柴俊
- 作品数：47 被引量：62H指数：4
- 供职机构：云南农业大学更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家自然科学基金云南省高端科技人才引进计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原核表达载体的构建与鉴定
- 2015年
- 本试验旨在构建能表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的重组质粒。用疑似患猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病猪的脾脏、肺脏病料提取RNA,根据PRRSVORF5基因设计1对引物,进行RT-PCR扩增,将ORF5目的基因克隆到pMD19-T载体中,得到pMD19-ORF5重组菌。根据测序结果和表达载体特点,设计1对带有NcoⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物,扩增目的片段(dORF5),将其分别与pProEXHTb载体、pNZ8149载体连接,得到HTb-dORF5/DE3和pNZ8149-dORF5/NZ3900重组菌,分别用IPTG和Nisin诱导,再进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果显示,HTb-dORF5/DE3重组菌在1.5mmol/L IPTG诱导时表达量最高,通过SDSPAGE和Western blotting分析,在约22ku处有特异性条带,且具有反应原性;pNZ8149-dORF5/NZ3900重组菌在20ng/mL Nisin诱导时表达量最高,通过SDS-PAGE和Western blotting分析,在约19ku处有特异性条带,间接免疫荧光试验有特异性绿色荧光。本研究成功构建重组质粒HTb-dORF5和pNZ8149-dORF5并获得表达,这为进一步研制预防PRRS疫苗奠定坚实基础。
- 周玉照马志亮孙亭亭杨洁张小苗柴俊张娜娜张以芳
- 关键词：ORF5基因大肠杆菌乳酸乳球菌
- 云南猪源乳酸杆菌的筛选及应用被引量：1
- 2017年
- 为进一步开发猪源益生菌资源,从昆明屠宰场猪小肠样品中分离纯化出25株乳酸菌,经过表型鉴定和16S-r RNA鉴定均为乳酸杆菌,包括6个菌种。经过抗逆性环境分析筛选获得一株敏捷乳杆菌,其生长性能好、耐酸耐胆盐能力强、肠黏附效果好,适合作为益生菌制剂的候选菌种。将该菌种应用于仔猪生产,能促进仔猪生长、提高饲料利用率、减少腹泻发生,对仔猪生产性能上产生有益影响;能提高仔猪血清中免疫球蛋白含量、细胞因子水平和淋巴细胞的增殖指数。
- 郑锦玲黄翠琴陈媛李云蓉李石友李文贵张以芳柴俊
- 关键词：乳酸菌益生特性动物试验
- 一种牛养殖用饲喂食槽
- 本实用新型涉及牲畜养殖技术领域，公开了一种牛养殖用饲喂食槽，所述食槽的槽口端安装有往复推送机构，所述往复推送机构中导向滑台的台架前侧安装有探入至食槽槽体内部的清洁刮板，且往复推送机构中支撑架的支架下方安装有供水机构，所述...
- 张双玲柴俊曲伟杰顾小龙安清聪李文贵武鑫
- 云南猪关节炎细菌性病原的分离鉴定被引量：4
- 2016年
- 本试验旨在了解云南4个猪场猪关节炎的细菌性病因及其耐药性。通过分离培养、生化试验、药敏试验、动物致病性试验及16SrRNA鉴定,对4个猪场出现猪关节炎症状的样品进行了分析。结果显示,A、B、C和D 4个猪场共96份样品中,检出金黄色葡萄球菌55份,阳性率分别为20.8%、83.3%、91.7%和33.3%;检出链球菌56份,阳性率分别为95.8%、21.7%、25.0%和83.3%;混合感染阳性率分别为20.8%、21.7%、25.0%和33.3%。因此,金黄色葡萄球菌是导致B、C两猪场猪关节炎的主要细菌性病原;链球菌是导致A、D两猪场猪关节炎的主要细菌性病原;两种细菌对菌必治、米诺环素和环丙沙星较敏感,对多种抗生素产生了耐药性。
- 周玉照张小苗柴俊李三平张娜娜张以芳
- 关键词：金黄色葡萄球菌链球菌
- 武定鸡肠黏膜乳酸菌的分离鉴定及应用被引量：2
- 2017年
- 为进一步挖掘益生菌资源,从武定鸡黏膜分离鸡源乳酸菌,共分离到20株乳酸菌,分别命名为LacC1~LacC20。根据培养特性、革兰氏染色、生理生化特性和16s-rRNA方法等鉴定为7个种。并通过乳酸菌益生特性试验筛选出3株优良菌株,进行雏鸡饲喂试验。结果表明在雏鸡的饮水中添加乳酸菌,可以明显增加武定鸡的日增重、法氏囊和脾脏等免疫器官的重量和鸡群肠道中乳酸菌含量,提高鸡免疫器官指数和外周淋巴细胞指数SI,降低料肉比和死亡率。
- 郑锦玲陈媛李云蓉彭洁李石友李文贵柴俊卢志远张以芳
- 关键词：武定鸡乳酸菌益生特性
- 云南省猪圆环病毒2型遗传进化分析被引量：1
- 2022年
- 【目的】调查猪圆环病毒2型(PCV2)在云南猪群和牛群中的流行情况,明确云南PCV2毒株的遗传变异、分子进化趋势。【方法】采用PCR方法对云南省11个地区783份猪、牛的血液、粪便等样品进行PCV2病原学检测,对6份PCV2阳性样品进行全基因组扩增、克隆与序列测定,利用DNAStar软件比对分析全基因和ORF2氨基酸序列,使用MEGA软件绘制遗传进化树。【结果】检测样品的PCV2阳性率为48.73%;共测得6株PCV2全基因组序列,其中5株为1 767 bp, 1株为1 768 bp;经遗传发育分析可知,有PCV2a亚型2株、PCV2b亚型2株、PCV2d亚型2株;6株PCV2毒株同源性在94.6%~99.9%之间,与GenBank数据库中20条参考株同源性在91.4%~99.8%之间;6株PCV2亚型的ORF2都有其典型的氨基酸位点,PCV2a毒株在第80(V80L)氨基酸位点突变为与PCV2(b/d)一致,PCV2b毒株在59(R59K)、63(K63R)、190(A190T)等氨基酸位点突变与PCV2d一致。【结论】PCV2在云南猪群中普遍存在,以PCV2a、PCV2b和PCV2d这3个基因亚型共存为主,且PCV2(a/b)有向PCV2d突变的趋势,荷斯坦奶牛尚未感染PCV2。
- 何帅章雨竹吕念词张以芳柴俊
- 关键词：PCV2ORF2进化突变
- Viili乳制品中干酪乳杆菌的分离鉴定被引量：8
- 2012年
- 从引进Viili乳制品中筛选、鉴定出3种优良乳酸菌。采用平板分离法从Viili乳制品中分离3株乳酸菌,通过表型1、6S rRNA的PCR扩增、克隆、测序鉴定。3株乳酸菌的表型鉴定结果符合伯杰细菌鉴定手册中乳杆菌属的干酪乳杆菌,16S rRNA序列同源性分析结果表明3株分离菌与干酪乳杆菌的同源性分别为99.93%、100.00%9、9.78%,从Viili乳制品分离到3株干酪乳杆菌。
- 张书光张云娟代卫东荀绍雄刘旭川柴俊张以芳
- 关键词：干酪乳杆菌RRNA
- 奶牛结核病候选基因CARD15基因及功能突变检测方法
- 本发明属于分子生物学动物疾病诊断技术领域，具体涉及一种奶牛结核病候选基因CARD15基因及其功能突变检测方法。本发明提供的奶牛结核病候选基因CARD15基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所提供的奶牛结核...
- 张以芳柳桐史宪伟王生奎柴俊马志亮孙亭亭秦波王有涛
- 文献传递
- 荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗方法的建立
- 猪瘟是危害养猪业的重要传染病,猪瘟主要依靠猪瘟兔化弱毒疫苗预防,目前各厂家不同批次弱毒苗的质量效果,主要通过注射疫苗后,检测免疫抗体来验证,耗时费事.本研究设计合成了两对引物(一对质粒标准品引物和一对荧光定量PCR引物)...
- 范斌马志亮刘岳杨洁柴俊刘旭川张以芳
- 关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果荧光定量检测
- 文献传递
- 蓝舌病病毒基因产物及其生物学功能被引量：1
- 2010年
- 蓝舌病病毒(bluetongue disease virus,BTV)是呼肠孤病毒科环状病毒属的双股RNA病毒,其核酸由3个大片段(L1～L3)、3个中片段(M4～M6)和4个小片段(S7～S10)等10个节段组成,分别编码7种结构多肽(VP1～VP7)和4种非结构多肽(NS1、NS2、NS3a、NS3b)。通过dsRNA基因组进行体外翻译,再根据各基因与所编码蛋白的关系,查明了各基因编码的蛋白质及其分子质量和功能。
- 童亮柴俊张以芳肖晶
- 关键词：蓝舌病病毒基因结构基因产物编码蛋白生物学功能
