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洪丽娟

作品数：9 被引量：38H指数：4
供职机构：郑州大学公共卫生学院更多>>
发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 7篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 9篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 5篇志贺菌
  • 4篇耐药
  • 3篇回文
  • 2篇脂质
  • 2篇脂质过氧化
  • 2篇细胞
  • 2篇耐药表型
  • 2篇过氧
  • 2篇过氧化
  • 2篇成簇
  • 1篇毒力
  • 1篇氧化物歧化酶
  • 1篇支气管
  • 1篇支气管上皮
  • 1篇支气管上皮细...
  • 1篇脂质过氧化作...
  • 1篇志贺菌属
  • 1篇质粒
  • 1篇人支气管上皮
  • 1篇人支气管上皮...

机构

  • 9篇郑州大学
  • 7篇新乡医学院
  • 2篇河南科技大学
  • 1篇新乡医学院第...
  • 1篇新乡医学院第...

作者

  • 9篇洪丽娟
  • 7篇段广才
  • 7篇张冰
  • 6篇梁文娟
  • 5篇杨海燕
  • 5篇郗园林
  • 3篇王鹏飞
  • 2篇王颖芳
  • 2篇燕贞
  • 2篇张荣光
  • 2篇杨维超
  • 2篇陈帅印
  • 2篇姚武
  • 2篇李娟
  • 1篇赵永新
  • 1篇郭向娇
  • 1篇王琳琳
  • 1篇吴卫东
  • 1篇刘文佳
  • 1篇娄婷叶

传媒

  • 2篇中华流行病学...
  • 1篇微生物学报
  • 1篇中国公共卫生
  • 1篇西安交通大学...
  • 1篇环境与职业医...
  • 1篇中国病原生物...
  • 1篇第四届全国分...

年份

  • 1篇2017
  • 5篇2016
  • 1篇2015
  • 2篇2014
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
基于CRISPR对大肠埃希菌O157∶H7的检测被引量：4
2016年
目的基于成簇的规律间隔短回文重复序列（CRISPR）,建立对大肠埃希菌O157∶H7的新型检测方法。方法应用PCR扩增实验室保存的443株肠道细菌（310株非O157∶H7大肠埃希菌、35株大肠埃希菌O157∶H7、89株志贺菌和9株沙门菌）的CRISPR1和CRISPR2,并将PCR产物测序;提取CRISPR database数据库中（标准法）100株肠道细菌（47株非O157∶H7大肠埃希菌、5株大肠埃希菌O157∶H7、9株志贺菌和39株沙门菌）的CRISPR1和CRISPR2序列。使用CRISPR Finder在线软件分析PCR产物测序序列和CRISPR database数据库的CRISPR序列。Clustal X软件进行间隔序列比对。比较标准法和PCR扩增CRISPR两种方法检测大肠埃希菌O157∶H7的一致性。结果共分析543株肠道细菌,其中75.6%的非O157∶H7大肠埃希菌、75.5%志贺菌、91.7%沙门菌和95%O157∶H7大肠埃希菌含有CRISPR1,其间隔序列数目为3～26、2～9、2～32、3。57.1%的非O157∶H7大肠埃希菌、77.6%志贺菌、85.4%沙门菌和100%O157∶H7大肠埃希菌含有CRISPR2,其间隔序列数目为1～20、1～6、2～27、1或4个。95%的O157∶H7大肠埃希菌的CRISPR1和90%CRISPR2分别含有3条独特间隔序列（S1-1,S1-2,S1-3）和1条独特间隔序列（S2-1）。间隔序列比对结果显示,S1-1＋S1-2＋S1-3和S2-1检测O157∶H7大肠埃希菌的特异性分别是100%和99.6%。标准法检测和PCR扩增CRISPR1和CRISPR2检测大肠埃希菌O157∶H7的一致性分别达99.6%和99.3%。基于CRISPR检测大肠埃希菌O157∶H7在模拟样品中的应用,结果显示在原样品大肠埃希菌O157∶H7浓度约2.3CFU/mL时,经12h增菌后即能检测出来。大肠埃希菌O157∶H7聚类分析显示,40株O157∶H7大肠埃希菌可分为3类。结论基于CRISPR的大肠埃希菌O157∶H7的检测方法,可以作为监测大肠埃希菌O157∶H7感染和高毒株大肠埃希菌O157∶H7有价值的流行病学工具。
梁文娟张荣光段广才王颖芳洪丽娟张冰王鹏飞郗园林杨海燕
关键词：聚合酶链反应
煤焦沥青烟提取物对人支气管上皮细胞的脂质过氧化作用被引量：2
2014年
[目的]研究煤焦沥青烟提取物(CTPE)刺激人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的脂质过氧化作用。[方法]用不同浓度(0、1、3μg/mL)的CTPE刺激BEAS-2B细胞4 h后,流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平。刺激BEAS-2B细胞8 h后,用丙二醛(MDA)试剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)活力测定试剂盒分别检测细胞裂解液中的MDA含量和SOD活力。[结果]与对照组相比,CTPE(1、3μg/mL)作用细胞4 h后,ROS含量均显著升高(P<0.05)。1、3μg/mL CTPE刺激细胞8 h后,MDA含量均升高,SOD活力均明显降低(P<0.05);MDA/SOD值升高(P<0.05)。[结论]煤焦沥青烟提取物刺激BEAS-2B细胞后ROS水平和MDA含量增高,SOD活力降低,发生了脂质过氧化作用。
洪丽娟李娟杨维超刘文佳姚武燕贞
关键词：脂质过氧化活性氧丙二醛人支气管上皮细胞
PM_(2.5)对BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤作用被引量：13
2014年
目的用大气细颗粒物(PM2.5)刺激人支气管上皮细胞(BEAS-2B细胞),探讨其脂质过氧化作用。方法 PM2.5采自河南省郑州市;实验细胞为人支气管上皮细胞。用0、12.5、25μg/mL的PM2.5刺激BEAS-2B细胞4h后,使用流式细胞仪检测其活性氧(ROS)水平;刺激BEAS-2B细胞8h,用丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶活性测定试剂盒分别检测细胞裂解液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 PM2.5作用于BEAS-2B细胞4h,12.5、25μg/mL染毒组ROS水平分别为(6 074.69±41.65)、(7 338.58±168.34),均明显高于对照组的(5 816.66±114.69)(P<0.01);刺激BEAS-2B细胞8h,12.5、25μg/mL染毒组MDA含量分别为(195.44±35.58)、(334.11±26.75)μmol/mg,均明显高于对照组的(71.14±4.21)μmol/mg(P<0.01),同时染毒组SOD活力分别为(100.08±7.54)、(80.03±7.61)U/mg,均低于对照组的(159.91±10.59)U/mg(P<0.01)。结论 PM2.5可以引起BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤。
李娟杨维超洪丽娟姚武吴卫东吴逸明燕贞
关键词：超氧化物歧化酶(SOD)
无抗生素压力下志贺菌耐药表型及CRISPR/Cas系统的变化
张冰洪丽娟段广才王琳琳薛泽润梁文娟杨海燕郗园林
临床分离的志贺菌对Hela细胞的致病性分析
目的 研究志贺菌中CRISPR位点的分布对细菌毒力的影响.方法 选用23株志贺菌进行PCR扩增和测序等方法检测细菌中CRISPR1位点的分布,并通过台盼蓝染色实验观察菌株对Hela细胞的侵袭能力.
洪丽娟张冰段广才梁文娟王鹏飞
CRISPR/Cas系统间隔序列同源质粒耐药信息与志贺菌耐药的关系被引量：9
2016年
目的比较志贺菌耐药信息与其spacer同源质粒或噬菌体耐药信息的关系。方法应用CRISPR Target和BLAST寻找spacer同源质粒和噬菌体,根据登记号在NCBI或GenBank中寻找目标质粒或噬菌体上的耐药信息;应用Bioedit软件寻找GenBank中志贺菌的的耐药信息。结果数据库及临床分离株志贺菌共52条spacer中有7个spacer与4个携带耐药基因的质粒同源;间隔序列CRISPR2-mel-3同源质粒pUMNF18_IncFV及携带该间隔序列的志贺菌mel-ss1998011/zz、mel-ss1998024/zz、mel-sf2005082/sx、mel-sf2013004/bj均含有相同耐药基因blaTEM、aadA2和dfrA12,间隔序列CRISPR-Q1-S1、CRISPR-Q4-S1同源的质粒pM5A24P及该间隔序列所在志贺菌sd1012均携带耐药基因ampC和tetB;间隔序列CRISPR3-mel-33同源质粒plasmid:5与该间隔序列所在志贺菌mel-sf2000102/zz均携带相同耐药基因ampH、mrdA,且二者均携带毒力相关基因yafO、yafN、virK、ldrB、ychO。该质粒上还存在I-F型CRISPR/Cas系统。结论志贺菌spacer同源质粒与该菌耐药信息分布存在相似性;CRISPR可能对志贺菌的耐药和毒力实现共调控。因此推测在最初前间隔序列整合到CRISPR基因座形成一个新的间隔序列的过程中,志贺菌可能将携带前间隔序列外源遗传物质的其他基因片段如耐药基因和毒力基因也整合到志贺菌基因组中,影响其生存及性状。
张冰王鹏飞段广才梁文娟洪丽娟王琳琳郭向娇杨海燕郗园林
关键词：志贺菌耐药
基于CRISPR／Cas的大肠埃希菌分子标志物的监测研究被引量：8
2016年
目的 探讨基于CRISPR/Cas的大肠埃希菌分子标志物的监测研究。方法 通过BLAST收集GenBank数据库中135株全基因组测序大肠埃希菌、203株鸟枪法测序大肠埃希菌的CRISPR/Cas和PCR扩增、测序获得本实验室保存361株大肠埃希菌（包括38株大肠埃希菌O157：H7）的CRISPR序列，应用CRISPR Finder在线软件分析CRISPR特征、DNAMAN软件进行间隔序列的比对，使用Clustal Ⅹ进行cas多序列比对和Mega 5.1软件构建系统进化树。结果 本研究以全新的视角对大肠埃希菌的CRISPR/Cas位置进行描述；结果显示，135株全基因组测序、203株鸟枪法测序和361株本实验室测序的大肠埃希菌中分别有77.04%、100.00%和75.62%的大肠埃希菌具有CRISPR1，分别有74.81%、100.00%和92.24%的大肠埃希菌具有CRISPR2，分别有11.85%、0和1.39%的大肠埃希菌具有CRISPR3和CRISPR4；GenBank数据库下载的全基因组测序的1株和本实验室测序的2株大肠埃希菌存在4个CRISPR位点；缺少cas的CRISPR1下游有插入序列存在。在699株大肠埃希菌中，8株O55：H7、180株O157：H7、8株O157：HNM、40株O104：H4、4株O145：H28有独特的CRISPR；间隔序列的缺失可发生在CRISPR中间；依据I-E和I-F的cas构建系统发育树，均可分为两类。结论 大肠埃希菌的CRISPR/Cas可能作为鉴定强毒株大肠埃希菌或者新型菌株的分子标志物。间隔序列的缺失或获得可能与噬菌体有关。
梁文娟张荣光段广才洪丽娟张冰郗园林杨海燕陈帅印娄婷叶赵永新
关键词：大肠埃希菌分子标志物
4株志贺菌无抗生素压力下连续传代90次的耐药表型及CRISPR／Cas系统变化被引量：2
2017年
目的 分析无抗生素压力下连续传代90次的4株志贺菌耐药表型及成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）基因变化。方法 对临床分离的4株耐药谱不同的志贺菌进行无抗生素压力连续传代90次，传代结束后用琼脂稀释法检测传代前、后志贺菌最小抑菌浓度；用PCR对CRISPR位点进行扩增并测序，CRISPR Finder和Clustal X 2.1分析CRISPR位点的变化。结果 经无抗生素压力传代90次后，4株志贺菌对某些抗生素的敏感性有不同程度的增加：mel-sf1998024/zz对氨苄西林、头孢氨苄、头孢噻肟、氯霉素的耐药性降低，mel-s2014026/sx对诺氟沙星、甲氧苄啶的耐药性降低，mel-sf2004004/sx对氨苄西林、头孢呋辛、头孢噻肟、氯霉素、甲氧苄啶的耐药性降低，mel-sf2013004/bj对氯霉素的耐药性降低；志贺菌mel-sf1998024/zz和mel-sf2013004/bj经无抗生素压力传代后，CRISPR3位点3＇的重复-间隔序列丢失，其中间隔序列匹配基因的编码产物是Cas蛋白。结论 志贺菌在无抗生素压力下，可降低或丢失对某些抗生素的耐药性。部分志贺菌CRISPR3位点的结构发生了变化，CRISPR3位点与cas基因可能存在共进化。
张冰洪丽娟段广才梁文娟杨海燕郗园林
关键词：志贺菌属抗药性连续传代
CRISPR/Cas系统与志贺菌毒力和耐药的关系及插入序列IS600对cse2表达水平的影响被引量：5
2016年
【目的】了解志贺菌中成簇的规律间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的分布及其与毒力和耐药的关系,并分析志贺菌中插入序列IS600对CRISPR相关蛋白基因cse2 m RNA表达水平的影响。【方法】利用课题组前期设计的引物PCR扩增志贺菌的3个CRISPR位点、CRISPR相关蛋白基因cse2、耐药基因和毒力基因;改良Kirby-Bauer(K-B)纸片法进行药敏试验;台盼蓝计数试验检测细菌毒力;Real-time PCR检测志贺菌中cse2基因m RNA表达水平。分别分析志贺菌中CRISPR/Cas系统与耐药基因、耐药表型、毒力基因、毒力表型的关系;了解IS600对CRISPR相关蛋白基因cse2 m RNA表达水平的影响。【结果】志贺菌中CRISPR1位点阴性细菌的毒力强;插入序列IS600使cse2 m RNA表达水平降低。【结论】志贺菌中存在CRISPR1、2、3位点;CRISPR1位点与毒力有关;插入序列IS600对cse2 m RNA表达水平有影响。
洪丽娟张冰段广才梁文娟王颖芳陈帅印杨海燕郗园林
关键词：志贺菌耐药毒力
全选 清除 导出
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