李慧萍 作品数:4 被引量:2 H指数:1 供职机构: 浙江师范大学化学与生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
慢病毒介导CDK1/CDK2干扰对肿瘤细胞周期的影响 被引量:1 2015年 为了检测细胞周期性蛋白激酶CDK1与CDK2干扰对CBRH-7919细胞周期的影响,构建了CDK1和CDK2特异性sh RNA慢病毒沉默表达载体,三质粒共转染293FT细胞产生病毒颗粒,收集浓缩后感染CBRH-7919细胞,荧光显微镜下观察了细胞形态,实时定量荧光PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测了细胞中CDK1和CDK2 m RNA和蛋白质表达水平的变化,MTT法和流式细胞仪分别检测了细胞增殖和细胞周期的变化情况.结果表明:成功构建了CDK1与CDK2特异性sh RNA慢病毒表达载体,干扰CDK1导致细胞G2/M期的阻滞,细胞增殖明显降低,细胞碎片增多;而干扰CDK2后细胞仍正常生长. 江文娇 李慧萍 齐庆远关键词:细胞周期依赖性蛋白激酶 细胞周期 慢病毒 细胞周期依赖的ApoB RNA编辑的研究 载脂蛋白B是乳糜微粒和低密度脂蛋白/(LDL/)的必需成分,在脂类代谢、胆固醇转运过程中起关键作用。载脂蛋白B分为:apoB-100和apoB-48。后者是前者基因转录后在RNA水平上经RNA编辑产生的截短产物。ApoB... 李慧萍关键词:载脂蛋白B 细胞周期 文献传递 ApoB RNA编辑高效蛋白检测体系的构建 2014年 [目的]建立一个载脂蛋白B(apoB)RNA编辑蛋白检测体系。[方法]在慢病毒表达质粒载体pCSII-CMV-IRES-Neor中插入apoB RNA编辑保守序列,并在其2端嵌入红色荧光蛋白(DsRed)、绿色荧光蛋白(GFP)表达序列,以此慢病载体转染大鼠肝癌细胞系CBRH-7919获得稳定表达。采用共聚焦显微镜测序方法检测apoB RNA的编辑。[结果]目的指示基因能够在CBRH-7919细胞中稳定表达,表现出指征RNA编辑的多色特征。[结论]试验成功构建了在细胞水平上以颜色变化指示apoB RNA编辑的检测体系,该体系为快速检测以apoB RNA编辑为靶的降胆固醇药物筛选提供了基础。 李慧萍 江文娇 齐庆远关键词:APOB RNA编辑 红色荧光蛋白 绿色荧光蛋白 载脂蛋白B RNA编辑机制概述 被引量:1 2013年 载脂蛋白B(apoB)是负责脂类转运的脂蛋白中的蛋白组成部分,在人体内主要以apoB-100和apoB-48两种形式存在。apoB-48是apoB-100mRNA转录后经RNA编辑产生的。包含apoB-48的脂蛋白不会变成致动脉粥样硬化的低密度脂蛋白。编辑过程涉及一系列蛋白质对单个碱基进行精确的脱氨基修饰,受多种因素的调节。这些蛋白质的精确组成及各自在编辑过程中的作用尚不清楚。对apoBmRNA编辑机制的理解有助于为脂蛋白相关疾病治疗提供理论依据。 刘树涛 李慧萍 齐庆远关键词:RNA编辑 载脂蛋白B ACF