曹蕾 作品数:17 被引量:76 H指数:5 供职机构: 河北联合大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省自然科学基金 河北省科技厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
刺五加ATP合酶β亚基基因的克隆与序列分析 被引量:2 2012年 [目的]克隆刺五加叶绿体的ATP合酶β亚基cDNA并对其进行生物信息学分析。[方法]根据已知物种叶绿体ATP合酶β亚基基因的序列,设计1对同源引物,通过RT-PCR扩增得到刺五加ATP合酶β亚基cDNA,并对其进行序列比对及结构预测分析。[结果]RT-PCR扩增获得了长1 099 bp的刺五加ATP合酶β亚基cDNA,该基因编码366个氨基酸。序列比对及结构预测分析表明,刺五加ATP合酶β亚基基因编码的氨基酸与水稻的同源性最高,达96.41%。其二级结构中含有171个α螺旋(alpha helix),占46.72%;53个延伸链(extended strand),占14.48%;27个β折叠(beta turn),占7.38%;115个无规则蜷曲(random coil),占31.42%。第262~271位氨基酸为ATP合酶β亚基的标志性位点。整个多肽链无明显的疏水区域,初步认定为亲水性蛋白。[结论]该试验克隆得到的ATP合酶β亚基基因为叶绿体ATP合酶β亚基基因,为研究刺五加能量代谢对植物次生代谢的影响及了解植物ATP合酶的结构与功能提供了必要的信息。 曹蕾 邢朝斌 陈龙 梁能松 何闪关键词:刺五加 克隆 蓝氏贾第鞭毛虫α-7.1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定 被引量:8 2012年 目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Westernblot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白。结论成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白。 王洋 杨志宏 王沂 曹蕾 余源 陈阳 王卫亮 慈雅丽 田喜凤关键词:蓝氏贾第鞭毛虫 原核表达 医学院校巴基斯坦留学生生物化学理论教学改革 2013年 通过近5年对留学生教学实践的总结,探讨了留学生教学模式和方法,就留学生教学方法和教学手段以及教学评价的改革等方面进行了分析,为今后留学生生物化学教学的改革和发展提供可借鉴的思路与方法. 林佳 曹蕾 何冰 张雪梅 崔和勤关键词:生物化学 教学方法 留学生 CYP1A1 Ile462Val 多态与小细胞肺癌遗传易感性相关 被引量:3 2014年 目的探讨细胞色素P4501A1(CYP1A1)基因Ile462Val单核苷酸多态与小细胞肺癌遗传易感性的相关关系。方法收集275例小细胞肺癌患者和406例正常对照者的外周静脉血标本,采用聚合酶链反应一限制性片断长度多态性分析(PCR.RFLP)技术检测CYP1A1基因Ile462Val多态的基因型。采用多变量Logistic回归方法分析不同基因型与小细胞肺癌发病风险的相关关系。结果与CYP1A1462Ile/Ile基因型携带者相比,462Ⅱe/Val和462Val/Val基因型携带者小细胞肺癌发病风险显著降低,其OR值分别为0.65(95%C10.48~0.91)和0.60(95%C,0.32~0.97)。吸烟分层分析显示,在不吸烟人群中,462Ile/Val或462Va1/Va1基因型携带者小细胞肺癌发病风险的OR值为0.99(95%c,0.62~1.51)。在吸烟人群中,462Ile/Val或462Val/Val基因型携带者小细胞肺癌发病风险的OR值为0.42(95%CI,0.26~0.65)。此外,在轻度吸烟者和重度吸烟者中462Ile/Val或462Val/Val基因型携带者小细胞肺癌发病风险的OR值分别为0.42(95%C,0.21~0.85)和0.44(95%c,0.24~0.82)。结论CYPlAl基因Ile462Val多态与小细胞肺癌遗传易感性相关。 何冰 林佳 曹蕾 王宏戈 饶娟 刘英文 张志关键词:细胞色素P450 基因多态性 刺五加叶绿体基因组密码子的用法分析 被引量:21 2013年 目的:分析刺五加叶绿体基因组密码子的使用方式及其影响因素。方法:以刺五加叶绿体基因组的52条编码基因为材料,利用CodonW和SPSS软件进行多元统计分析和对应性分析。结果:刺五加叶绿体基因组密码子3个位置GC的量依次为46.46%,38.26%,29.88%,其中GC1与GC2呈极显著相关关系(P<0.01),GC12与GC3的相关系数为0.205,未达到显著水平。同义密码子的相对使用频率(relative synonymous codon usage,RSCU)>1的密码子共30个,其中29个以A或T碱基结尾。对应性分析的结果表明:第1轴显示了10.35%的差异,与有效密码子数(effective number of codons,ENC)和GC3显著相关,相关系数分别为-0.288,0.353;确定了刺五加叶绿体基因组的16个最优密码子。结论:刺五加叶绿体密码子第3位偏好以A或T碱基结尾,密码子使用模式受选择和突变及其他因素共同影响,其中选择的作用略大。 邢朝斌 曹蕾 周秘 修乐山关键词:刺五加 密码子用法 密码子偏好性 质谱技术鉴定体外蓝氏贾第鞭毛虫的细胞骨架蛋白 被引量:7 2010年 目的用质谱技术鉴定体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的细胞骨架蛋白。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,提取虫体总蛋白,Bradford法测定蛋白质含量,样品经蛋白质2D-电泳后用硝酸银染色,扫描检测凝胶电泳图蛋白点的数量,获取蛋白质点匹配信息,然后挑选匹配性高的蛋白点,进行质谱(MALDI-TOF-MS)分析,鉴定其种类。结果虫体总蛋白质含量(4.8241±8)μg/ml。蛋白质二维电泳显示,蛋白点密集,约1 253个点,布满整块凝胶,蛋白表达量高,蛋白点颜色深且清晰、明亮。在胶图中随机选取80个匹配良好的蛋白点,经质谱分析,鉴别出5类46种蛋白质,其中细胞骨架蛋白6种(14个点),即α-贾第素、β-贾第素、γ-贾第素、δ-贾第素、中体素、鞭毛蛋白-1,代谢酶或相关蛋白18种(28个点),翻译转录蛋白5种(5个点),其他蛋白3种(3个点)、未知蛋白14种(14个点)。另有6个点未测出。结论质谱分析技术可用于体外蓝氏贾第鞭毛虫细胞骨架蛋白的鉴定。 何冰 刘广伟 曹蕾 余源 陈阳 田喜凤 杨志宏 卢思奇 赵永强关键词:蓝氏贾第鞭毛虫 双向电泳 质谱 细胞骨架蛋白 雷公藤甲素药理作用研究进展及临床应用 被引量:3 2011年 雷公藤甲素是中药雷公藤中的主要有效成分之一。本文以近年来国内外相关代表性的论文为依据,就雷公藤甲素的药理学特性、毒理学特性以及临床应用等方面进行了综述。 曹蕾 林佳关键词:雷公藤甲素 药理学 毒理学 雷公藤甲素对病毒性心肌炎细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的研究 被引量:4 2012年 目的:研究雷公藤甲素对柯萨奇病毒B3病毒(CVB3)感染的病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡和Fas/FasL蛋白表达的抑制作用,探讨TP治疗病毒性心肌炎的作用机制。方法:将Balb/c小鼠随机分成4组作为动物模型,分别为对照组、模型组、利巴韦林组和TP组。对照组腹腔注射生理盐水,其余三组腹腔注射CVB3,利巴韦林组和TP组小鼠分别予以相应的药物治疗后,测定各组小鼠存活率及心肌病变积分,采用末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测小鼠心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Fas/FasL蛋白阳性表达。结果:空白对照组心肌无病变,利巴韦林组、TP组与模型组相比有显著性差异(P<0.01)。正常组鲜见心肌细胞凋亡,模型组细胞凋亡率较正常组显著增加(P<0.01),治疗组利巴韦林组和TP组凋亡率比模型组明显降低(P<0.05,P<0.01)。模型组Fas/FasL表达比正常组显著增多(P<0.01),治疗组利巴韦林组和TP组较模型组显著降低(P<0.01)。结论:雷公藤甲素具有通过抑制Fas/FasL蛋白的表达,减缓心肌细胞凋亡,达到抑制病毒性心肌炎从而保护心肌细胞的作用。 曹蕾 林佳 王瑧 邢朝斌 刘爱华 何冰 王洋关键词:雷公藤甲素 病毒性心肌炎 细胞凋亡 FAS/FASL CYP2 E1-1239G>C遗传变异与乳腺癌发病风险相关 2014年 目的研究细胞色素P450 2E1(CYP2E1)基因-1239G>C变异与乳腺癌发病风险的相关关系。方法采用病例对照研究策略,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,分析309例乳腺癌患者和309例正常对照者的CYP2E1基因-1239G>C位点的基因型。以比值比(OR)及其95%可信区间(95%CI)比较CYP2E1不同基因型与乳腺癌发病风险的相关关系。结果与-1239GG基因型携带者相比,至少携带一个-1239C等位基因的个体发生乳腺癌的风险明显降低(OR=0.22,95%CI=0.11-0.41)。结论 CYP2E1-1239 G>C变异是影响乳腺癌易感性的重要遗传因素。 邵莎莎 王蕊 林佳 曹蕾 何冰 刘英文 贺宝玲关键词:CYP2E1 乳腺癌 易感性 临床血液学和血液检验教学的探讨 被引量:2 2011年 临床血液学和血液检验是血液学和医学检验的一门交叉学科,是医学检验的主干课程之一。该课程是以血液学的理论为基础,检验学的实验方法为手段,血液病作为工作对象的一个理论-检验-疾病相互结合、紧密联系,并在实践中不断发展。 王洋 余源 曹蕾 李巍伟关键词:临床血液学和血液检验 教学手段 教学改革