杜宇
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- 去分化重编排脂肪干细胞在张应力刺激下成骨分化的研究
- 2013年
- 目的探讨去分化重编排脂肪干细胞在张应力刺激下的成骨分化并探讨其分子机制。方法分离人脂肪干细胞（hASCs），取第3代hASCs进行去分化重编排并标记为去分化重编排脂肪干细胞（De—hASCs）。张应力刺激条件下，将De．hASCs和hASCs在成骨诱导液中培养1周。并于培养4d和7d后检测碱性磷酸酶（ALP）活性，Runx2的mRNA和蛋白表达水平，骨形态发生蛋白（BMP）-2和基质金属蛋白酶（MMP）-3的mRNA表达水平。结果张应力刺激4d后，De—hASCs组的ALP活性高于hASCs组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。张应力刺激7d后，De—hASCs组ALP活性高于hASCs组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。张应力刺激4d和7d后，De—hASCs组Runx2的mRNA和蛋白表达水平均明显高于hASCs组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。张应力刺激4d和7d后，De—hASCs组BMP-2和MMP-3的mRNA表达水平均明显高于hASCs组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论张应力刺激条件下，去分化重编排脂肪干细胞具有更强的成骨分化能力，且与其上调BMP-2和MMP-3基因表达相关。
- 叶亚平胡伟华杜宇吴颖星杨开祥郭风劲
- 关键词：成骨分化脂肪干细胞
- 损伤控制性手术在边界型严重多发性骨折治疗中的应用被引量：14
- 2012年
- 目的探讨损伤控制性手术在边界型严重多发性骨折治疗中的疗效。方法选择2009年1月-2010年6月应用外科手术救治的严重多发性骨折37例患者（ISS16～42分，Pape分型为边界型）。全部患者按损伤控制原则实施分期手术治疗，第一阶段予以止血、清创和骨折的临时固定，第二阶段主要为抗休克、抗凝血功能异常、抗低温和抗感染等治疗，在生理情况允许后再尽早行第三阶段的骨折确定性手术。结果所有患者经第一和第二阶段治疗后均实现了有效的清创、固定和抗休克治疗，未发生医源性二次损伤。确定性手术后患者恢复良好，术后随访6—14个月，总致残率为16％。结论采用损伤控制理念分期手术治疗边界型严重多发性骨折安全有效。
- 宫晨林阳李昆朋杜宇卞峰郭风劲
- 关键词：骨折多处创伤
- 动态压应力促进软骨前体干细胞Sox9和细胞外基质表达的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的：研究间断性动态压应力对体外培养的大鼠软骨前体干细胞Sox9及软骨特异性细胞外基质表达的影响。方法细胞免疫磁珠分选并体外培养大鼠软骨前体干细胞（PSC），使用自行设计制备的细胞压力装置对细胞进行间断性（1 d刺激12 h，分别1 d，3 d和7 d）的压应力刺激（90 mmHg，1 mmHg=0.133 kPa），未刺激组为对照组，采用荧光实时定量聚合酶链反应检测各组细胞的Sox9和软骨特异性细胞外基质（Ⅱ型胶原）的基因表达情况，Western印迹检测细胞Sox9和Ⅱ型胶原蛋白表达水平并进行分析。结果在动态压应力刺激下，软骨前体干细胞各时间点Sox9和Ⅱ型胶原的基因表达水平明显增加并高于对照组（P〈0.05）；压力刺激1 d，3 d和7 d后，于对照组相比，其Sox9和Ⅱ型胶原mRNA表达水平分别增加了约1.9倍和2.1倍，3.5倍和3.4倍以及4.6倍和4.3倍。1 d压力组Sox9和Ⅱ型胶原蛋白表达与对照组无明显差异（P〉0.05），3 d和7 d时间点的蛋白表达增加并高于对照组（P〈0.05）；Sox9和Ⅱ型胶原基因和蛋白表达水平都随着压应力刺激时间增加而增加。结论间断性动态压应力可以明显增加大鼠软骨前体干细胞Sox9和Ⅱ型胶原的表达，并可能会促进软骨前体干细胞向软骨细胞的分化。
- 李昆朋张雯李忠马金柱祁军杜宇郭风劲
- 关键词：细胞外基质干细胞
- 波长620nm红光促进前软骨干细胞向软骨细胞分化的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨620nm波长红光在诱导前软骨干细胞（PSCs）向软骨细胞分化中的作用。方法使用细胞免疫磁珠分选大鼠PSCs并体外培养，使用发光二极管（LED）发出的620nm波长红光，分别予以不同能量照射细胞，使用阿利新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色观察软骨特异性细胞外基质（Ⅱ型胶原和蛋白聚糖）表达情况，光镜下观察细胞形态改变。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术分别检测各组细胞的Sox9和Ⅱ型胶原mRNA表达并进行半定量分析。结果PSCs经过软骨诱导和红光照射14d后，细胞形态由梭形变为多角形和类圆形，阿利新蓝和Ⅱ型胶原免疫组化染色均呈阳性反应，单纯诱导组呈弱阳性而对照组呈阴性；RT—PCR结果显示红光诱导的各组细胞Sox9和Ⅱ型胶原mRNA表达均明显增加，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05），0．5J／cm2组、1J／cm2组和2J／cm2组组间差异具有统计学意义（P〈0．05），但4J／cm2组和2J／cm2组组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论低能量620nm红光照射对诱导PSCs向软骨细胞分化有明显的促进作用。
- 李昆朋许涛杜宇宫晨彭飞陈安民郭风劲
- 关键词：软骨细胞细胞分化前软骨干细胞
- 周期性单轴牵张力对前软骨干细胞增殖影响的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察周期性单轴牵张力对前软骨干细胞增殖能力的影响。方法免疫磁珠分选新生大鼠前软骨干细胞(precartilaginous stem cells,PSCs),取生长良好的第三代PSCs,通过四点弯曲细胞加压装置对细胞加载不同的机械牵张力(2 000、4 000μstrain),并在不同时间点(1、2、4和8 h)收集细胞,采用流式细胞仪检测应力刺激后PSCs的细胞周期及增殖指数的变化,揭示不同的牵张力在不同的时间点对PSCs增殖活性的影响。结果周期性单轴牵张力能影响大鼠PSCs的增殖活性。2 000μstrain机械牵张力组与对照组相比,增殖指数升高(P<0.05),促进细胞增殖,并且S期DNA合成率增多(P<0.05);而4 000μstrain机械牵张力组与对照组比较,增殖指数降低,抑制细胞增殖(P<0.05),同时S期细胞DNA合成率减少(P<0.05)。结论适宜的机械牵张力能促进PSCs增殖,过大的机械牵张力反而抑制细胞增殖。
- 杨开祥吴颖星杜宇刘芳娜郭风劲
- 关键词：软骨细胞干细胞
- 脂肪细胞条件培养基对成骨前体细胞成骨分化能力的影响
- 2012年
- 目的探讨脂肪细胞条件培养基对成骨前体细胞(MC3T3-E1)成骨方向分化能力的影响。方法制备脂肪细胞条件培养基(FCCM)培养3T3-E1,设常规培养液为对照培养基组(CM)。分别在培养7、14d后行Real-time PCR和West-ern-blot检测成骨相关转录因子Runx2(Runt-related transcription factor 2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(bone gamma-carbox-yglutamic-acid-containing protein,BGP),并在第14天时行ALP活性检测、ALP染色和茜素红染色。结果 FCCM组较对照组的3T3-E1的Runx2、ALP、BGP基因下调;同时Runx2、ALP、BGP蛋白水平下调;且FCCM组较对照组ALP活性降低,ALP染色和茜素红染色结果均为FCCM组为阴性,对照组阳性。结论 FCCM可下调成骨前体细胞成骨方向分化能力。
- 杜宇郭风劲徐飞宫晨叶亚平董永辉许涛
- 关键词：成骨细胞细胞分化
- 高糖对原代成骨细胞增殖分化的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察不同浓度葡萄糖对原代成骨细胞增殖和细胞分化的影响。方法取新生小鼠颅骨进行原代培养。经碱性磷酸酶染色和VonKossa染色检测鉴定为成骨细胞。用不同浓度葡萄糖（5．5、15．5、25．5mmol／L）培养基培养细胞，观察不同葡萄糖浓度下成骨细胞的细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）染色，Real—timePCR检测转录因子Runx2、成骨标志物ALP、骨钙素基因的表达。结果随着葡萄糖浓度的升高成骨细胞的增殖能力逐渐减弱。培养7d，与5．5mmol／L正常糖组相比，15．5mmol／L组和25．5mmol／L组ALP染色颜色逐渐变浅。PCR结果显示Runx2 mRNA表达分别下降了（36．7±6．2）％和（38．3±2．2）％，骨钙素mRNA表达分别下降了（26．7±7．2）％和（40．4±4．3）％；ALPmRNA在15．5mmol／L组下降了（33．3±10．2）％，在25．5mmol／L组增高了（50．8±10．4）％（均P〈0．05）。结论高糖能抑制成骨细胞的增殖，抑制其向成熟成骨细胞分化，这可能是糖尿病性骨质疏松的机制之一。
- 董永辉徐飞郭风劲陈安民杜宇黄仕龙
- 关键词：葡萄糖成骨细胞细胞增殖细胞分化
