李金鑫
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省高校科技创新团队支持计划河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- N离子束注入与DES复合诱变选育腺苷高产菌株被引量：5
- 2017年
- 为了获得腺苷高产菌株,以肌苷产生菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HSD1206(Ade-、Thi-、SGr)为出发菌株,通过硫酸二乙酯(DES)处理、N离子束注入进行单因子和复合诱变。参照菌种致死率曲线,确定N离子束注入250 s与DES处理10 min为最佳诱变时间。经过多轮诱变和筛选,获得了黄嘌呤、硫胺素、组氨酸三重缺陷型,腺嘌呤脱氨酶活性缺失及磺胺胍抗性菌株DI4-24和DI4-182,其遗传标记为Xan-、Thi-、His-、Deam-、SGr,连续传代后性状稳定,在优化的发酵培养基中发酵后腺苷产量可分别达到18.56 g/L和17.13 g/L。由此证明,通过物理、化学复合诱变,阻断枯草芽孢杆菌营养缺陷型菌株产肌苷途径,打通合成腺苷途径的诱变思路在实验室环境下是可行的。
- 刘国生李金鑫刘磊谷艳昌许航
- 关键词：腺苷离子束注入硫酸二乙酯复合诱变
- 腺苷高产菌株Bacillus subtilis DI4-24退化的遗传机制与控制研究被引量：3
- 2017年
- 经人工诱变获得的腺苷高产菌株Bacillus subtilis DI4-24很容易发生退化,通过分析回变菌株的遗传性状和考察理化条件对回复突变的影响,研究退化的机制,找到控制的方法。在选择培养基上筛选回变菌株,生长谱法分析其遗传型;于743 nm条件下分光光度法测定回复突变细胞内积累的特有红色物质,研究各理化条件对回复突变的影响。退化原因是由于组氨酸缺陷型发生回复突变所致,突变菌株腺苷产量大幅度下降;降低保藏温度、减少传代次数可以有效地减缓菌种的衰退;种子制备过程中适当降低培养温度2℃~3℃、缩短培养时间(8 h)、降低培养基pH至中性偏酸性(6.5)以及加入胡萝卜素、叶酸等物质都可以有效降低回变率,在此条件下制备的种子生产性能得到提高,其腺苷产量可比对照提高9%。
- 任韶霞刘磊常利草李金鑫刘国生
- 关键词：腺苷菌种退化回复突变
- 埃希菌催化合成阿糖鸟苷中间体阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷被引量：2
- 2014年
- 利用埃希菌(Escherichia sp.)AEM0812细胞催化阿糖尿苷和2,6-二氨基嘌呤合成阿糖鸟苷中间体阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷。通过优化反应条件,得到最适酶促反应条件为:在60 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中加入15%埃希菌AEM0812细胞及60 mmol/L阿糖尿苷和60 mmol/L 2,6-二氨基嘌呤,60℃反应48 h。在上述条件下,阿糖尿苷的转化率可达95.2%。
- 曹倩杨灵刘国生李金鑫邢善涛
- 关键词：埃希菌生物合成
