾病肾小管上皮细胞尿酸活性氧氧化应激
- 尿酸对人肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤与凋亡的影响被引量：6
- 2014年
- 目的观察尿酸对人肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤及相关凋亡途径的影响，探讨其可能作用机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞（HK-2），分别加入不同浓度的尿酸（480μmol/L、720μmol/L）进行干预，于0h、24h、48h收集细胞；应用MitoSOX染色检测活细胞线粒体中ROS的产生；JC-1染色检测线粒体膜电位的变化；Western印迹和免疫荧光化学法对凋亡诱导因子（AIF）和抗增殖因子（prohibitin）蛋白表达进行细胞亚定位及半定量分析；AnnexinV-FITC及PI双染法检测细胞凋亡。结果480μmol/L尿酸刺激细胞24h，线粒体ROS产量较正常对照组升高（P＜0．05），且随尿酸刺激浓度升高和时间延长逐渐上调，线粒体膜电位则逐渐降低。480μmol/L尿酸刺激细胞24h，细胞凋亡率和AIF蛋白表达均较正常对照组无明显变化（P，0．05），而刺激48h时两者升高且其差异有统计学意义（Pc0．05）；720μmol/L尿酸干预24h时，AIF蛋白表达和细胞凋亡率已较正常对照组升高（Pc0．05），干预48h时升高更为显著。480μmol/L尿酸刺激细胞24h，prohibitin蛋白表达较正常对照组下降（P〈0．05），720μmol/L尿酸干预48h，降低最为明显。结论尿酸可诱导HK-2细胞线粒体ROS合成增多，膜电位下降，线粒体相关蛋白prohibitin表达下调，激活线粒体途径导致细胞凋亡。
- 张涛李英迟雁青任韫卓刘茂东牛洪琳
- 关键词：尿酸细胞凋亡线粒体肾小管上皮细胞
- aCL和PAPP-A联合检测预测维持性血液透析患者发生心脑血管事件及死亡的价值被引量：1
- 2015年
- 目的探讨抗心磷脂抗体(a CL)和妊娠相关性血浆蛋白-A(PAPP-A)联合检测预测维持性血液透析(MHD)患者心脑血管事件及死亡的价值。方法检测126例行MHD患者的a CL和PAPP-A,记录随访期间患者心脑血管事件发生及死亡情况,分析a CL和PAPP-A检测结果与心脑血管事件及死亡的关系。结果 126例MHD患者中,血清a CL阳性43例(34.12%),血清PAPP-A阳性28例(22.22%),两者均阳性16例(12.69%),两者均阴性7例,a CL阳性PAPP-A阴性27例,a CL阴性PAPP-A阳性12例。随访(21.08±15.67)个月,随访期间发生心脑血管事件52例(41.26%),死亡23例(18.25%)。血清a CL阳性者和PAPP-A阳性者心脑血管事件发生率和病死率均高于a CL阴性者和PAPP-A阴性者(P均<0.05)。两者均阳性者心脑血管事件发生率和病死率显著高于两者均阴性及两者其一阳性者(P均<0.05)。生存分析显示两者单独阳性和联合阳性都对患者的生存有显著影响(P均<0.05)。结论血清a CL及PAPPA可能成为判断MHD患者发生心脑血管事件及生存预后的重要联合检测指标。
- 牛洪琳李英李海滨张涛康英丽
- 关键词：维持性血液透析抗心磷脂抗体
