李柳哲
- 作品数：19 被引量：142H指数：9
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫多价DNA疫苗的构建被引量：26
- 2001年
- 目的 构建日本血吸虫多价 DNA疫苗。 方法 在本室已构建的克隆载体 p Bluescript- Sj2 6、p Bluescript- Sj32及 p Bluescript- Sj2 3的基础上 ,根据 Sj2 6 k Da、Sj32 k Da和 Sj2 3k Da基因序列分别设计一对引物 ,且在引物中引入 1个含多肽接头甘氨酸 -甘氨酸 -丝氨酸 (G- G- S)的碱基序列。首先将 Sj2 3基因连接入载体 p BK中 ,构建重组质粒 p BK - Sj2 3,然后将 Sj2 6 k Da或 32 k Da基因分别连接入载体 p BK- Sj2 3中 ,构建成多价 DNA疫苗p BK- Sj2 6 - Sj2 3和 p BK- Sj32 - Sj2 3。对重组基因鉴定后 ,检测了质粒在小鼠肌肉中的表达情况。 结果 多价 DNA疫苗 p BK- Sj2 6 - Sj2 3和 p BK- Sj32 - Sj2 3转入了完整的 Sj2 6、Sj2 3和 Sj32基因。多价基因质粒能在小鼠肌肉组织中表达。结论 构建了日本血吸虫多价 DNA疫苗。
- 李柳哲石佑恩江侃
- 关键词：日本血吸虫SJ26SJ23SJ32多价DNA疫苗
- 日本血吸虫Sj23DNA突变体疫苗的构建与鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的对日本血吸虫Sj23DNA进行缺失突变,构建Sj23DNA突变体疫苗,为寻求更佳免疫效果的疫苗奠定基础。方法利用重叠PCR技术将Sj23DNA上与ME491同源的部分碱基缺失,获得Sj23DNA的突变体,将其克隆入真核表达载体pcDNA3的多克隆位点上,构建重组质粒pcD-NA3-Sj23突变体,进行酶切和测序鉴定,并用CLUSTALX和primerpremier软件将测序的结果与Sj23DNA序列进行分析。结果序列分析显示pcDNA3-Sj23突变体缺失序列与原设计一致,双酶切pcDNA3-Sj23突变体获得预期大小的DNA片段。结论成功构建了缺失与ME491同源部分碱基的质粒pcDNA3-Sj23突变体。
- 朱艳红韩庆霞任伟牛安欧李柳哲
- 关键词：日本血吸虫突变体
- 日本血吸虫表膜蛋白23kDa的DNA疫苗的研制及其诱导小鼠的保护性免疫被引量：29
- 1999年
- 目的研究日本血吸虫表膜蛋白23kDa的DNA疫苗及其诱导小鼠的保护性免疫作用。方法以已克隆的质粒pBluescript－Sj23为模板，设计2条引物，经PCR扩增的Sj23基因克隆于真核表达载体pCD中，重组质粒定位注入小鼠骨骼肌，共注射2次，间隔时间9d，第14d处死小鼠，取定位处肌组织，荧光标记检测抗体，证实肌细胞可表达抗原Sj23。大量提取亚克隆后的质粒pCD－Sj23。把雄性BALB／C小鼠分2组，实验组用剂量为100μg／只的质粒DNA（pCD－Sj23）于第1、4、6周免疫接种，第8周2组均以正常尾锄40±2条／只攻击感染，第14周剖杀小鼠。结果与对照组比较，实验组成虫减虫率、减卵率、每条雌虫减卵率分别为33．01％，49．59％，15．70％。结论Sj23有可能成为有价值的候选疫苗，DNA疫苗可作为一种免疫新途径加以研究。
- 李柳哲石佑恩
- 关键词：日本血吸虫膜蛋白DNA疫苗血吸虫病
- 日本血吸虫多价DNA疫苗pBK-Sj26 (Sj32)-Sj23免疫效果的观察被引量：29
- 2001年
- 为了观察血吸虫病多价 DNA疫苗的保护力 ,将小鼠分成 5组 :空白对照组、空质粒对照组、单价抗原 DNA疫苗 p BK- CMV- Sj2 3组、多价抗原 DNA疫苗 p BK- CMV- Sj2 6- Sj2 3和 p BK- CMV- Sj3 2 - Sj2 3组。大量提取各组质粒 DNA后 ,各组于 0、 3、 5周在 BAL B/c小鼠股四头肌注射相应质粒 DNA,9周用血吸虫尾蚴攻击感染 ,15周剖杀小鼠计算减虫率及减卵率。结果显示 :与对照组比较 ,实验组小鼠减虫率及减卵率有极显著性差异 ( P<0 .0 1) ;与单价 p BK- CMV-Sj2 3组比较 ,多价 DNA疫苗组的减虫率及减卵率有显著性差异。提示血吸虫多价 DNA疫苗诱导小鼠对血吸虫的保护力优于单价 DNA疫苗。
- 李柳哲石佑恩江侃宁长修邓伟文
- 关键词：日本血吸虫多价DNA疫苗免疫效果
- 血吸虫23kDa膜内在蛋白的研究现状被引量：2
- 1996年
- 血吸虫的23kDa抗原是一种膜内在蛋白。宿主针对此抗原能产生可识别的特异性抗体;23kDa抗原可诱导宿主保护性免疫的产生,为有价值的诊断抗原及候选疫苗。本文对23kDa蛋白的合成情况、表达阶段、结构特点、免疫学及分子生物学特征等方面作一概述。
- 李柳哲
- 关键词：血吸虫抗原免疫学
- 2型糖尿病并视网膜病变患者红细胞山梨醇含量及血浆内皮素水平的研究
- 1999年
- 刘江华李柳哲段世芳文格波
- 关键词：视网膜病变红细胞山梨醇内皮素
- 衡阳市孕妇弓形虫感染血清学（IHA）调查
- 1994年
- 衡阳市孕妇弓形虫感染血清学（ＩＨＡ）调查李柳哲，高隆声，廖力，张愉快，莫崇顺，唐雪英（寄生虫教研室）弓形虫病是弓形虫所致人兽共患病，人群感染相当普遍。它可通过孕妇的胎盘侵袭胎儿造成畸形、早产、流产及死胎，对优生优育危害性极大①②，故防治弓形虫病的重点...
- 李柳哲高隆声廖力张愉快莫崇顺唐雪英
- 关键词：弓形体病血清学
- 日本血吸虫表面膜抗原23kDa的亚克隆鉴定及表达被引量：2
- 1999年
- 在已克隆的质粒pBluescript-Sj23基础上，设计二条引物。小量提取质粒pBluescript－Sj23进行PCR扩增，经扩增的Sj23亚克隆于真核表达载体pCD中，重组质粒转化E．coliTG1。大量提取质粒pCD－Sj23，以剂量100μg／只给昆明小白鼠定位肌肉注射质粒pCD-Sj23，共注射2次，间隔时间为9天，每次注射前一天用0．5％盐酸布比卡因50μl／只预处理，第14天拉颈处死小鼠，定位处肌肉作冰冻切片，荧光标记抗体检测pCD-Sj23，见肌细胞胞浆及胞膜上有其抗原表达。
- 李柳哲石佑恩
- 关键词：日本血吸虫亚克隆
- 日本血吸虫核酸疫苗
- 一种血吸虫核酸疫苗，由真核表达载体pCD或pBK和血吸虫抗原基因组成，血吸虫抗原基因包括日本血吸虫抗原基因Sj－23、Sj－26和Sj－32，构成单价核酸疫苗pCD－Sj26、pCD－Sj32、pCD－Sj23和pBK－...
- 石佑恩李柳哲
- 文献传递
- 日本血吸虫Sj23DNA疫苗的增效研究被引量：6
- 2006年
- 目的探讨缺失肿瘤转移有关基因ME491同源序列的日本血吸虫Mr23000膜蛋白基因(Sj23DNA)突变体疫苗的免疫效果。方法将Sj23DNA中与人黑素瘤细胞膜上的ME491同源序列进行基因缺失突变,再将突变基因转染真核细胞人胚肾HEK293细胞,通过间接荧光抗体试验(IFAT)检测其表达情况。将pcDNA3-Sj23突变体经股四头肌注射免疫小鼠(100μg/只),免疫后4周取注射部位肌肉作冰冻切片,IFAT检测目的基因的表达。40只BALB/c小鼠随机分成4组(每组10只),分别经股四头肌注射pcDNA3-Sj23突变体、pcDNA3-Sj23、空白质粒pcDNA3(均100μg/只)和生理盐水(30μl/只)免疫1次。免疫后4周用尾蚴攻击感染(40±2条/只)。第42天剖杀,肠系膜静脉灌注法及挤压法计数成虫,取肝脏计算每克肝组织虫卵数(EPG)。以减虫率和减卵率评价其免疫保护力。结果pcDNA3-Sj23突变体疫苗可在真核细胞HEK293中瞬时表达。pcDNA3-Sj23突变体在小鼠注射部位骨骼肌细胞上出现较强荧光,空白对照组未见特异性荧光。pcDNA3-Sj23突变体获得40.3%减虫率和42.8%减卵率,pcDNA3-Sj23获得33.1%减虫率和28.9%减卵率。两组差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论与pcDNA3-Sj23相比,缺失ME491同源序列的pcDNA3-Sj23突变体疫苗能诱导BALB/c小鼠产生更好的免疫保护效果。
- 朱艳红韩庆霞任伟牛安欧李柳哲
- 关键词：日本血吸虫膜蛋白基因免疫保护
