李江丽
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
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- 秀丽线虫基因敲除突变库中sec-10突变种系的筛选
- 2010年
- 从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的基因突变库中筛选出目的基因的突变种系,并对其进行分子机制的研究,是研究不同基因及其蛋白产物作用机制的一项基本技术.以sec-10突变种系的成功筛选为例,详细描述如何通过PCR检测方法从笔者实验室所构建的国内第一个秀丽线虫基因敲除突变库(可进行多达几百次的筛选量)中筛选出目的基因的突变种系,同时证明突变库的可用性.根据sec-10基因序列设计多套针对不同靶点的含干扰引物的巢式引物,通过凝胶电泳正确判断扩增产物的特异性和干扰引物对长片段产物的抑制特性,以选择有效的检测引物.简化了线虫复苏后的饲养方法,以取代恒温恒湿培养箱的使用.通过纯和致死平衡子的引入,克服了sec-10基因突变致死所导致的无法稳定传代的问题.总结了从秀丽线虫基因突变库中筛选突变种系的注意要点,为国内其它线虫基因突变库的筛选提供重要的参考意见.
- 李江丽张蓉颖
- 关键词：秀丽隐杆线虫基因敲除PCR检测
- Sec-10影响神经肌肉接头突触后敏感性的研究(英文)被引量：3
- 2009年
- exocyst复合物在分泌过程中起重要作用.可是分子机理尚未研究透彻.通过TMP/UV的基因敲除方法,得到了exocyst复合物中一种组分sec-10的缺陷型线虫.药学结果显示这种线虫神经信号传递存在缺陷,可是电生理的方法证明在神经肌肉接头处的已报道离子型受体和野生型相比并未发生改变.因此猜测,sec-10并未直接影响神经肌肉接头处的离子型受体,而是通过其他途径来行使功能.
- 章雷李江丽高尚邦吴政星张蓉颖徐涛
- 关键词：神经肌肉接头
- PC12细胞中Synaptotagmin Ⅶ的沉默抑制了致密核心大囊泡的分泌
- 2009年
- Syt Ⅶ,因其具有比Syt Ⅰ和Syt Ⅸ更高的钙离子亲和力,以及在与脂质结合后表现出更慢的解离动力学过程,被认为在致密核心大囊泡分泌的慢速动力学过程中起着钙离子感受器的作用,而并不参与突触囊泡的快速分泌过程.然而迄今为止,Syt Ⅶ的亚细胞定位和其在胞内具体的生理学功能尚未完全清楚.在本研究中,我们首先应用全内反射荧光显微镜技术表明,在PC12细胞中Syt Ⅶ定位于致密核心囊泡.通过综合运用高时间分辨率的细胞膜电容测量和碳纤维微电极安培检测,确定了单独沉默内源性的Syt Ⅶ就可以明显减少PC12细胞中钙触发的致密核心囊泡和质膜的融合和抑制了融合孔的开放,特别是减少了致密核心大囊泡胞吐触发相的幅值,而对于其持续成分的速率则几乎没有影响.这些发现提示我们Syt Ⅶ在PC12细胞致密核心囊泡融合机制中作为钙感受器,对可释放致密核心大囊泡库的形成和维持起着非常重要的作用.
- 李江丽肖扬周围吴政星张蓉颖徐涛
- 关键词：SYNAPTOTAGMIN胞吐
- SEC-10在秀丽线虫胞吞途径中的功能研究
- 囊泡运输是细胞生命活动的基础，是各种生理活动正常运行的保障，与许多疾病的发生密切相关。根据目的地不同，囊泡运输可分为胞吐途径和胞吞途径，涉及到囊泡与胞内细胞器以及质膜的直接作用，为胞内复杂的分子网络所调控。当前对囊泡运输...
- 李江丽
- 关键词：秀丽线虫基因敲除囊泡运输
- SEC-10在秀丽线虫逆行行为中功能的研究
- 2010年
- 秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)是一种研究行为和神经系统相互关系的良好的模式生物,可以在实验条件下给予它物理、化学等多种外部刺激,也可以在分子水平改变其基因结构以改变线虫的行为方式,从而进一步研究神经系统中与行为相关的分子机制.以sec-10突变为遗传背景,采用一种秀丽线虫逆行行为的简单测定方式,研究发现sec-10突变导致线虫逆行动作增多,初步探讨了在突变体线虫的神经系统中重新表达野生型SEC-10可以回复该逆行行为缺陷.
- 李江丽张蓉颖
- 关键词：秀丽线虫
