杨小蓉
- 作品数：24 被引量：76H指数：5
- 供职机构：广东药学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 荧光定量PCR检测结核杆菌PncA基因突变研究被引量：2
- 2013年
- 目的运用实时荧光定量PCR方法检测结核分支杆菌耐吡嗪酰胺(PZA)分离株PncA基因突变情况,从而探讨其水平与结核病的临床转归的相关性。方法用荧光定量PCR Taqman探针技术,以PncA基因片段设计引物,以突变发生率最高的47位(Thr→Ala)(PncA139)和85位(Leu→Pro)(PncA254)设计探针,10倍系列稀释含有目的基因的质粒,进行实时荧光定量PCR反应,建立标准曲线。并用于检测临床105份标本(TB-DNA>103)pncA基因突变表达量。结果①63例PncA139点突变表达量>102,占60%;②31例PncA254点突变表达量>102,占30%;③PncA139位突变表达量>103的患者同时也出现PncA254位突变表现,且TB-DNA表达量均>106;④PncA139位突变的高拷贝组与低拷贝组突变率比较χ2为50.44,85位点χ2为20.97,P值均<0.005,比较差异亦有明显统计意义。结论 TB-DNA高拷贝且PncA基因突变是临床结核病患者病情反复,以致迁延不愈的原因之一。
- 杨小蓉陈少莲卢景辉丁彩屏
- 关键词：结核分支杆菌吡嗪酰胺
- 酸刺激前后唾液淀粉酶活性、流率和pH值的性别差异被引量：3
- 2015年
- 目的探讨唾液淀粉酶(sAA)活性、流率和pH值以及sAA活性与流率相关性的性别差异。方法采集105名健康志愿者酸刺激前后的唾液标本,测定其sAA活性、流率和pH值,分析sAA活性和流率的相关性,比较唾液测定指标之间的性别差异。结果柠檬酸刺激能增加sAA活性、流率和pH值,其中以流率增加最大(P<0.01);sAA活性、流率和pH值在酸刺激前后以及对刺激的反应(前后的差值)都不存在性别差异;女性在酸刺激前后sAA活性和流率之间以及sAA活性差值和流率差值之间都存在正相关(P<0.05),并且相关系数相对稳定;男性只在酸刺激后的sAA活性和流率之间表现正相关(P<0.01)。结论 sAA活性、流率和pH值在基础和应激状态下都没有性别差异,但是sAA活性和流率之间的相关性存在一定的性别差异。
- 杨泽民林静陈龙辉张敏陈蔚文杨小蓉
- 关键词：唾液Α淀粉酶PH值柠檬酸性别
- 3种方法对酸刺激前后唾液淀粉酶活性及其活性比值检测的影响被引量：3
- 2015年
- 目的比较碘-淀粉法、Bernfeld法和EPS-G7速率法3种方法检测酸刺激前后唾液淀粉酶(sAA)活性及其活性比值的差异,探讨3种方法检测sAA活性之间的相关性。方法采集5例健康志愿者柠檬酸刺激前后的唾液标本各5份,分别用3种方法3次重复检测每份唾液标本的sAA活性,计算sAA活性及其活性比值的变异系数,并对3种方法检测的sAA活性的相关性进行分析。结果 3种方法检测的sAA活性及其总变异系数差异有统计学意义(P<0.05),其中以EPS-G7速率法检测sAA活性和总变异系数最小;3种方法检测的sAA活性比值及其比值的变异系数差异无统计学意义(P>0.05);3种方法中的任意2种方法检测的sAA活性都有显著相关(P<0.05),相关系数都在0.96以上。结论 3种方法检测的sAA活性可以通过回归方程进行相互转换,检测精度以EPS-G7速率法的最高,而且sAA活性比值的数据处理方式可以减少3种方法之间变异系数的差异。
- 杨泽民林静杨小蓉陈龙辉陈蔚文
- 关键词：速率法唾液淀粉酶
- P糖蛋白表达及MDR-1基因G2677T/A多态性与急性冠状动脉综合征患者相关性研究被引量：1
- 2015年
- 目的通过检测临床长期服用氯吡格雷的急性冠状动脉综合征(ACS)患者淋巴细胞上多耐药基因1(MDR-1)G2677T/A多态性及表达的P糖蛋白(P-gp),探讨P-gp表达和G2677T/A多态性与ACS之间的相关性。方法运用RT-PCR及测序法检测服用氯吡格雷1年以上的ACS患者(53例)淋巴细胞上G2677T/A表达,采用流式细胞计数(FCM)检测P-gp表达。选取31例健康体检者作为对照组。结果 1病例组G2677T/A阳性率(58.5%)高于健康对照组(3.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。2病例组G2677T/A多态性G/G型、T/T型和A/A型的表达率分别为67.7%、22.6%、9.7%,对照组分别为71.4%、14.3%和14.3%;两组各基因型的表达率相比差异均无统计学意义(P>0.05)。3G2677T/A各基因型P-gp表达:T/T型P-gp值为0.240±0.182,A/A型为0.181±0.135,G/G型为0.165±0.142,阴性为0.151±0.126;T/T基因型与阴性相比差异有统计学意义(P<0.05),其余各型与阴性相比差异无统计学意义(P>0.05)。4各基因型的优势比(OR):G/G型为0.317,T/T型为0.408,A/A型为0.029。结论 G2677T/A多态性与长期服用氯吡格雷的ACS或PCI患者多药耐药有一定相关性,G/G基因型P-gp表达量最低,可能为一具有保护性的基因型。
- 杨小蓉李国标李博维丁彩屏
- 关键词：MDR-1P-GP
- 基因HLA-DR13表达及BCP突变与HBV感染后临床转归的相关性研究被引量：3
- 2014年
- 目的探讨宿主基因HLA-DR13、T细胞亚群及病毒基因BCP(基本核心启动子)A1762T/G1764A突变与乙型肝炎病毒感染后临床转归的关系。方法实时荧光定量PCR检测急性肝炎、慢性肝炎、携带者、肝硬化、肝癌及自动清除(对照)组血液中的HBV-DNA及白细胞HLA-DR13基因水平,流式细胞仪检测T淋巴细胞CD4+、CD8+表达,测序法检测样本BCP变异,ELISA方法检测乙肝病毒e抗原并分析各因素对临床结局的影响。结果 HLA-DR13定量结果以自动清除组值最高,与急性组和肝癌组比较有显著性差别(P=0.027,0.049,P<0.05);CD4+及CD4+/CD8+百分率:肝硬化和肝癌组与对照相比有显著性差别(P=0.003,0.000,0.025,0.006,P<0.05),慢性组和携带组无显著性差别(P>0.05);CD8+百分率:肝癌组与其它5组比较均有显著性差别(P=0.013,0.012,0.024,0.010,0.009,P<0.05);BCP百分率:急性组和携带者组与其它3组相比较有显著性差别(χ2=36.117,P<0.05);HBV-DNA定量结果以急性肝炎组最高,肝硬化组最低,各组之间相比较有显著性差别(F=16.909,P=0.000,P<0.05);HBeAg阳性率:急性肝炎组与其它4组相比较有显著性差别(χ2=94.590,P<0.05)。结论 HLA-DR13基因表达水平与HBV感染后急性发病和肝癌结局呈负相关,BCP与急性发病及携带者结局呈正相关,联合检测宿主自身免疫因素与病毒因素有利于HBV患者的临床诊治。
- 杨小蓉刁蔚欣冯红梅卢景辉
- 关键词：乙型肝炎病毒感染T淋巴细胞免疫临床转归
- 家蝇抗菌肽diptericin基因的组织表达研究被引量：2
- 2012年
- 目的运用原位杂交方法检测家蝇抗菌肽基因dipericin组织表达模式。方法基于前期实时荧光定量PCR的结果 ,选取病原诱导12 h后的家蝇三龄幼虫,提取其RNA,克隆出dipericin保守序列,应用地高辛标记的diptericin基因反义RNA探针,对经多重耐药的大肠杆菌和耐甲氧西林葡萄球菌混合液刺激前后的家蝇幼虫组织切片进行组织原位杂交。结果 diptericin基因在诱导和未诱导家蝇幼虫的体壁和肌肉均未表达,在诱导后的脂肪体及中肠有高表达,在未诱导的家蝇幼虫部分组织内也有检测到阳性信号,如气管有很弱的表达,而马氏管则诱导与未诱导均有表达。结论家蝇抗菌肽基因diptericin在家蝇抵御外界微生物感染免疫防御中,有着极其重要的作用。
- 杨小蓉金小宝朱家勇
- 关键词：家蝇原位杂交技术
- 贝类GⅠ型扎幌样病毒荧光定量PCR检测
- 2009年
- 目的建立贝类中GⅠ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法。方法通过用聚乙二醇6000（PEG6000）对贝类中扎幌样病毒进行浓缩,用序列比对软件设计出针对GⅠ型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GⅠ型扎幌样病毒荧光定量PCR检测方法。结果浓度为10^6-10^4,10^3,10^2-10^1拷贝/μL的GⅠ扎幌样病毒检出率分别为3/3,1/3,0/3,因此,常规逆转聚合酶链反应（RT-PCR）最低检出限为10^3拷贝/μL。此荧光定量PCR方法对贝类中GⅠ型扎幌样病毒检测高度特异,最低检出限可达10^2拷贝/μL,比常规RT-PCR的低1个数量级,即灵敏度高10倍,线性范围为10^2-10^6拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.998 8。结论本研究建立了GⅠ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法,可用于贝类中GⅠ型扎幌样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测。
- 曾爱华梅寒芳杨小蓉金小宝朱家勇
- 关键词：贝类荧光定量PCR
- P-gp表达和MDR-1基因C3435T多态性与急性冠状动脉综合征相关性研究被引量：2
- 2015年
- 目的通过检测临床急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)行经皮冠脉介入手术(percutaneous coronary intervention,PCI)后服用氯吡格雷1年后患者淋巴细胞上P糖蛋白(P-gp)的表达及多耐药基因(Mulitidrug resistance,MDR-1)C3435T的多态性,探讨P-gp表达和C3435T多态性与ACS之间的相关性。方法采用流式细胞计数(FCM)检测53例ACS患者淋巴细胞上P-gp表达,运用RTPCR及测序法检测C3435T多态性。选用31例健康体检者作为对照组。结果 (1)P-gp结果:病例组=(21.03±8.04)%,对照组=(9.76±3.35)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)C3435T阳性率:病例组50.9%,对照组41.9%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)基因型结果:C/C型对照组61.1%,病例组51.9%;T/C型病例组25.9%,对照组16.7%;T/T型两组均为22.2%,病例组与对照组3种基因型率值比较差异均无统计学意义(P>0.05);两组分别组内比较,C/C型与其他2种T/C及T/T型分别相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)C3435T各基因型P-gp表达:C/C型病例组(13.66±1.4)%,对照组(10.92±2)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);T/C型病例组(32.62±2.8)%,对照组(10.32±2)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);T/T型病例组(15.20±7)%,对照组(10.42±1)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)正常人淋巴细胞中有低水平的P-gp表达,长期服用氯吡格雷后的ACS患者P-gp高于健康对照组。(2)C3435T基因多态性频率与ACS无相关关系。(3)C3435T多态性中的T/C基因型P-gp表达可能与临床ACS患者氯吡格雷耐药有相关性,并参与了耐药机制的形成。
- 杨小蓉李国标李博维丁彩屏
- 关键词：急性冠状动脉综合征P糖蛋白
- 牛白藤抗炎镇痛作用有效部位的筛选被引量：12
- 2012年
- 目的比较研究牛白藤的不同溶剂提取物的抗炎镇痛作用,为牛白藤的临床应用以及筛选分离活性成分提供实验依据。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和醋酸致小鼠毛细血管通透模型评价药物的抗炎作用,采用小鼠热刺激致痛和醋酸扭体模型评价镇痛作用,比较牛白藤水提物、醇提物及不同溶剂萃取物的抗炎镇痛作用。结果牛白藤水提物、醇提物均具有抗炎镇痛作用,同剂量之间比较以醇提物活性较强;牛白藤石油醚、乙酸乙酯萃取物能明显减轻二甲苯诱导的小鼠耳肿胀程度,抑制热刺激和醋酸引起的小鼠疼痛反应。结论牛白藤具有明显的抗炎镇痛活性,石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物可能是其主要有效部位。
- 陈艳芬陶曙红余结贞杨超燕杨小蓉陈水卿
- 关键词：牛白藤抗炎镇痛
- 重组融合蛋白Trx-IFN-CSP复性工艺研究被引量：4
- 2016年
- 旨在建立并优化融合蛋白Trx-IFN-CSP的复性工艺。对重组融合Trx-IFN-CSP进行体外复性研究,考查p H、温度、蛋白浓度、氧化还原体系及辅助复性小分子等复性条件对融合蛋白重折叠的影响。结果显示,适合Trx-IFN-CSP复性的方法为,反复冻融联合超声破菌获得包涵体;用含有1%Triton X-100、2 mol/L尿素、2%DOC洗涤液初步纯化包涵体;再用6 mol/L盐酸胍溶解液变性包涵体;脉冲加样稀释变性液后4℃条件下梯度透析复性,使用L-Arg辅助复性。经肠激酶切去Trx标签后,每升发酵液最终获得110-130 mg肝靶向干扰素,每批蛋白纯度都在95%以上,比活性在1.9-2.4×108 U/mg之间,制备工艺稳定。
- 黄演婷卢雪梅杨小蓉金小宝朱家勇
- 关键词：包涵体
