毕春霞
- 作品数：39 被引量：142H指数：7
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金青岛市自然科学基金项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 病原微生物临床检验技术进展被引量：11
- 2005年
- 毕春霞闫志勇王斌
- 关键词：病原分子生物学免疫学
- 肝硬化患者血清D二聚体检测的初步探讨
- 1997年
- 通过正常对照组40例,肝硬化组72例的血清D二聚体测定的对比,显示肝硬化组与正常对照组结果有显著性差异(P<0.001)。提示肝硬化患者体内存在继发性纤溶亢进。
- 张德坤孔庆兰毕春霞
- 关键词：D二聚体肝硬化继发性纤溶亢进
- 微型寡核苷酸芯片检测脑脊液病原菌研究与应用被引量：1
- 2008年
- 目的建立快速检测脑脊液标本中常见病原菌的微型寡核苷酸芯片。方法根据脑脊液中常见病原菌16S rRNA基因序列设计通用引物和检测探针;探针固定于尼龙膜上制成寡核苷酸芯片;通用引物扩增病原菌DNA并标记生物素,产物与芯片进行反向杂交检测;对该体系的敏感性和特异性进行了测试,并检测了32例临床病原菌感染的脑脊液标本。结果所有实验菌株均只与芯片上相应探针杂交。该法最低可检测出10 CFU/ml的大肠埃希菌;32例临床本的检测结果与常规鉴定法完全一致。结论该寡核苷酸芯片法能够准确、敏感、快速地检测脑脊液标本中的病原菌。
- 闫志勇毕春霞鲁晓晴苏维奇宋旭霞王斌
- 关键词：脑脊液病原菌寡核苷酸芯片分子杂交
- 不动杆菌CRISPR系统基因结构的分析及其与耐药性关系的研究被引量：5
- 2018年
- 目的研究不动杆菌CRISPR-Cas系统的基因结构并探讨其与耐药性的关系。方法收集CRISPR db数据库所有不动杆菌菌株序列信息,利用CRISPRfinder软件分析CRISPR基因座;通过MEGA软件对cas基因序列进行对比及系统进化分析;收集自GenBank中的菌株基因注释,查找相关耐药基因信息,分析其与CRISPR基因座之间的关系。结果 80株不动杆菌包含11个种,21.3%的菌株含有确定CRISPR基因座,26.5%的菌株只含可疑基因座。基因座位于染色体或质粒上。大部分不动杆菌的CRISPR系统属于I-F型,并且根据cas1、cas3、csy2、csy3、cas6/csy4基因序列及csy1基因的存在均可分为I-Fa和I-Fb两个亚型。不动杆菌CRISPR基因座中有14种不同的重复序列,长度为24~31bp,平均重复次数为53,且不同亚型间的重复序列不同,而同一亚型内保守性较高。无CRISPR系统的菌株中A类和D类β-内酰胺酶、乙酰转移酶、核苷酸转移酶及16SrRNA甲基化酶等耐药基因的携带率均显著高于有CRISPR系统菌株。结论不动杆菌CRISPR系统属于I-Fa和I-Fb型,cas3、csy2、csy3、csy4、cas1基因序列均可单独作为不动杆菌属CRISPR系统分亚型的依据;CRISPR基因座的存在可降低某些耐药基因的水平转移,而基因组中相对较低的CRISPR系统携带率可能是导致不动杆菌耐药率日趋增高及更易出现多重耐药的原因之一。
- 付恒霞毕春霞张蒙蒙秦江楠罗玮王斌闫志勇
- 关键词：不动杆菌耐药基因基因结构
- 脑脊液病原菌16S rRNA微型寡核苷酸芯片检测方法的初步研究被引量：4
- 2006年
- 目的初步建立一种脑脊液标本中常见病原菌的快速检测方法。方法根据脑脊液标本中常见病原菌16S rRNA基因保守区的序列设计用于基因扩增的通用引物,制备细菌的通用探针、革兰阳性和阴性菌通用探针,以及肠杆菌科属、嗜血杆菌属和脑膜炎奈瑟菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、产单核李斯特菌的属或种特异性探针,将探针加尾后固定于尼龙膜上制成寡核苷酸芯片。提取标本中病原菌DNA后用通用引物行PCR扩增,扩增过程中用生物素标记;将产物变性后分别与点有各种探针的尼龙膜反向杂交,检测脑脊液中细菌的感染情况。结果所有探针均只与其相应的细菌DNA扩增产物反应产生杂交信号。结论建立的脑脊夜病原菌寡核苷酸芯片能够准确、敏感、快速、高效地检测脑脊液标本中病原菌的感染情况。
- 毕春霞武静张德坤苏维奇刘成玉闫志勇
- 关键词：脑脊髓液寡核苷酸芯片寡核苷酸序列分析
- 沙雷菌CRISPR-Cas系统的基因结构分析被引量：2
- 2020年
- 目的CRISPR-Cas系统是细菌中的适应性免疫防御系统,能特异性阻止噬菌体、质粒等外源基因的侵袭从而维护自身基因组的完整性。本研究在基因组水平对沙雷菌属CRISPR-Cas系统的整体结构及主要特征进行分析。方法利用CRISPRfinder、BLAST在线工具及DNAstar、MEGA等软件分析CRISPR-Cas系统的分布、重复序列、间隔序列及cas1基因的特点,同时对基因组中的前噬菌体进行筛查并分析其与CRISPR-Cas系统的关系。结果88株沙雷菌有19株(21.59%)含有确定CRISPR阵列,其中9株(10.22%)同时含有cas基因簇;CRISPR-Cas系统型别主要为Ⅰ-F和Ⅰ-E,cas1基因序列的发育分类与系统分型一致。12.3%的间隔序列可与某些噬菌体或质粒高度同源;含cas基因簇的沙雷菌中前噬菌体数量少于其他组(P<0.01)。结论沙雷菌中CRISPR-Cas系统的携带率较其他细菌低且结构不完整,超过半数以孤儿CRISPR阵列形式存在。沙雷菌CRISPR-Cas系统对噬菌体有较强的防御能力,且该功能有赖于CRISPR-Cas系统结构的完整。
- 王梦园毕春霞兰蕾张蒙蒙秦江楠罗玮朱元祺闫志勇
- 关键词：沙雷菌属免疫防御前噬菌体
- 一种外源蛋白原核分泌表达系统及其应用
- 本发明涉及一种外源蛋白原核分泌表达系统，由工程菌和载体两部分组成。首先以能高效胞外分泌SMP蛋白的D2野生株为出发菌，定点敲除了SMP蛋白编码基因，获得的突变株为工程菌，保藏号为CGMCC No.10365；同时以同源重...
- 闫志勇毕春霞王斌钱冬萌宋旭霞陈豪
- 文献传递
- 多重半套式聚合酶链反应在检测脑脊液病原菌中的应用被引量：8
- 2003年
- 目的 建立多重半套式聚合酶链反应(PCR)快速检测脑脊液标本中常见的病原菌。方法 通过对病原菌 1 6SrRNA基因保守区和变异区的序列分析 ,设计通用引物及革兰阴性菌、革兰阳性菌的特异性引物 ,分别作为外、内侧引物 ,对脑脊液标本中不同细菌的DNA进行多重半套式PCR扩增 ;同时与常规细菌培养法作比较 ,并检测了该方法的敏感性。结果 外侧扩增后革兰阳性菌、革兰阴性菌经扩增后均有长约 1 0 32bp的片段产生 ;内侧扩增两种细菌除 1 0 32bp的产物外 ,革兰阳性菌另有一 336bp的特异性产物 ,革兰阴性菌另有一 1 2 7bp的特异性产物。该方法最低可检测出8cfu ml的大肠埃希菌 ;62份脑脊液标本扩增结果与培养法相比 ,敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为 93 .8%、5 .7%、88.2 %、97.8%。结论 多重半套式PCR方法能特异、敏感。
- 闫志勇王斌毕春霞
- 关键词：聚合酶链反应脑脊液细菌RRNA基因
- 母乳钙与新生儿尿钙的测定及临床意义
- 1998年
- 毕春霞闫志勇孔庆兰张德坤舒琏
- 关键词：钙乳汁新生儿
- 长期服用乙双吗啉诱发急性白血病1例
- 1996年
- 乙双吗啉是国产抗癌药,近年广泛用来治疗“银屑病”,其诱发急性白血病,发病机理尚不清楚,目前初步认为该药作为一种染色体毒物,引起染色体畸变而致白血病。本例病人因长年服用乙双吗啉从而诱发急性白血病。 于某,男,40岁。因全身乏力,咽痛,伴发热、畏寒于1996年5月28日入院。体检:全身皮肤有散在瘀斑,左侧颈部可扪及肿大淋巴结,肝、脾未触及,心、肺(一),T:39.5℃。病人既往身体健康,无家族遗传病,未接触放射因素,无外伤手术史。
- 舒琏孔庆兰毕春霞
- 关键词：乙双吗啉急性白血病外伤手术家族遗传全身乏力肿大淋巴结
