昔奋攻
- 作品数：13 被引量：51H指数：4
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 牛生长激素cDNA的表达与检测被引量：1
- 1997年
- 利用低融点琼脂糖凝胶电泳，回收牛生长激素cDNA全序列，克隆于原核表达载体pT7－7中T7启动子下游，转化大肠杆菌E．coliDH5a经分离，酶切分析，获得6个牛生长激素重组质粒pTGH1-6，选取其中两质粒pTGH1-2，转化E．coliK83／pGP1－2，42℃诱导30min，收集，破裂菌体，SDS－PAGE电泳检测，于22KD处有一特异性蛋白带，经ShamadzuCS930扫描测定，其表达量为全菌体蛋白的22％，Western—blot检测为阳性。
- 余荭昔奋攻陈新国冯怀蓉石玉瑚王成
- 关键词：生长激素
- 一种新型澄清剂在果汁和葡萄发酵液中的应用
- 1996年
- 一种新型澄清剂在果汁和葡萄发酵液中的应用昔奋攻，余荭，王成，王爱东（新疆农科院，乌鲁木齐，８３００００）（新疆质检所）近年来，果汁和果酒生产在世界上发展很快，采用的澄清技术更新也很快，从传统的明胶、硅藻土、蛋清等澄清法到目前的聚乙烯吡咯烷酮澄清法，有...
- 昔奋攻余荭余荭王爱东
- 关键词：果汁澄清剂
- 部分蜘蛛牵丝Ⅰ型蛋白基因合成及其聚合体的表达研究
- 蜘蛛牵丝是构成蜘蛛网的框架丝,是目前已知强度最高的天然蛋白质丝,能够与市售制造防弹衣的人工合成纤维相媲美.它由牵丝Ⅰ型和牵丝Ⅱ型蛋白按3:2的比例构成,这两种蛋白质丝在结构上存在许多相似之处,其N端均为串联重复结构,包括...
- 昔奋攻
- 关键词：蜘蛛
- 牛促卵泡激素α亚基cDNA的克隆与序列分析被引量：12
- 1998年
- 从牛脑垂体中提取总ＲＮＡ，分离ｍＲＮＡ，反转录获得ｃＤＮＡ，ＰＣＲ扩增获得长为３８０ｂｐ的牛促卵泡激素α亚基ｃＤＮＡ片段，将它克隆于ｐＵＣ１９中，进行序列分析，结果表明：所克隆的α亚基基因编码区序列与Ｅｒｗｉｎ所发表的序列基本相同，仅编码第２４位赖氨酸的密码有差异，同时将所获基因的核苷酸序列及相应氨基酸序列与人、啮齿类的同类基因相比较，具有很高的同源性．
- 昔奋攻余荭陈新国石玉瑚陈清轩张志红
- 关键词：促卵泡激素Α亚基CDNA
- 猪肥胖基因在大肠杆菌中的高效融合表达被引量：2
- 2001年
- 采用PCR方法扩增猪肥胖基因编码的成熟蛋白cDNA序列 ,并在 5′端加上BamHⅠ位点 ,3′端加上EcoRⅠ位点 ,将 5′端密码子CCC转变为大肠杆菌常见密码子CCG ,扩增得到 4 5 9bp的片段 ,克隆于融合表达载体pGEX 2TBamHⅠ和EcoRⅠ位点 ,酶切、测序正确 ,经 0 1mmol/LIPTG诱导表达出一条约 4 2kD的融合蛋白 ,其中 2 6kD为 pGEX 2T中带有的谷胱苷肽转移酶 ,16kD是猪肥胖基因表达产物瘦蛋白。利用非融合表达产品制备抗血清 ,检测融合表达的重组蛋白 ,Western blot为阳性。
- 昔奋攻李宁戴茹娟刘兆良吴常信
- 关键词：肥胖基因大肠杆菌
- 人和猪肥胖(ob)基因在大肠杆菌中的表达研究
- 肥胖基因(ob)是近年被克隆的一个新基因,该基因产物-Leptin是反映体内脂肪含量和调节体系的重要信号因子.该论文对本实验室克隆的猪ob基因和保存的人ob基因进行了融合和非融合表达、表达产物提取及抗血清制备和检测.采用...
- 昔奋攻
- 关键词：肥胖基因大肠杆菌
- 文献传递
- 牛生长激素cDNA的克隆与序列分析被引量：1
- 1996年
- 从平脑垂体中分离总ＲＮＡ，经ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）一纤维素柱纯化ｍＲＮＡ，反转录合成ｃＤＮＡ，经ＰＣＲ技术扩增牛生长激素（ｂＧＨ）ｃＤＮＡ序列，长度为６２０ｈｐ，将ＰＣＲ产物克隆于ｐＵＣ１９Ｓｍａｌ位Ⅰ点转化大肠杆菌ＤＨ５α，经蓝白斑筛选，获得重组克隆，分离重组质粒，经限制性内切酶酶切分析后，进行序列分析。结果表明，一质粒中所含克隆片段为ｂＧＨｃＤＮＡ全序列。
- 昔奋攻余荭季青冯怀蓉石玉瑚王成
- 关键词：生长激素克隆
- 人肥胖基因在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2005年
- 肥胖基因编码的瘦蛋白可以反映机体脂肪含量信息,在发育、繁殖、造血及体重调节等方面具有重要功能.本文利用PCR方法扩增去除信号肽的人肥胖基因cDNA序列,并将位于基因5'端的CCC转变为大肠杆菌常用密码子CCG,扩增片段经测序证实后,克隆原核表达载体pT7-7,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经温度诱导,SDS-PAGE电泳可见分子量约为16kD的特异蛋白表达带,表达量最高占菌体蛋白总含量的45%以上.表达重组蛋白经纯化,注射昆明白小白鼠,小白鼠体重明显下降,说明纯化的重组蛋白具有生物学活性.
- 昔奋攻李宁吴常信
- 关键词：大肠杆菌肥胖基因SDS-PAGE电泳CDNA序列质粒转化瘦蛋白
- 利用生物技术生产牛促卵激素的研究被引量：14
- 1995年
- 从牛脑垂体中分离出mRNA,经反转录酶合成cDNA.利用PCR基因扩增技术,从cDNA中成功地扩增了牛促卵泡激素(bFSH)的β-亚基DNA.经序列分析证明所编码的氨基酸序列与天然bFSH的氨基酸序列相同.采用PCR扩增突变技术,去除真核信号肽,插入PGEX-2T表达载体,得到40 ku高效表达的融合蛋白,表达量占湿菌体的20％以上.用超声波破碎提取重组bFSH融合蛋白,凝血酶切除GST,得到14ku bFSH纯品,Western Blot检测呈阳性结果.用小鼠和幼兔做生物学活性检测,有一定的活性.
- 艾秀莲陈新国季青龙涛余红昔奋攻董平石玉瑚
- 关键词：CDNA合成PCR扩增促卵泡激素生物技术
