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沈春玲
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
“十一五”科技支撑计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
陆顺元
上海交通大学医学院附属瑞金医院
王津津
上海交通大学医学院医学遗传学教...
张良梁
中国科学院上海生命科学研究院健...
费俭
同济大学生命科学与技术学院
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作者
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沈春玲
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陆顺元
传媒
1篇
中华医学遗传...
年份
1篇
2010
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应用四倍体补偿技术建立血友病A小鼠模型
被引量:5
2010年
目的建立凝血因子Ⅷ(factorⅧ,FⅧ)基因剔除小鼠模型,为研究治疗血友病A提供理想的动物模型。方法应用ET克隆、胚胎干细胞同源重组和四倍体囊胚补偿技术,将小鼠F阿基因第16~19外显子靶向剔除,并应用PCR、逆转录PCR(reverse transcriptase-PCR,RT-PCR)及免疫组织化学染色技术,从DNA、RNA、蛋白水平检测FⅧ基因的转录及表达情况。通过检测激活的部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和FⅧ的促凝活性(FⅧ:C)进行FⅧ基因剔除小鼠表型鉴定。结果PCR检测在剔除小鼠中未扩增出FⅧ基因的条带;RT—PCR分析显示剔除区域该基因mRNA转录本缺失;免疫组织化学染色显示在雄性半合子(-/y)和雌性纯合子(-/-)小鼠的肝脏中凝血因子Ⅷ表达缺失;FⅧ:C和APTT检测结果显示雌性杂合子(+/-)FⅧ活性为野生型(wt)的80%,其APTT值较wt略有延长,而-/y和-/-小鼠的FⅧ的活性仅为wt小鼠的8%和10%,且APTT值均大于120s。结论FⅧ基因剔除小鼠具有与人类血友病A患者相似的表型,它的建立将促进我国血友病A治疗新技术的发展。
匡颖
王津津
卢希彬
陆顺元
张良梁
沈春玲
费俭
王铸钢
关键词:
血友病A
基因剔除
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