徐海津
- 作品数：71 被引量：100H指数：5
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 铜绿假单胞菌最佳电转化条件的研究被引量：7
- 2004年
- 以临床分离的一株铜绿假单胞菌 (Pseudomonasaeruginosa)PA68作受体菌 ,将具有卡那霉素抗性标记的质粒pSMC2 8通过电转化导入到受体菌中 ,研究细胞生长状态、电击电压、细胞浓度、感受态细胞的贮备方式对转化效率的影响。结果表明 ,在细胞生长至OD5 40 =0 7～ 0 8时收集菌体 ,在低温 (2℃ )条件下 ,制备浓度为 10 11个细胞 mL的感受态细胞 ,在较高的电压 (2 6kV)电击下 ,能获得较高的转化效率。最高可达 1 68× 10 8个转化子 μgDNA(CFU μgDNA)。用此优化的转化条件 ,在国际上首次成功地将Mu转座复合物导入到P .aeruginosa中 ,并获得 2 4× 10 4 CFU μgDNA的高转化效率。由于Mu转座重组技术具有随机单点插入的优点 ,克服了传统转座子能在染色体上迁移的缺点 ,保证了表型的改变与转座子插入位点所在的基因突变的一一对应关系 ,为进一步研究P .aerugi
- 单志英徐海津施兴启聂舟遇言张秀明白艳玲乔明强高才昌
- 关键词：铜绿假单胞菌电转化
- 真菌疏水蛋白HGFI自组装分子机制和材料表面修饰功能的研究
- 2019年
- 真菌疏水蛋白是高等丝状真菌在特定生理时期分泌的一类小分子量、两亲性蛋白质,其可以在两相界面处通过自我装配形成纳米级蛋白膜,改变介质表面的亲水性和疏水性.疏水蛋白独特的自组装性质使其在不同的领域均具有应用潜力,如材料表面修饰、乳化、蛋白纯化、药物传送和生物传感器制作等.本文主要介绍了真菌疏水蛋白的国内外研究进展,并针对本课题组发现的灰树花真菌疏水蛋白,介绍其自组装分子机制、在材料表面修饰以及药物缓/控释等方面的应用研究.
- 王波徐海津乔明强
- 关键词：自组装两亲性
- 利用人工Mu转座技术研究解淀粉芽孢杆菌的功能基因被引量：7
- 2006年
- 目的:利用人工Mu转座技术研究解淀粉芽孢杆菌的功能基因。方法:使用加入0.5%甘氨酸的M9-YE培养基,细菌生长到D600nm值为0.5时制备感受态细胞,加入Mu转座复合物(含42ngMuDNA),以1.8kV电压电击获得转化子。对转化子进行功能突变表型筛选、基因克隆、DNA序列分析,以确定插入突变的功能基因。结果:获得最佳电转化效率1.9×103CFU/μgDNA。同时获得2个芽孢杆菌抑真菌作用的调节基因rpmGA和yxlC。结论:人工Mu转座技术是研究芽孢杆菌功能基因的快速有效的好方法。
- 郝建安曹志辉徐海津白艳玲张秀明乔明强
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌电转化
- 铜绿假单胞菌泳动能力相关基因PA5001及应用
- 本发明公开了铜绿假单胞菌泳动能力相关基因PA5001。属于微生物生物技术领域。此基因大小为957bp，目前国际上对该基因的功能尚没有报道，本实验首次发现其参与菌体的泳动能力。铜绿假单胞菌的泳动(swimming moti...
- 乔明强靳永新白艳玲张秀明徐海津李迎丽姚宏明刘力伟牟锐
- 文献传递
- 黄瓜叶绿体表达载体构建与稳定性研究被引量：1
- 2017年
- 以黄瓜类质粒pC3为重要元件,构建了黄瓜叶绿体表达载体,并采用电穿孔方法对黄瓜离体叶绿体进行转化.以叶绿体总DNA为模板扩增出预期长度的外源基因,结果表明,类质粒pC3的整合没有影响表达载体结构的稳定.这种特异性黄瓜叶绿体表达载体的构建,为研究高等植物类质粒的起源、细胞器基因组间遗传物质传递等基础理论,以及推进叶绿体转化的应用提供了重要的工具.
- 王宏刚白艳玲徐海津刘盛海张文娟刘青张秀明乔明强王勇
- 关键词：黄瓜叶绿体
- 铜绿假单胞菌泳动能力相关新基因的筛选及鉴定被引量：4
- 2006年
- 从Mu转座突变子文库中经过表型筛选,得到12株泳动(Swimming motility)能力缺陷的突变子,经Mu转座子插入位点的确认、基因克隆及测序分析发现其中10个突变子中Mu转座子分别插入到10个不同的与鞭毛运动和功能相关的基因中,2个突变子中Mu转座子插入到功能未知的新基因(PA2950和PA5022)中,电镜观察结果表明这2个突变株均具有完整的鞭毛,初步推测这2个基因可能是参与鞭毛泳动的能量代谢、趋化作用或信息传递的新基因。
- 李迎丽白芳单志英徐海津乔明强林伟利夏惠明姚宏明徐姝娲张秀明白艳玲
- 关键词：铜绿假单胞菌鞭毛
- 铜绿假单胞菌水解弹性蛋白能力相关基因的筛选与鉴定
- 2008年
- 【目的】研究铜绿假单胞菌弹性蛋白水解能力相关基因。【方法】应用人工Mu转座技术构建铜绿假单胞菌野生型菌株PA68的转座突变文库,从2000多个突变子中筛选得到4株弹性蛋白水解能力改变的突变子,并通过克隆及测序获得转座子插入位点侧翼的序列。将铜绿假单胞菌弹性蛋白酶结构基因lasB的转录启始区序列整合入载体pDN19lacΩ并将该重组质粒电转化入野生型菌株PA68及4个突变株中,对报告基因在不同菌株中的表达水平进行测定。【结果】发现4个突变株中Mu转座子分别插入lasA、galU、xcpZ和ptsP 4个基因。ptsP基因失活的突变株中,lasB基因的转录水平是野生型菌株的7%,xcpZ和lasA基因的失活使lasB基因的转录水平分别降低为野生株的54%和75%,galU基因的插入失活使lasB基因的转录上升了1倍。【结论】推测ptsP和galU基因很可能直接或间接地调控着弹性蛋白酶的生物合成。
- 靳永新李铁梅夏惠明谷彩凤张秀明白艳玲徐海津乔明强
- 关键词：铜绿假单胞菌弹性蛋白酶转录水平
- 铜绿假单胞菌鞭毛运动相关基因的研究
- 2006年
- 建立优化的转化条件,将M u转座复合物电转化到临床分离的一株铜绿假单胞菌(P seud om onasaerug inosa)PA 68中,最高转化效率达3.66×104CFU/μg DNA.通过表型筛选,得到三株鞭毛运动能力缺陷的突变子,Sourn thern杂交证实转座子为单点插入.经基因克隆、核苷酸测序研究,证明转座子分别插入到uvrD、phzF 1、zw f三个基因中,这是首次在国际上将M u转座重组技术应用到鞭毛运动相关基因的研究中.由于人工M u转座技术具有随机单点插入的优点,克服了传统转座子能在染色体上迁移的缺点,为进一步研究P.aerug inosa的鞭毛运动机理及致病性奠定基础.
- 单志英乔明强施兴启徐海津姚宏明白艳玲张秀明高才昌
- 关键词：鞭毛
- 铜绿假单胞菌生物被膜形成相关基因fimL及应用
- 本发明公开了铜绿假单胞菌生物被膜形成相关基因fimL。属于微生物生物技术领域。本发明与铜绿假单胞菌致病性的研究息息相关，此基因大小为1689bp，国际上对该基因的功能没有报道。实验发现该基因的缺失能够使IV型菌毛介导的蹭...
- 单志英白芳徐海津张秀明白艳玲乔明强
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌水解弹性蛋白能力相关基因PA5022及其应用
- 本发明公开了铜绿假单胞菌水解弹性蛋白能力相关基因PA5022及其应用。属于微生物生物技术领域。此基因大小为3357bp，其核苷酸序列如序列表序列1所示。目前国际上对该基因的功能尚没有确切报道。铜绿假单菌的弹性蛋白酶是一种...
- 徐海津靳永新刘力伟牟锐米晓媛张秀明白艳玲乔明强
- 文献传递
