- ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中未出现DNA小片断化的分子机制初探被引量：1
- 2009年
- 目的探讨ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡非坏死性死亡中没有出现DNA小片段的分子机制，为进一步确立这种新型细胞死亡形式提供实验室依据。方法体外新鲜分离人外周血中性粒细胞与ONO—AE-248共同培养，TUNEL法结合激光共聚焦扫描显微镜检测凋亡细胞并观察细胞核形态；Westernblotting检测caspase-3的活性；RT—PCR检测DNA断裂因子（DFF40）的表达水平。实验中同时设立空白组、LPS抑制凋亡组和TNF—α．促进凋亡组为对照。结果ONO—AE-248刺激培养的中性粒细胞经TUNEL法检测未见阳性细胞，细胞核染色密度较低，边界不清，分叶不明显，核形较大；Western blotting结果显示ONO—AE-248对caspase一3前体裂解无显著影响；RT—PCR结果显示ONO—AE-248诱导了DFF40表达明显下调。结论ONO-AE-248诱导的中性粒细胞死亡过程中细胞核DNA断裂方式明显不同于自发性凋亡，DFF40表达下调可能是其没有出现DNA小片段化的主要原因之一。
- 李国利胡艳玲刘佳佳张姿何浩
- 关键词：ONO-AE-248中性粒细胞DNA片段化
- ASC在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein,ASC)在ONO-AE-248所诱发的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中的作用及意义。方法:TUNEL法标记凋亡细胞,结合激光共聚焦扫描显微镜观察细胞核形态以及DNA片段化发生的情况;Western blot法检测不同药物刺激组(LPS延迟凋亡组、TNF-α促进凋亡组、ONO-AE-248刺激组以及自发性凋亡组)的ASC蛋白的表达差异性。结果:TUNEL法检测ONO-AE-248培养12小时后的中性粒细胞,未见TUNEL阳性细胞。Western blot结果显示ONO-AE-248刺激后中性粒细胞ASC蛋白的表达一直处于下调状态。结论:ONO-AE-248诱导人中性粒细胞死亡过程中细胞核DNA断裂方式明显不同于自发性凋亡组,核内染色体可能只发生DNA较大片段的断裂,而没有发生小片段化。ONO-AE-248引起的ASC表达的下调可能是这种新型细胞死亡方式区别于自发性凋亡的重要差异点。
- 胡艳玲李国利刘佳佳
- 关键词：ONO-AE-248中性粒细胞凋亡
- NF-κB在ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中的作用
- 目的:中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)是机体最重要的炎症细胞,它在炎症部位的过度聚集可能导致自身组织细胞的二次损伤和引起炎症相关性疾病。中性粒细胞具有终末分化的特性,一旦分化...
- 李国利
- 关键词：中性粒细胞NF-ΚBONO-AE-248凋亡DNA片段化
- 文献传递
- 蛋白激酶C在中性粒细胞凋亡信号转导中的作用被引量：2
- 2008年
- 蛋白激酶C（PKC）是一类Ca^2＋、磷脂依赖性的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，由12种具有不同生物学特性的同工酶组成。PKC通过催化多种蛋白质上Ser／Thr的磷酸化，在细胞下游信号转导和调节细胞功能中发挥重要的作用。中性粒细胞（PMN）是参与机体固有免疫的主要细胞，一旦分化成熟便启动它的自发性凋亡程序，从而维持机体的内环境稳定和促成炎症反应的无损伤性收敛。PMN凋亡的调控是一个受多基因、多因子、多条信号转导通路独立或交联作用的复杂网络。作为细胞内信号转导重要递质的PKC，在调控PMN的自发性凋亡进程中起着重要作用。
- 李国利刘佳佳
- 关键词：PKC中性粒细胞凋亡信号转导
- NF-κB不参与ONO-AE-248诱发的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡
- 2009年
- 目的研究核转录因子NF-κB(Nuclear factor kappa B)在ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中的作用,探讨这种细胞死亡的分子机制。方法Ficoll法分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,与ONO-AE-248共同培养,通过Western blotting检测IκBα的蛋白表达水平,反映NF-κB的活化状态,并应用RT-PCR检测NF-κB调节的基因XIAP、DAD1和FLIP的mRNA表达水平。结果ONO-AE-248不能促进中性粒细胞内IκBα蛋白降解,显示它并不诱导NF-κB活化。而且,ONO-AE-248对NF-κB调节的基因XIAP、DAD1、FLIP的mRNA表达也无明显影响(P>0.05)。结论ONO-AE-248诱发的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡不依赖NF-κB信号转导通路,其介导中性粒细胞死亡的信号转导可能是不同于凋亡的独特转导途径。
- 李国利胡艳玲刘佳佳
- 关键词：NF-ΚB中性粒细胞ONO-AE-248
