朱军
- 作品数:7 被引量:48H指数:5
- 供职机构:石河子大学农学院园艺系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目国家科技攻关计划引导项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 库尔勒香梨的苹果茎痘病毒cDNA探针检测技术研究被引量:7
- 2004年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对 2种总RNA提取方法进行了比较研究 ,从中行筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法 ;并利用RT PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针 ,在此基础上 ,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了试验研究 ,结果表明 ,当探针浓度为 4 0 0ng·ml-1,甲酰胺浓度为 4 5 % ,4 2℃杂交反应 6h ,可获得最高灵敏度。进口硝酸纤维素膜的灵敏度最好 ,基本无背景。Tween2 0的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测 ,结果表明 ,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号 。
- 牛建新朱军马兵钢覃伟铭王小兵吴忠华
- 关键词:库尔勒香梨苹果茎痘病毒CDNA探针
- 以dsRNA为模板的梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究被引量:20
- 2003年
- 用已知带梨脉病毒(Pearveinyellowvirus,PVYV)的库尔勒香梨植株和库尔勒香梨无病毒实生苗为供试材料,分别选用新鲜幼嫩叶片、4℃条件下保存2~4d的幼嫩叶片、冷冻的幼嫩叶片和皮层为试材,进行dsRNA的分离提取实验,得到了与PVYV基因组RNA长度9306bp相当大小的dsRNA谱带,并以dsRNA为模板,利用设计的特异引物,研究建立了梨脉黄病毒(PVYV)的RT-PCR检测技术体系,能有效地扩增出PVYV的一条长为316bp的特异片段,该技术可广泛用于果树病毒的分子检测。
- 牛建新刘连科朱军覃伟铭
- 关键词:库尔勒香梨双链RNART-PCR
- 库尔勒香梨的苹果褪绿叶斑病毒cDNA探针检测技术研究被引量:2
- 2005年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对两种植物总RNA提取方法进行了比较研究,从中筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法;并利用RT-PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针,在此基础上,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了实验研究。结果表明,当探针浓度为400ng/mL,甲酰胺浓度为45%,42℃杂交反应6h,可获得最高灵敏度。Tween20的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测,并对库尔勒地区香梨带毒情况进行了检测。结果表明,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号,两种提取方法提取的总RNA也都出现了杂交信号,库尔勒香梨样品有45%的带苹果褪绿叶斑病毒。
- 牛建新朱军马兵钢
- 关键词:苹果褪绿叶斑病毒CDNA探针库尔勒香梨RNA提取方法PCR反应体系杂交检测
- 库尔勒香梨病毒病多重RT-PCR检测技术研究被引量:5
- 2004年
- 在建立PVYV和ACLSVRT PCR优化体系的基础上,主要研究了多重PCR中2套引物的浓度和退火温度的影响,研究表明:多重PCR体系中引物Tm值越高、长度越长浓度就需越高;如果Tm值相差不大,退火温度的确定要以Tm值高的引物为准。应用该体系可以节约成本、缩短时间。
- 牛建新刘连科马兵钢朱军李海生何梅
- 关键词:多重RT-PCR
- 库尔勒香梨上ACLSV的RT—PCR检测被引量:18
- 2003年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料通过改进提取方法提取总RNA,获得了较完整的RNA,在此基础上进行了反转录和PCR扩增。并进行了库尔勒香梨上ACLSV(Apple chlorotic leaf sopt virus)的RT-PCR检测,建立了该病毒的RT-PCR检测体系。用此体系扩增得到了ACLSV一个长约为358bp的片段。
- 牛建新刘连科朱军覃伟铭吴忠华王小兵
- 关键词:库尔勒香梨RT-PCR
- 中国无病毒果树研究的进展被引量:7
- 2003年
- 病毒病对果树生产的危害日趋严重,各国对病毒病害的研究和防治极为重视。本文主要论述了中国在果树病毒的检测、脱除以及抗病毒基因工程、生长结果习性和生理生化特性等方面的研究进展和取得的成就,同时指出今后应注意的一些问题。
- 张虎平牛建新马兵钢周民生樊宪伟朱军
- 关键词:病毒病抗病毒基因工程生长习性生理特性
- 梨树病毒cDNA探针检测技术研究
- 合成了生物素标记的cDNA探针,优化了检测体系,并对香梨样品进行检测,斑点清晰,是首次应用生物素标记的cDNA探针对ACLSV进行检测。
- 牛建新朱军马兵钢李海生何梅
- 关键词:库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒CDNA探针
- 文献传递