李灵玲
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 抗凝、溶栓双功能水蛭素12肽-瑞替普酶融合蛋白的模拟、构建与表达被引量：9
- 2007年
- 将水蛭素12肽通过柔性肽(Gly)3与r-PA连接,以期望获得既具有抗凝活性,又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白质分子。采用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构与其活性区可以正常发挥功能。构建并表达了兼有溶栓和抗凝活性的瑞替普酶(r-PA)与水蛭素12肽双功能融合基因。通过两轮加端PCR获得水蛭素12肽与r-PA通过柔性肽(Gly)3连接得到的融合基因,再克隆到pET-21a载体上,经测序正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,融合蛋白约占菌体总蛋白的12%,以包涵体形式存在,经过体外复性后,融合蛋白的纤溶比活达到8 400.5 IU/mg,抗凝比活达到930.2 ATU/mg,具有较高的溶栓抗凝双功能活性。该双功能融合蛋白有望成为治疗血栓疾病的新型药物。
- 余蓉韦利军李灵玲高玲吴梧桐
- 关键词：瑞替普酶溶栓抗凝
- 合理的分子设计与工程化蛋白质药物被引量：2
- 2005年
- 治疗性蛋白的分子设计与工程化已取得突破进展,基因工程药物已进入了第三代蛋白质治疗药物发展新阶段。文章重点介绍了蛋白质工程技术在优化蛋白质的疗效、稳定性、靶向性、特异性以及改善免疫原性和药代动力学等方面的分子设计策略,并结合本实验室的研究工作介绍了新近研究成功的蛋白质工程药物类型。对近年来在蛋白质工程药物研究中,常采用的的一些新技术,新方法,如点突变技术、融合蛋白技术、DNA改组技术、分子定向进化技术和蛋白质分子展示技术也作了简要讨论,同时还展望了合理的分子设计与蛋白质工程药物的发展前景。
- 余蓉吴梧桐李灵玲
- 关键词：蛋白质工程定点突变定向进化
- 可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究
- ：制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶并对其部分酶学性质进行研究.方法：将木瓜蛋白酶偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上制备得到水溶性固定化木瓜蛋白酶.并测定游离和水溶性固定化木瓜蛋白酶最适作用pH值、最适作用温度、K...
- 李灵玲张涛余蓉
- 关键词：木瓜蛋白酶酶学性质
- 从日本根霉中提取壳聚糖的初步研究被引量：7
- 2004年
- 报道了一种从日本根酶中提取壳聚糖的简单方法。正交试验研究显示,以2%淀粉为碳源,1%蛋白胨为氮源,在起始pH5.0,26℃下培养60h时产量最高,菌丝体干重为8.43g/L。经NaOH间歇处理,HCl抽提,得到天然壳聚糖为895mg/L,壳聚糖产量占菌丝体干重的10.58%。产品壳聚糖纯度为90.5%。
- 张涛余蓉李灵玲
- 关键词：干重菌丝体壳聚糖氮源蛋白胨根霉
- 可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究被引量：10
- 2007年
- 目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质。方法将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性。结果最适作用pH分别为6.0、5.0,最适作用温度分别为60℃、70℃,Km值分别为2.53、3.07 mg.m l-1;可溶性固定化PP在60℃条件下,保温12 h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30 d后活性保留达90%以上;在pH6时稳定性最好,pH4-7范围内也较稳定(相对活性>80%)。结论可溶性固定化PP能够在大于pH5.5的溶液中完全溶解,最适作用pH范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热和酸碱的稳定性均明显增强。
- 李灵玲张涛余蓉
- 关键词：木瓜蛋白酶酶学性质偶联
- 溶栓和抗凝双重功效融合蛋白、制备方法及其应用
- 具有溶栓和抗凝双重功效的融合蛋白，以及编码该融合蛋白的DNA序列、含该DNA序列的载体、该融合蛋白的制备方法、该融合蛋白在制备具有溶栓和抗凝功效药物方面的应用和，由连续甘氨酸序列组成的肽段作为连接结构在制备溶栓和抗凝双重...
- 吴梧桐余蓉韦利军李灵玲高玲
- 文献传递
- 溶栓和抗凝双重功效融合蛋白、制备方法及其应用
- 具有溶栓和抗凝双重功效的融合蛋白，以及编码该融合蛋白的DNA序列、含该DNA序列的载体、该融合蛋白的制备方法、该融合蛋白在制备具有溶栓和抗凝功效药物方面的应用和由连续甘氨酸序列组成的肽段作为连接结构在制备溶栓和抗凝双重功...
- 吴梧桐余蓉韦利军李灵玲高玲
- 文献传递
