梁焕喜
- 作品数：4 被引量：28H指数：2
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项广东省自然科学基金更多>>
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- 人3型腺病毒六邻体高变区HVR1、HVR2、HVR5、HVR7的氨基酸修饰限制研究被引量：3
- 2012年
- 传统腺病毒载体的局限性使得外源抗原以衣壳融合表达的方式在腺病毒载体上的应用越来越广泛,但是在人3型腺病毒(Adenovirus serotype 3,Ad3)载体六邻体高变区(Hypervariable region,HVR)改造过程中经常出现无法成功拯救病毒的情况,本研究主要根据对生物信息学预测的HVR1、HVR2、HVR5和HVR7中某些氨基酸进行删减或保留,通过构建重组Ad3载体pBRAdΔE3GFP-mHexon,转染AD293细胞,验证Ad3载体在六邻体高变区的这些氨基酸进行修饰时对病毒拯救的影响,并由此获得高变区HVR1、HVR2、HVR5和HVR7在基因工程改造中应该保留的氨基酸的数据。这一研究结果为人3型腺病毒六邻体融合表达策略提供了操作依据,也为人3型腺病毒六邻体表达外源抗原表位,作为多价疫苗载体展示平台的应用奠定了基础。
- 周志超梁焕喜李婷钟田花田新贵周荣李潇
- 关键词：腺病毒高变区
- 广州地区儿童呼吸道合胞病毒与肺炎支原体流行病学分析被引量：22
- 2015年
- 目的监测广州地区急性呼吸道疾病患儿呼吸道合胞病毒（RSV）与肺炎支原体（MP）流行情况，分析RSV与MP在广州地区的流行特征，为广州地区RSV与MP的监控和防治提供参考。方法采集2012年1月至2014年1月在广州地区急性呼吸道疾病患儿（≤14岁）咽拭子标本，提取标本核酸，利用荧光定量PCR进行RSV与MP检测；并对其流行特征进行分析。结果在3760例患儿中，检出RSV392例，阳性率为10．4％；检出MP339例，阳性率9．0％。在RSV阳性病例中，年龄在0—9个月患儿最高，达19．6％（181／923例）。RSV流行高峰发生于2012年2月至4月和2013年1月至4月，阳性率分别为26．8％（136／507例）和18．0％（151／839例）。在MP阳性病例中，年龄在6-10岁阳性率最高，达20．1％（97／484例），MP流行高峰发生在2012年7月至10月和2013年6月至10月，阳性率分别为16．3％（92／564例）和13．4％（124／922例）。在上呼吸道症状中，RSV感染患儿鼻塞[28．6％（112／392例）]、流涕[33．2％（130／392例）]发生率显著高于MP阳性患儿[15．0％（51／339例）、20．6％（70／339例）]，2组比较差异均有统计学意义（χ^2=19．199、14．325，P均〈0．001）；RSV感染患儿咳嗽[78．1％（306／392例）]、咳痰[20．4％（80／392例）]发生率显著低于MP阳性患儿[90．0％（305／339例）、27．1％（92／339例）]，2组比较差异均有统计学意义（r=18．791、4．577，P〈0．001，P=0．032）。在下呼吸道症状中，RSV阳性患儿气喘[33．2％（130／392例）]、气促[13．5％（53／392例）]、喘鸣音[29．3％（115／392例）]、痰鸣音[18．9％（74／392例）]发生率显著高于MP阳性患儿[11．5％（39／339例）、6．5％（22／339例）、11．5％（39／339例）、10．6％（36／339例）]，2组比较差异均有统计学意义（χ^2=47．979、9．760、34．763、9．698，P〈0．001，P=0．002，P�
- 曾志奇刘文宽陈德晖檀卫平梁焕喜陈美欣邱淑燕廖小红周荣
- 关键词：急性呼吸道疾病呼吸道合胞病毒肺炎衣原体流行病学特征
- 儿童手足口病咽拭子39例病毒检测及临床分析被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨手足口病(HFMD)患儿咽拭子病毒水平及其临床意义。方法:对39例HFMD患儿采集咽拭子(其中19例于恢复期采集咽拭子复查),以荧光定量RT-PCR方法检测病毒负荷量并做对比分析;用描述性流行病学方法对实验室确诊病例进行流行病学特征分析。结果:本组病例均为肠道病毒71型(EV71)检测阳性,其中合并甲型流感病毒、冠状病毒感染各1例,副流感病毒感染4例。急性期患儿EV71病毒负荷水平明显升高,恢复期病毒水平显著下降,8例恢复期患儿病毒检测阴性。结论:2010年秋冬季佛山地区儿童HFMD病原以EV71为主,在流行季节可出现流感病毒及其他呼吸道病毒混合感染。咽拭子荧光定量RT-PCR检测是儿童手足口病病原学诊断的快速有效手段。HFMD临床表现轻重与患儿咽部EV71病毒负荷量无相关性,患病早期病毒呈高水平表达,抗病毒治疗宜尽早实施。
- 黄小霏檀卫平梁焕喜
- 关键词：手足口病儿童肠道病毒71型
- 人3型腺病毒衣壳六邻体嵌合乙肝病毒preS1双抗原表位重组体的构建及其抗原性的初步鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的：通过构建在六邻体中嵌合表达乙肝病毒表面抗原preS1上两个中和抗原表位的人3型重组腺病毒，鉴定应用此策略所展示表位的抗原性。方法利用overlap PCR技术扩增出在HVR1和HVR2中分别引入乙肝病毒表面抗原中和表位KR359和KR127的嵌合六邻体基因，酶切后连接入穿梭质粒pBR322-L/R，然后与骨架质粒pBRAdΔE3GFP共转化至BJ5183中重组，得到阳性克隆pBRAdΔE3GFP-preS1。将其线性化后转染293细胞拯救病毒，再大量扩增并纯化。同时应用表达载体pGEX-4T3表达融合蛋白GST-KR359KR127，将重组病毒和GST融合蛋白分别免疫BALB/c小鼠获得多抗血清。 ELISA、Western blot实验鉴定嵌合表位的抗原特性。结果人3型腺病毒载体成功的在衣壳六邻体表面展示了乙肝病毒表面抗原中和表位KR359和KR127，并且诱导产生的多抗血清能识别GST融合表达抗原以及天然的乙肝病毒表面抗原。结论衣壳融合策略置换高变区来展示外源中和表位的方法可行，并且可以通过同时置换多个高变区来达到加强免疫效果或者多价抗原免疫保护的作用，为人3型腺病毒六邻体嵌合载体系统在疫苗研究中的应用奠定基础，同时也为新型乙肝疫苗的研制奠定基础。
- 周志超梁焕喜田新贵招穗珊周荣李潇
- 关键词：乙型肝炎表面抗原中和表位
