惠慧
- 作品数：3 被引量：25H指数：1
- 供职机构：西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省中医药管理局科研基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高危HPV16 E4基因的表达纯化及临床应用被引量：1
- 2008年
- 目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)16 E4重组表达体并表达纯化获得HPV16 E4重组蛋白,用于检测不同人群血清相应抗体,初步探讨本地区HPV16 E4血清抗体反应与宫颈癌的相关性。方法:将HPV16E4基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E4表达重组体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG诱导表达。表达的包涵体变性后经Ni柱纯化,复性并经活性鉴定后,用以包被酶联免疫吸附实验(ELISA)板,检测正常女性、慢性宫颈炎和宫颈癌患者血清抗体。结果:pRSET-16E4表达重组体的工程菌经IPTG诱导后可表达Mr15×103的HPV16 E4组氨酸融合蛋白,表达量占菌体蛋白的30%。表达形式为包涵体,重组蛋白经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,纯度达95%以上,其活性经ELISA法证实。80例正常女性、46例慢性宫颈炎和32例宫颈癌患者中,其血清抗体阳性率分别为10.00%,39.13%和28.13%,宫颈癌患者HPV16 E4血清抗体阳性率显著高于正常人,且慢性宫颈炎患者HPV16 E4血清抗体阳性率也显著高于正常人,但宫颈癌组HPV16 E4血清抗体阳性率与慢性宫颈炎组间的差异无统计学意义。结论:在pRSET-A/BL21中表达获得的HPV16 E4融合蛋白,可用于宫颈癌相关HPV的血清学研究;宫颈癌和慢性宫颈炎患者HPV16E4血清抗体阳性率均明显高于正常人。
- 高艳娥惠慧张菊樊江波阎小君
- 关键词：人乳头瘤病毒16型血清抗体宫颈癌
- 莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞增殖抑制及促凋亡作用的研究被引量：23
- 2009年
- 目的:探讨莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞体外增殖和凋亡的影响。方法:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml不同浓度莪术醇作用于人宫颈癌CASKI细胞后,MTT法检测CASKI细胞的增殖抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡率变化;电镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学特征。结果:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml的莪术醇对宫颈癌CASKI细胞均有不同程度的增殖抑制作用,在一定范围内,具有浓度-时间依赖性。流式细胞仪分析结果显示:50μg/ml、100μg/ml莪术醇作用于宫颈癌CASKI细胞24h,可阻滞细胞周期于G2/M期,并诱导部分细胞凋亡。电镜下可见凋亡细胞及凋亡小体,且100μg/ml组细胞凋亡改变较50μg/ml组更明显。结论:莪术醇能明显抑制CASKI细胞的体外增殖,且可阻滞CASKI细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡。
- 高艳娥郭金珠惠慧王咏雪王桂贤
- 关键词：莪术醇宫颈癌CASKI细胞细胞周期凋亡
- HPV58在宫颈癌组织中的感染分析及其转化基因的克隆(英文)被引量：1
- 2010年
- 目的分析中国陕西宫颈癌组织中HPV58的感染情况并克隆其E6、E7主要转化基因。方法采用HPVGP5+/GP6+通用引物PCR扩增58例宫颈癌组织DNA粗提物,继之将荧光偏振技术与模板指导的末端延伸反应(TDI-FP)结合,应用探针杂交延伸反应检测HPV58。用特异性引物随机从1例HPV58阳性标本中PCR扩增HPV58E6、E7基因,将其分别与pGEM-TEasy载体连接,所获得的重组质粒经内切酶消化和测序鉴定。结果58例宫颈癌标本中10例(17.24%)为HPV58阳性,克隆获得的HPV58E6、E7重组质粒经BLAST分析证实分别含有HPV58完整的E6、E7基因,与GenBank收录的标准株比较,E6、E7基因分别有5个和2个硷基发生变异,可导致相应的蛋白质氨基酸序列中分别有4个和1个氨基酸替换。结论中国陕西人宫颈癌组织中HPV58感染较为多见,且HPV58E6和E7转化基因的硷基序列与标准株有所差异。本研究为下一步HPV58相关肿瘤诊断试剂及疫苗的研制奠定了基础。
- 高艳娥金雯薛琴琴惠慧赵艳
- 关键词：E6/E7基因荧光偏振克隆宫颈癌
