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杨云锋: 作品数：15 被引量：38H指数：2; 供职机构：中国医科大学附属第四医院更多>>; 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金博士科研启动基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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重组人纤维连接蛋白诱导的CIK细胞的生物学特性和对肺癌细胞株杀伤活性的体外研究被引量：28: 2010年; 背景与目的CIK细胞是过继免疫治疗的重要手段之一,简化体外培养过程从而提高其增殖率和杀瘤活性仍是目前研究的一个热点课题。本研究观察重组人纤维连接蛋白(recombinant human fibronectin,RN)诱导CIK细胞的生物学特性,建立一种高效、简便的体外CIK细胞扩增方法。方法抽取10名健康人外周静脉血各50mL,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,分别采用RN诱导法和传统方法培养CIK细胞,记录细胞增殖数;用流式细胞术测定免疫细胞表型和分泌IFN-γ、IL-4、穿孔素和颗粒酶B细胞的百分比;用MTT法测定CIK细胞对4种人肺癌细胞株的体外杀伤率。结果RN诱导的CIK细胞扩增倍数为传统方法的2.0倍-3.5倍,具有统计学差异(P<0.05);RN诱导组和传统方法组CD3+CD16+CD56+细胞绝对数分别增加了3778倍和2069倍;RN诱导组细胞中CD3+CD8+细胞比例明显高于传统方法组(P<0.05);但CD3+CD4+细胞比例无统计学差异(P>0.05);对4种肺癌细胞株的体外杀伤活性无统计学差异(P>0.05)。RN诱导的CIK较诱导前:分泌IFN-γ的细胞比例明显增加;分泌IL-4的细胞比例略有降低;释放穿孔素、颗粒酶B的阳性细胞比例较诱导前增加。结论RN诱导法是一种高效、简便的体外扩增CIK方法,可以替代传统方法。; 王士勇杜微丽张晖乌兰图雅张远何英杨云锋刘飒张哲王佳玲; 关键词：纤维连接蛋白

十字孢碱促进多柔比星诱导的多药抗药性肿瘤细胞系的凋亡: 2007年; 目的明确蛋白激酶 C(PKC)活性的抑制是否能促进化疗药物诱导的多药抗药肿瘤细胞系的凋亡。方法选用口腔鳞癌细胞 KB/S 及其多药抗药株 KB/VCR,常规细胞培养,比较在单独或联合 PKC 抑制剂十字孢碱的情况下,多柔比星(ADM)诱导这2种细胞的凋亡情况。凋亡采用流式细胞术和吖啶橙荧光染色检测,并经电子显微镜观察证实。结果 ADM 0.04μg/ml,作用36h 有96.68%KB/S 细胞凋亡,作用48h 有64.99%的 KB/VCR 细胞凋亡;将 ADM 质量浓度增加到0.4μg/ml 和2.0μg/ml 时,KB/VCR 细胞凋亡比例分别为69.74%和37.18%;合用十字孢碱后,凋亡细胞比例分别增加到82.58%和47.65%,经统计学处理,前者 X^2=4.5,P<0.05;后者 X^2=2.2,P>0.05。这些结果均经电镜和吖啶橙染色证实。结论耐受凋亡可能是肿瘤细胞多药抗药的机制之一,而 PKC 抑制剂可解除这种耐受。; 王士勇杜微丽杨振君于环杨云锋张辉; 关键词：蛋白激酶酶抑制剂; 全文增补中

重组人血管内皮抑素联合顺铂治疗小鼠肺转移癌实验研究: 王士勇武秀艳杨云锋张远杜微丽张晖刘飒张哲何英王佳玲

重组人血管内皮抑素联合顺铂治疗小鼠肺转移癌实验研究被引量：2: 2011年; 目的:探讨重组人血管内皮抑素(恩度)联合顺铂抑制小鼠肺转移癌的作用和机制。方法:取H22肝癌细胞株腹水瘤反复从小鼠尾静脉注入,建立高肺转移小鼠模型,随机分为4组:生理盐水、顺铂、恩度和顺铂与恩度联合治疗组,10只/组。从尾静脉接种后第7天腹腔内给药,1次/d,连用14 d,第21天处死,解剖出小鼠肺脏,称质量,计数肺转移结节数,并对肺转移瘤组织进行免疫组化染色,检测血管内皮生长因子(VEGF)表达,计数微血管密度。结果:生理盐水组、恩度组、顺铂组和联合治疗组肺转移率分别为100%、70%、60%和40%,肺转移结节数分别为(28.6±10.2)、(20.7±5.6)、(14.3±6.4)和(8.9±3.8)个,微血管密度计数为(31.4±3.1)、(24.6±5.9)、(21.2±4.7)和(15.2±3.1),各治疗组结果与生理盐水组比较差异均有统计学意义(P<0.05),联合组与顺铂组或恩度组比较也具有差异(P<0.05)。生理盐水组肺转移瘤组织的VEGF表达明显高于各治疗组(P<0.05)。结论:恩度单用或联合顺铂均能显著抑制H22肝癌肺转移组织的血管生成,降低了肺转移。; 杨云锋王士勇张远杜微利张晖何英武秀艳; 关键词：重组人血管内皮抑素肺转移微血管密度

肝癌移植瘤小鼠髓样抑制细胞比例变化及亚砷酸的调节作用: 张远武秀艳王士勇杨云锋杜微丽张晖刘飒张哲何英王佳玲

纤维连接蛋白诱导的CIK细胞的生物学特性和杀瘤活性的实验研究: 目的比较重组人纤维连接蛋白(RetroNectin,RN)和传统方法诱导的CIK细胞的生物学特性的差异,以期建立一种高效、简便的体外扩增CIK细胞的方法。方法抽取10名健康人外周静脉血各50毫升,用淋巴细胞分离液提取外周...; 杜微丽王佳玲王士勇乌兰图雅张远何英杨云锋张晖刘飒张哲; 关键词：纤维连接蛋白

肝癌移植瘤小鼠髓样抑制细胞比例变化及亚砷酸的调节作用被引量：2: 2010年; 目的:探讨髓样抑制细胞(MDSCs)与肿瘤发生、发展的相关性,寻找抑制肿瘤生长的方法。方法:建立H_(22)肝癌细胞昆明鼠皮下移植瘤模型,用共聚焦显微镜观察MDSCs形态;应用流式细胞仪检测外周血及脾脏中MDSCs数量在肿瘤生长过程中的变化趋势;给予As_2O_3药物干预,即随机分为对照组、As_2O_3低剂量组(2mg/kg)、As_2O_3高剂量组(4mg/kg);每周腹腔给药2次,重复上述测量,统计学分析组间差异;体外细胞培养观察As_2O_3对小鼠MDSCs数量的直接影响。结果:皮下接种肿瘤细胞株后,瘤重逐渐增加,第25天增加至5.67g,外周血和脾脏MDSCs比例也逐渐增加,分别达20.46%和9.50%;对瘤重与外周血和脾脏MDSCs比例的变化趋势进行相关性分析,相关系数r值分别为0.95和0.96(t=5.270、5.939,P<0.05),两者明显呈正相关关系。当用As_2O_3药物干预时,外周血低剂量组和高剂量组MDSCs比例在第28天上升至11.31%和10.00%,明显低于阴性对照组(t=3.193、5.486,P<0.05),且高剂量组MDSCs比例明显低于低剂量组(t=3.066,P<0.05);脾脏低剂量组和高剂量组MDSCs比例在第28天上升至10.90%和9.04%,明显低于阴性对照组(t=3.586、5.279,P<0.05),但高、低剂量组间差异无统计学意义(t=1.298,P>0.05)。体外实验中,在加入H_(22)肿瘤腹水上清后,培养液中MDSCs比例于第12天上升至12.67%;加入As_2O_3继续培养,MDSCs的比例于第18天下降至7.44%,分别与其前一时间点比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:荷H_(22)肝癌细胞小鼠体内MDSCs比例随着肿瘤负荷增大而增加,两者存在正相关性;As_2O_3可以降低MDSCs的比例,缓解肿瘤发生、发展。; 王士勇张远杨云锋杜微丽张晖刘飒张哲何英王佳玲武秀艳; 关键词：亚砷酸

超分子铂类药物西茜铂体内外对消化系肿瘤的抑制作用被引量：1: 2007年; 目的:评价超分子药物西茜铂实验性治疗消化系肿瘤的效果.方法:用细胞培养方法测定西茜铂和卡铂对肝癌(BEL7402),胰腺癌(BXCP-3,JF305),胃癌(MG803,SG7901)和结肠癌(CX-1)6株消化系癌细胞株和一株人胚胎肺成纤维细胞的半数抑制浓度(IC_(50)).建立肝癌H22昆明鼠模型和人胰腺癌JF305裸鼠模型,腹腔注射高(20 mg/ kg)、中(15 mg/kg)、低(10 mg/kg)剂量西茜铂,测定其在动物体内的抑瘤作用,注射葡萄糖注射液作为阴性对照,注射20 mg/kg卡铂作为阳性对照.HE染色判断肿瘤组织的坏死.CD34抗体免疫组化染色观察肿瘤组织中微血管的生长状况.结果:西茜铂对6株肿瘤细胞的IC_(50)值明显低于卡铂,约为后者1/3至1/2.但2种药物对人胚胎肺成纤维细胞的半数抑制浓度(IC_(50))均大于240 mg/L.在肝癌H22荷瘤昆明小鼠,腹腔注射高、中、低剂量西茜铂的抑瘤率分别为56.1%-67.0%,46.9%-54.8%和42.4%-44.3%,卡铂的抑瘤率是50.3%-51.3%.西茜铂和卡铂治疗组的瘤质量与葡萄糖组相比,明显降低(t>2.91,P<0.01).20 mg/kg西茜铂的抑瘤率高于相同剂量卡铂的抑瘤率,瘤质量均值也明显轻于卡铂组(t=2.39,P<0.05).在接种人胰腺癌JF305裸鼠,高、中、低剂量西茜铂组的抑瘤率分别为61.4%-73.4%,51.4%-54.0%和17.6%-22.6%,卡铂的抑瘤率是37.1%-42.0%.中、高剂量的抑瘤率明显高于卡铂组,瘤质量明显低于葡萄糖组和卡铂组(t>2.28,P<0.05).经HE染色后,在接种人胰腺癌JF305裸鼠,西茜铂治疗组的瘤组织见大片出血性坏死.CD34抗体免疫组化染色在葡萄糖组可见有大量的微血管形成,而西茜铂治疗组仅有少数微血管生成,微血管生成受到抑制.结论:超分子药物西茜铂对消化系统肿瘤有明显的抑制作用,其作用明显高于卡铂.; 王士勇杨振君于环杨云锋张晖王敬尊; 关键词：肿瘤卡铂

超分子铂类药物西茜铂注射剂的一般药理学研究: 2008年; 目的研究西茜铂(CCP)注射剂对大鼠心血管、呼吸及神经、精神系统等的影响.方法用10%水合氯醛4.0 ml/kg腹腔注射麻醉大鼠后,单侧股静脉插管注射CCP 10、20、40 mg/kg,并通过单侧颈动脉插管和气管插管用多导生理仪记录麻醉大鼠心率、血压、心电图、呼吸频率和深度等变化以及对清醒大鼠神经、精神等的影响,并以葡萄糖注射液作为阴性对照,15 mg/kg卡铂(CBP)作为阳性对照.结果静脉注射上述剂量CCP、葡萄糖注射液及CBP后,实验动物的血压为(57.8±14.1)～(86.2±8.1)mmHg(1 mm Hg=0.133 kPa)、心率为(250.9±95.4)～(356.7±47.7)次/min、呼吸频率为(59.3±17.7)～(95.7±26.0)次/min;各组间、各组内给药前后不同时间比较,实验动物的平均血压、心率和呼吸频率,差异无统计学意义(t=0.02～1.96,P＞0.05).各CCP组及CBP阳性对照组在用药后早期各出现1例偶发的一过性室性期前收缩,无剂量依赖性;40 mg/kg CCP尾静脉注射对清醒大鼠精神、神经系统与活动状况等各项指标无明显影响.结论 CCP注射剂对大鼠心血管、呼吸及神经、精神系统等无明显影响.; 王士勇杨振君于环杨云锋宋利杜微丽; 关键词：铂化合物药理学

肝癌移植瘤小鼠髓样抑制细胞比例变化及亚砷酸的调节作用: 目的探讨髓样抑制细胞(MSCs)与肿瘤发生、发展的相关性,寻找抑制肿瘤生长的方法。方法建立H22肝癌细胞昆明鼠皮下移植瘤模型,共聚焦显微镜成像来观察MSCs形态;应用流式细胞仪测量外周血及脾脏中MSCs数量变化趋势;给予...; 张远武秀艳王士勇杨云锋杜微丽张晖刘飒张哲何英王佳玲

杨云锋

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