徐萍萍 作品数:9 被引量:12 H指数:3 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
用于制备避孕疫苗的自组装多肽纳米 本发明属于免疫学领域,特别涉及避孕疫苗的研制技术,具体涉及Q11多肽与附睾蛋白酶抑制蛋白的表位肽联合在制备针对附睾蛋白酶抑制蛋白抗体的免疫原中的应用,所述Q11多肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示;还涉及利用自组... 唐帅 梁志清 何畏 王延洲 孙黎黎 徐萍萍文献传递 男性避孕纳米粒的制备与体外实验研究 被引量:3 2015年 目的构建聚乳酸-羟乙酸共聚物(polylactic acid-glycolic acid,PLGA)包载促卵泡生成素受体表位肽(FSHR32-44)的纳米粒,探讨PLGA材料作为避孕疫苗载体的可行性。方法使用PLGA为载体,制备出包载促卵泡生成素受体的B细胞表位(FSHR32-44)的纳米粒,透射电镜(TEM)观察表观形态,粒径仪检测粒径分布范围和Zeta电位,体外释放试验检测其理化特性。激光共聚焦显微镜观察小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)吞噬FSHR可溶性多肽和FSHR/PLGA NP的能力,流式细胞仪检测FSHR、PLGA NP和FSHR/PLGA NP促骨髓来源DCs成熟能力。结果单乳-溶剂挥发法制备的FSHR/PLGA NP大小粒径分布均匀、表面规整,粒径(296.3±3.5)nm,Zeta电位(-16.1±0.4)m V,FSHR包封率(62.71±2.83)%,并具有缓慢释放抗原的能力;体外细胞水平实验结果显示FSHR表位肽纳米粒易于被DCs摄取,有剂量和时间依赖性,能显著上调DCs表面CD40、CD86、CD83和MHC-Ⅱ功能分子的表达。结论 PLGA包载FSHR多肽有良好的包封率,易被DCs吞噬,并有强的促进DCs成熟作用,可以作为FSHR32-44避孕疫苗的载体。 徐萍萍 杨利华 魏桂芝 张建祥 东亚君 梁志清关键词:FSHR PLGA 纳米疫苗 避孕 避孕微针的制备方法 本发明属于免疫学领域,特别涉及避孕疫苗的研制技术,具体为避孕微针的制备方法,具体包括以下步骤:将筛选的人Eppin蛋白优势抗原表位序列和/或具有自组装形成纳米纤维结构的多肽序列串联,得表位肽;将步骤A所得的表位肽充分溶解... 梁志清 唐帅 何畏 王延洲 孙黎黎 徐萍萍文献传递 新生期去胸腺小鼠自身免疫性卵巢疾病外周血中Treg细胞的变化及意义 被引量:3 2013年 目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在小鼠自身免疫性卵巢疾病(autoimmune ovarian disease,AOD)发生与发展过程中的变化及意义。方法出生第3天乳鼠摘除胸腺(thymectomized on day 3,D3tx)建立D3tx组和假手术组,免疫组织化学观察小鼠卵巢改变,ELISA检测性激素变化,流式细胞学检测术后小鼠外周血中Treg及T细胞亚群比例的变化。结果胸腺切除后5周卵巢出现炎细胞浸润及卵泡闭锁,血清FSH升高,E2下降。小鼠外周Treg在术后1~3周达到高峰后快速下降,缓慢下降直至术后9周仍高于对照组(P<0.05);AOD发生后,CD3+T细胞明显减低(P<0.001),CD4+T减低(P<0.05),CD8+T无明显统计学差异(P>0.05),CD4+/CD8+T细胞比例有下降趋势(P>0.05),但无统计学意义。结论 Treg参与AOD的发病过程,推测可能在AOD发病初期具有潜在保护作用。 东亚君 谢江燕 赵婷婷 陈慧玲 徐萍萍 何畏关键词:胸腺切除 调节性T细胞 促性腺激素释放激素激动剂预处理对性成熟雌鼠调节性T细胞的影响 被引量:5 2016年 目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin releasing hormone agonist,GnRHa)预处理对性成熟雌鼠调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的影响。方法 30只动情周期正常的7-8周未交配KM雌鼠随机分成5组,第1组连续9 d每日注射醋酸曲普瑞林1次,第2组连续9d每日注射醋酸曲普瑞林后,在第9天注射重组人促卵泡激素1次,第10天注射绒毛膜促性腺激素1次,第3组、4组分别与第1组、2组对应,用生理盐水代替醋酸曲普瑞林,其余处理不变,第5组无药物干预。流式细胞学检测各组外周血、脾脏T淋巴细胞亚群及Treg比例;并分别从前4组中随机选取4只小鼠留取子宫内膜,用实时荧光定量PCR方法检测子宫内膜Foxp3 mRNA含量。结果 流式细胞技术检测结果发现,外周血T淋巴细胞亚群及Treg比例各组比较无明显差异。比较脾脏T淋巴细胞亚群及Treg比例发现,与第5组比较,第1、2、3、4组CD3+比例下降(P〈0.05),第2组CD4^+比例下降(P〈0.05);第2组CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg比例高于第4、5组(P〈0.05);CD8^+比例在各组间未见明显差异。实时荧光定量PCR检测结果发现,与第3组比较,第1组子宫内膜Foxp3 mRNA升高(P〈0.05);与第4组比较,第2组子宫内膜Foxp3 mRNA升高(P〈0.05)。结论 GnRHa预处理后促排卵,可提高脾脏Treg比例及子宫内膜Foxp3 mRNA含量,可能提高机体免疫耐受水平。 彭周雨 温彦 赵婷婷 傅晓岚 贺丽人 徐萍萍 何畏关键词:促性腺激素释放激素激动剂 调节性T细胞 FOXP3 UBM材料上的Laminin蛋白促进负载骨髓间充质干细胞增殖和平滑肌分化 被引量:1 2015年 目的探讨猪膀胱细胞外基质(urinary bladder matrix,UBM)上的Laminin蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖和向平滑肌分化的影响。方法采用机械分离法、酶消化法及冷冻干燥法等方法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理,采用蛋白与支架共孵育,制备出UBM+Laminin及UBM+Anti-Laminin复合支架。采用贴壁法培养BMSCs,流式细胞仪鉴定BMSCs。采用P3代BMSCs,分别接种于UBM+Laminin、UBM及UBM+Anti-Laminin上。采用CCK-8检测、HE染色观察及免疫组化鉴定等方法检测Laminin蛋白对BMSCs增殖、迁移和分化的影响。结果流式细胞仪鉴定BMSCs CD29阳性表达率为98%,CD31阳性表达率为4.56%,CD34阳性率为3.30%。3种材料均能支持BMSCs生长,且随共孵育时间的延长,D(450)值逐渐升高,其中UBM+Laminin复合材料组细胞D(450)最高(P<0.01)。HE染色结果显示UBM+Laminin组细胞接种第3天形成黏附层,并向深部迁移,第14天可达材料致密层;UBM组第7天仅少许细胞向深层迁移,第14天未达基底层;UBM+Anti-Laminin组仅在支架表层生长。免疫组化检测显示UBM+Laminin组、UBM组、UBM+Anti-Laminin组细胞α-SMA表达分别呈阳性、弱阳性和阴性。结论 UBM材料上Laminin蛋白能促进负载BMSCs增殖、迁移、并有诱导其向平滑肌方向分化的作用。 魏桂枝 刘晶霞 徐萍萍 倪兵 刘禄斌 梁志清关键词:骨髓间充质干细胞 免疫避孕疫苗的最新研究进展 2016年 免疫避孕疫苗是利用多种实验技术,从参与生殖过程各要素中筛选出蛋白抗原或表位抗原,通过免疫避孕对象,在生殖道局部或全身产生中和抗体,从而影响和破坏生殖过程,起到延长妊娠间隔和避孕的作用。本文对免疫避孕现状和未来发展做一综述。 徐萍萍 毛克杰 梁志清 杨利华关键词:避孕疫苗 免疫 抗原 配体 避孕微针的制备方法 本发明属于免疫学领域,特别涉及避孕疫苗的研制技术,具体为避孕微针的制备方法,具体包括以下步骤:将筛选的人Eppin蛋白优势抗原表位序列和/或具有自组装形成纳米纤维结构的多肽序列串联,得表位肽;将步骤A所得的表位肽充分溶解... 梁志清 唐帅 何畏 王延洲 孙黎黎 徐萍萍文献传递 用于制备避孕疫苗的自组装多肽纳米 本发明属于免疫学领域,特别涉及避孕疫苗的研制技术,具体涉及Q11多肽与附睾蛋白酶抑制蛋白的表位肽联合在制备针对附睾蛋白酶抑制蛋白抗体的免疫原中的应用,所述Q11多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;还涉及利用自组... 唐帅 梁志清 何畏 王延洲 孙黎黎 徐萍萍文献传递