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表达外源rhBMP2的CHO细胞株稳定性分析被引量：2: 2008年; 骨形态发生蛋白2(BMP2)属于TGF-β超家族,是诱导成骨活性最强的BMPs之一,具有广泛的临床应用的前景。本实验室已成功构建高效表达rhBMP2的重组CHO细胞株,现选取其中一株表达量最高的细胞rCHO(hBMP2)-C8进行长期体外培养,并在培养过程中比较了添加和去除压力筛选中使用的MTX对细胞生长,rhBMP2基因拷贝数及rhBMP2分泌蛋白表达的影响;检测了该细胞株在无血清培养基中可以连续表达rhBMP2的时间以及培养基中rhBMP2的温度敏感性等等。该研究为进一步采用动物细胞规模化培养技术生产rhBMP2奠定了基础。; 翟春利闫继东杨爽杜君袁伟王兆奇朱天慧; 关键词：BMP2 稳定性

一种吡咯并嘧啶化合物及其制备方法、药物组合物和应用: 本发明公开了一种如式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R1选自H、烷基、芳基、取代芳基、烷基酰胺、芳基酰胺结构中的任意一种；R2选自H、烷基、卤素、芳基、取代芳基结...; 杨爽欧洋李建军杨光张坤王璇

高效表达rhBMP2的CHO细胞株及其建立方法: 本发明涉及构建一种可以高效表达外源rhBMP2的CHO细胞株。主要是利用二氢叶酸还原酶缺陷型中华仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-)作为宿主细胞，稳定转染外源的hBMP2质粒，经药物抗性筛选和基因扩增...; 朱天慧张道永闫继东杨爽; 文献传递

毕赤酵母密码子用法对人骨形成蛋白6表达的影响分析: 2010年; 对已筛选出的毕赤酵母阳性转化子菌株(His+Mut+)和(His+Muts)进行PCR验证,用SDS-PAGE和Western blot方法检测重组骨形成蛋白6的表达情况,为了解释无表达的结果,对酵母的密码子与重组骨形成蛋白6的密码子兼容性进行了理论上的初步分析。; 乔玉欢米东杨爽朱天慧; 关键词：毕赤酵母

不同蛋白标签对LMO2融合蛋白沉淀实验的影响被引量：3: 2008年; 融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,也称Ttg-2或Rbtn2)是一种小分子量难溶蛋白。利用原核系统分别表达了含有GST和麦芽糖结合蛋白(MBP)两种标签的LMO2融合蛋白,发现GST-LMO2融合蛋白以包涵体的形式表达,而MBP-LMO2融合蛋白则能够以可溶形式表达,而且MBP-LMO2的表达量明显高于GST-LMO2融合蛋白。将可溶性的MBP-LMO2融合蛋白和复性后的GST-LMO2融合蛋白分别用于钓取K562细胞中LMO2的结合蛋白,结果显示二者都可以结合K562细胞中内源性的GATA1蛋白,而MBP-LMO2融合蛋白捕获的GATA1蛋白明显多于复性后的GST-LMO2融合蛋白。这一结果提示,在研究一些分子量小、疏水性强的蛋白质时改变标签蛋白可能是一种有益的尝试。; 袁伟孙伟杨爽闫继东翟春利杜君王兆琦安迪朱天慧; 关键词：麦芽糖结合蛋白

一个遗传性蛋白S缺陷症家系中蛋白S基因突变的分析: 该文利用银染聚合酶链反应——单链构象多态性分析(PCR-SSCP)的方法,对随机抽样的患者之一(该文'研究对象'家系图谱中Ⅲ-16)的PS基因Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、ⅩⅢ、ⅩⅣ共八个外显子进行突变检测,并在方法学上进行了...; 杨爽; 关键词：银染技术蛋白S 聚合酶链反应-单链构象多态性分析; 文献传递

鹰嘴豆芽素A在制备抑制乳腺癌增殖、转移药物及乳腺癌化疗增敏剂中的用途: 本发明提供了鹰嘴豆芽素A(Biochanin A)在制备抑制乳腺癌增殖、转移的药物以及制备乳腺癌化疗增敏剂中的用途。本发明涉及的化合物具有降低乳腺癌中ZEB1基因表达的作用，并进而抑制乳腺癌的增殖、转移和化疗耐药，显示较...; 杨爽张震; 文献传递

一种用于分选型流式细胞仪的高通量收集装置: 本实用新型公开了一种用于分选型流式细胞仪的高通量收集装置，包括一体式挂架、多个流式细胞引流管、多根连接管；一体式挂架上设置有多个盲孔，与每个盲孔的侧壁连通开设有缺口；多个流式细胞引流管对应放置在多个盲孔内；多根连接管的第...; 王航杨爽

利用同源蛋白的信号肽和前肽序列在CHO细胞中表达重组人BMP6被引量：1: 2007年; BMP6属于TGF-β超家族,具有较强的骨诱导作用。主要利用BMP6自身的信号肽、前肽与成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP6;同时利用BMP2的信号肽、前肽与BMP6的成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP2/6。将两种质粒分别瞬时转染Cos7细胞,发现质粒pcDNA-BMP2/6表达rhBMP6的效率高于质粒pcDNA-BMP6。然后将质粒pcDNA-BMP2/6与含二氢叶酸还原酶基因(dhfr)的表达质粒共转染dhfr缺陷型的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞,经G418筛选、氨甲蝶呤(MTX)介导目的基因扩增、亚克隆后得到表达rhBMP6成熟肽的单克隆细胞株。将表达产物rhBMP6初步纯化后,能诱导前成肌细胞系C2C12向成骨细胞方向转化,显示其具有骨诱导作用。; 闫继东杨爽吕树军雷荣悦朱天慧; 关键词：骨诱导作用

原癌基因LMO2短剪切模式的结合蛋白鉴定及功能分析: 2008年; 目的研究原癌基因LMO2短剪切模式（LMO2-C）的结合蛋白在白血病细胞K562中的表达及功能分析。方法利用麦芽糖结合蛋白（MBP）沉淀技术和哺乳动物双杂交技术研究LMO2-C的结合蛋白在K562细胞中的表达；半定量RT-PCR检测过表达LMO2-C的K562细胞中红系发育的标志性基因GPA的表达水平。结果MBP原核表达系统成功表达并被纯化出可溶性MBP-LMO2-C结合蛋白，利用MBP沉淀技术验证了LMO2-C能与K562细胞中内源性的GATA-1、LDB1结合；哺乳动物双杂交试验进一步证明LMO2-C能与LDB1结合，而且其过表达能够抑制LMO2-L与LDB1的结合，抑制率达（81．13±0．68）％；半定量RT-PCR结果显示在过表达LMO2-C的K562细胞中，GPA基因相对表达水平下调（51．00±1．58）％。结论LMO2-C能结合K562细胞中内源性GATA-1、LDB1蛋白，并能下调红系发育的标志性基因GPA的表达。; 袁伟杨爽孙伟杜君翟春利王兆琦朱天慧; 关键词：基因双杂交系统技术

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杨爽