李淑芳 作品数:23 被引量:48 H指数:4 供职机构: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 公益性行业(农业)科研专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
鸡血清非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞的研究 2016年 为了验证鸡血清是否可以非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞,用鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗免疫鸡血清、SPF鸡血清和健康猪血清,参照中华人民共和国农业行业标准NY/T 538—2002《鸡传染性鼻炎诊断技术》,进行了1%戊二醛固定的鸡红细胞和1%新鲜鸡红细胞的凝集试验。结果表明:鸡血清可以非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞而不凝集1%新鲜鸡红细胞,说明鸡传染性鼻炎疫苗免疫鸡只的HI抗体只能作为免疫效果的参考值。 龚玉梅 张培君 王宏俊 贺云霞 李淑芳 侯婷关键词:鸡传染性鼻炎 鸡血清 戊二醛 鸡红细胞 副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白研究进展 被引量:3 2012年 副猪嗜血杆菌是猪革拉泽氏病的病原体,该病是近年来严重危害养猪业的细菌性传染病之一,呈世界性分布。副猪嗜血杆菌相关致病性毒力因子的研究目前很少,关于转铁结合蛋白更是鲜为人知。在此对副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白的结构、形成机制、影响因素及其免疫原性进行综述,对阐明致病菌的慢性感染机理有一定的生物学意义。 李淑芳 张培君 龚玉梅 侯娜 赵兴绪 贺云霞关键词:副猪嗜血杆菌 副猪嗜血杆菌HigB和HigA基因的原核表达及功能分析 2016年 副猪嗜血杆菌属于条件性致病菌,可引起猪的格拉泽病,表现为多发性浆膜炎和关节炎。毒素抗毒素系统(TA)广泛存在于细菌中,其参与各种应激状态下的生理调节,利于机体适应复杂环境。克隆编码副猪嗜血杆菌的HigBA毒素抗毒素蛋白的基因,并对其进行原核表达和分析鉴定。结果发现,HigB对生长有抑制作用,而HigA可以中和这种作用,HigBA构成一对毒素抗毒素系统。HigB在高温和高密度时,表达量显著增加,显示其参与逆境环境下的生理调控。 徐玉智 李淑芳 张培君 龚玉梅 王宏俊关键词:副猪嗜血杆菌 实时荧光定量PCR 副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的表达及免疫效果研究 被引量:5 2016年 为研究副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的免疫原性,克隆了副鸡禽杆菌荚膜蛋白合成相关的编码基因gcbG,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-gcbG,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行诱导表达。结果表明,重组菌在28℃培养条件下经1mmol/L的IPTG诱导6h可分泌表达GcbG蛋白,且其表达量最高。Western-blot分析表明,所表达的蛋白能与副鸡禽杆菌阳性血清发生特异性免疫印迹反应,说明所表达的蛋白具有较好的反应原性。动物试验表明,所表达的蛋白能为鸡提供较好的保护力。上述试验结果为进一步研究荚膜蛋白的生物学特性及亚单位疫苗的开发奠定了基础。 赵成全 路明华 李淑芳 张培君 龚玉梅 王宏俊关键词:副鸡禽杆菌 原核表达 动物试验 副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立 被引量:2 2018年 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16SRNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP的特异性和灵敏性。结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60min,内引物1.60pmol/μL、外引物0.20pmol/μL。该LAMP对13株副鸡禽杆菌均发生了扩增反应,而对大肠埃希菌、禽多杀性巴氏杆菌、空肠弯曲杆菌等14株其他病原微生物没有扩增反应;该LAMP最低检出量为0.17pg/反应,敏感性远高于常规PCR的56pg/反应。结果表明,所建立的副鸡禽杆菌LAMP具有快速、高效、方便操作等特点,适用于基层兽医部门进行副鸡禽杆菌的快速检测。 梅晨 李淑芳 徐玉智 张培君 龚玉梅 王宏俊关键词:副鸡禽杆菌 RRNA 环介导等温扩增 副鸡禽杆菌的分离鉴定 被引量:7 2015年 副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum)是鸡传染性鼻炎的病原菌。早在1920年,Beach首先报道鸡传染性鼻炎,1932年De Blieck就首次分离到该菌,并将其命名为鸡嗜血红蛋白鼻炎芽孢杆菌,在后来的很长一段时间内都称之为副鸡嗜血杆菌。Blaclall于2005年又将其重新命名为副鸡禽杆菌^([1])。本病的发病特点是潜伏期短、传播迅速,短时间内便可波及全群。 李淑芳 龚玉梅 王宏俊 张培君关键词:育成鸡 血清型鉴定 革兰染色 细菌分离 副猪嗜血杆菌单因子血清的制备 被引量:1 2014年 利用副猪嗜血杆菌(Hps)的15个血清型的参考菌株分别制备相应的兔抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到15个血清型的单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型抗原发生反应。应用这15种单因子血清对临床分离到的9株副猪嗜血杆菌进行血清型的鉴定,结果表明,其中6株为5型,2株为4型,1株为7型。 路明华 王雪敏 李淑芳 路迎迎 张培君 龚玉梅 王宏俊关键词:副猪嗜血杆菌 绵羊卵母细胞核成熟、卵丘扩展与激素浓度关系的研究 被引量:2 2012年 为了研究绵羊卵母细胞核成熟、卵丘扩展与激素浓度的关系,利用不同激素浓度处理卵丘-卵母细胞复合体(COCs)并记录不同激素浓度处理下的卵母细胞核成熟率和卵丘扩展率.结果表明:E2可显著提高卵母细胞核成熟率(P<0.05),但并不影响卵丘扩展率;E2可显著提高卵丘扩展的卵母细胞成熟率(P<0.05),但不影响卵丘未扩展的卵母细胞核成熟率;卵母细胞核成熟和卵丘扩展之间没有相互依赖的关系,但在一定激素浓度条件下卵母细胞核成熟率和卵丘扩展率成正比.E2对绵羊卵母细胞核成熟的调节作用可能不由卵丘细胞介导,而是直接作用于卵母细胞;绵羊卵丘扩展可能与卵丘细胞自回分泌的卵丘扩展因子有关;在激素浓度一定的条件下,绵羊卵丘扩展率可以作为卵母细胞核成熟率的判定标准. 林雍峰 赵兴绪 张勇 赵国顺 李淑芳关键词:绵羊 激素 副猪嗜血杆菌tbpB基因的PCR-RFLP分型 2013年 本研究应用生物学软件Vector NTI对副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)的转铁结合蛋白tbpB进行基因分型研究,通过选择AluⅠ、AvaⅡ和RsaⅠ3种限制性内切酶对15株Hps标准株和12株分离株的tbpB基因进行RFLP分析。经过生物学软件Vector NTI精确分型,标准株得到了11个基因型,其中基因型Ⅰ(AAA)包括血清型1、3和15,Ⅱ(BBB)包括血清型2、9和11;分离株的分型产生了10种基因型,其中6种为新的基因型。这一结果证实了Hps流行株的多样性,说明该方法对于猪革拉泽氏病流行病学规律的研究具有实用意义,同时,需要对更多的分离株做进一步的研究。 李淑芳 龚玉梅 侯娜 赵成全 赵兴绪 张培君关键词:副猪嗜血杆菌 白牦牛卵泡液蛋白质组2-DE图谱的构建 被引量:1 2013年 分别用10%、12%、14%的SDS-PAGE胶分离蛋白质,比较不同浓度胶对白牦牛卵泡液蛋白双向电泳分离效果的影响;分别用丙酮沉淀法、热的SDS法和直接溶解法制备样品,比较不同制备方法对白牦牛卵泡液蛋白双向电泳分离效果的影响。结果表明,不同浓度胶对蛋白分离效果影响较大;丙酮沉淀法、热的SDS法和直接溶解法获得的蛋白点数分别为364±36、290±19和374±30个。对于白牦牛卵泡液蛋白来说,将其直接溶解后,用12%的胶可以得到较理想的2-DE图谱。 赵国顺 陶金忠 张勇 王朝凤 马艳粉 李淑芳 赵兴绪关键词:双向电泳