沈大康
- 作品数：7 被引量：46H指数：4
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用斑点金免疫渗滤法诊断日本血吸虫病被引量：9
- 1998年
- 目的：探索一种便捷的血吸虫病诊断方法。方法：在原已建立的ＥＬＩＳＡ法的基础上，应用３个针对日本血吸虫抗原的不同表位的单克隆抗体标记胶体金，建立检测日本血吸虫病患者血清中血吸虫抗原的斑点金免疫渗滤法。抗原与抗体通过渗滤在硝酸纤维薄膜上进行反应，数分钟用肉眼观察结果。结果：本法检测ＳＥＡ的敏感度为１６ｎｇ／ｍｌ，在６９例慢性日本血吸虫病患者血清的检测中，阳性率为６０．８％，特异性为９５．２％；同时用ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测１３７例慢性日本血吸虫病患者，阳性率为５４．７％、特异性为９４．６％；夹心ＥＬＩＳＡ检测１１８例慢性日本血吸虫病患者，阳性率为６１．９％、特异性为９５．７％。结论：经数理统计Ｇ检验证实斑点金免疫渗滤法的敏感性和特异性同ＥＬＩＳＡ相近，且操作更简便且快速。
- 张恩英吴琛耘沈大康
- 关键词：DOT-ELISA夹心ELISA日本血吸虫病
- 夹心dot-ELISA检测钉螺体内血吸虫抗原的研究被引量：1
- 1997年
- 目的 :探讨夹心 dot- EL ISA检测钉螺血吸虫抗原的可行性及可靠性。方法 :利用组合单抗 ,通过夹心 dot- EL ISA检测未感染和不同感染期的钉螺血吸虫抗原 ,并与镜检比较。结果 :集体感染组 1- 3wk,夹心 dot- EL ISA检测的阳性率、符合率随着时间的推移逐渐呈上升趋势 ;感染4 - 9wk,除第 6wk外 ,阳性率、敏感性及符合率均为 10 0 % ,同镜检结果基本一致 ;未感染组结果全部阴性 ,与镜检结果一致 ;12只镜检显示为其它吸虫感染的钉螺 ,夹心 dot- EL ISA阴性。结论 :夹心 dot- EL ISA可用于检测钉螺血吸虫抗原。
- 沈大康娄文娴郑志国
- 关键词：ELISA钉螺血吸虫抗原
- 表达序列标签策略及其在血吸虫研究中的应用被引量：1
- 2002年
- 摘要 表达序列标签(EST)策略是寄生虫基因组研究的工作重点之一,它在血吸虫研究中的成功应用可大大增加对血吸虫基因和血吸虫本质的认识,并为确定新的血吸虫候选疫苗和药物靶标提供更多的候选基因,揭开了血吸虫基因组研究的新篇章。本文就EST的基本概念、EST策略及其在血吸虫基因发现、基因表达谱分析中的应用作一简要综述。
- 沈大康韩泽广薛纯良
- 关键词：表达序列标签EST血吸虫基因表达谱基因组
- 日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究被引量：11
- 1996年
- 目的：探讨日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制。方法：感染日本血吸虫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠淋巴结Ｂ细胞和小鼠骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０株）融合，制备抗血吸虫循环抗原不同表位的单克隆抗体组合后为探针，检测日本血吸虫病患者和正常人血清；晚期血吸虫病患者脾血和外周血；感染日本血吸虫兔和小鼠的门脉血和外周血。结果：获得９种抗日本血吸虫单克隆抗体，将其中抗不同抗原表位的单抗优化组合后使用，检测抗原的敏感性可提高４－８倍。用组合单抗建立的夹心ＥＬＩＳＡ和ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测慢性血吸虫病的敏感性分别为７４％和８４．２％，特异性分别为９６．１％和９５．７％。通过小鼠和家兔门脉血和外周血以及人的脾血和外周血循环抗原的比较研究表明，门脉血中的抗原水平明显高于外周血。结论：用组合单抗较用一种单抗提高检出率。ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测的不仅是循环抗原，同时还检测到免疫复合物，因此影响疗效考核。
- 娄文娴张恩英俞安洲许东红杨士静沈大康朱旭明薛纯良
- 关键词：日本血吸虫单克隆抗体循环抗原
- 外周和门脉血中日本血吸虫循环抗原的检测被引量：1
- 1997年
- 该研究通过小鼠和家兔门脉血和外周血以及人的脾血和外周血检测循环抗原的比较研究表明，门脉血和脾血的抗原水平显著高于外周血。提示由源抗原经过宿主的肝脏处理和各种免疫应答的作用，使抗原发生变化。因此，决不能靠检测某种单一抗原组分来判断千差万别的感染现象。
- 娄文娴俞安洲沈大康许东红薛纯良
- 关键词：循环抗原日本血吸虫门脉血
- 日本血吸虫SjE16基因的原核表达及其免疫诊断应用潜能被引量：15
- 2003年
- 目的 亚克隆和表达日本血吸虫钙结合蛋白SjE16的编码基因,初步研究其免疫反应性。方法 根据表达序列标签(ESTs)测序的结果设计引物,从含有钙结合蛋白基因片段的克隆中扩增得到该编码基因,亚克隆人原核表达载体pGEX4T-1中表达,然后用ELISA方法初步检测重组蛋白的免疫反应性。结果 成功克隆和表达了日本血吸虫SjE16基因,该重组蛋白用于血吸虫病免抗体ELISA检测,其特异性和敏感性分别为94.1％(16/17)和88.2％(15/17)。非治疗组在感染后9～11wk抗体水平升高,并在感染后21wk仍维持高水平,而治疗组血清抗SjE16抗体水平在治疗后11wk下降至感染前水平。SjE16用于检测血吸虫病患者血清中的抗体,其特异性为98.3％(57/58),急性患者和慢性患者的敏感性分别为85.5％(53/62)和70.2％(40/57)。结论 获得了SjE16的重组蛋白,该蛋白能被日本血吸虫病患者的血清所识别,且在病兔药物治疗后迅速下降。SjE16重组蛋白具有诊断现感染和疗效考核的潜能。
- 王兆军胡薇沈大康武小文王聚君韩泽广薛纯良
- 关键词：日本血吸虫病基因重组
- 日本血吸虫Sjp50重组蛋白用于免疫诊断的研究被引量：13
- 2003年
- 目的 克隆和表达日本血吸虫免疫素 Sjp5 0的编码基因 ,初步研究其免疫反应性。方法 根据 EST测序的结果设计引物 ,从含有免疫素基因片段的克隆中扩增得到该编码基因 ,亚克隆入原核表达载体 p GEX4 T- 1中表达 ,然后用 EL ISA方法初步检测重组蛋白的免疫反应性。结果 成功克隆和表达了日本血吸虫 Sjp5 0基因。该重组蛋白用于血吸虫抗体的 EL ISA检测 ,在动物实验中检测特异性和敏感性分别为 94 .12 %和 76 .6 7% ,非治疗组兔体内的抗体在感染后 9- 11周上升到高水平 ,并在感染后 2 1周仍维持在高水平 ,而治疗组兔血清中抗 Sj Fp5 0抗体水平在治疗后 11周迅速下降至感染前抗体水平。用于血吸虫病人血清中的抗体检测的特异性为 98.30 % ,急性病人和慢性病人检测的敏感性分别为 95 .2 0 %和 6 3.2 0 %。结论 获得了 Sjp5 0的重组蛋白 ,该蛋白能被日本血吸虫病人的血清所识别 ,且在动物实验中其抗体水平在药物治疗后 11周降至感染前的水平 ,具有诊断现症感染病人和疗效考核的潜能。
- 胡薇王兆军武小文王聚君韩泽广沈大康冯正
- 关键词：日本血吸虫重组蛋白免疫诊断克隆
