李袁飞
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 人角化细胞生长因子-1的克隆及其在骨髓基质细胞中的表达
- 2010年
- 目的从人胚肺成纤维细胞中克隆人角化细胞生长因子-1(KGF-1)编码区序列,构建真核荧光表达载体。方法从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,通过反转录PCR获取KGF-1cDNA编码区序列,将其与pIRES2-EGFP质粒载体连接,构建重组表达载体pIRES2-EGFP/KGF-1,测序鉴定。将pIRES2-EGFP/KGF-1瞬时转染骨髓基质细胞(marrow stroma cells,MSCs)48h后,免疫荧光法检测骨髓基质细胞是否存在KGF-1蛋白的表达。结果构建的重组质粒pIRES2-EGFP/KGF-1经序列分析示与国外文献报道一致。KGF-1免疫荧光法激光共聚焦检测结果证实,pIRES2-EGFP/KGF-1转染骨髓基质细胞后,存在KGF-1蛋白的表达,定位于细胞浆内。结论成功构建重组真核荧光表达载体pIRES2-EGFP/KGF-1,初步探讨了该基因在骨髓基质细胞中的表达,为其在皮肤组织工程的运用奠定了基础。
- 朱国强李袁飞冯晋斌胡德华
- 关键词：肺成纤维细胞骨髓基质细胞
