张鑫
- 作品数：10 被引量：22H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗IL-2受体γ链抗体抑制T细胞表达survivin的研究被引量：1
- 2006年
- 目的 探讨体外封闭IL-27链抑制T细胞表达survivin的机制。方法 分离Balb／C、C57BL／6小鼠脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养（MLR）及conA刺激试验。通过免疫细胞化学染色方法检测survivin表达及其规律。不同天数内加入抗γ公共链抗体，流式细胞术检测细胞凋亡（PEcy5-CD3，FTTE—Annexin-V）、细胞周期（PI）及CD25、survivin表达。结果 同种抗原及ConA刺激后脾细胞可检测到survivin、CD25表达。活化淋巴细胞表达survivin，加抗γ公共链抗体后，不能检测到survivin的表达，而CD3^＋ Annexin-V^＋细胞数增加，M期细胞数下降，凋亡细胞（前G1期）增加；但在MLR后第1～2天，抗γ公共链抗体加入并不能使凋亡细胞增加。结论 抗IL-2γ链抗体可诱导活化的T细胞凋亡，间接抑制活化的T细胞的survivin表达。
- 陈必成唐莉昌盛张鑫郭晖陈忠华
- 关键词：凋亡SURVIVINT细胞
- 探讨抗γ公共链单抗诱导移植免疫耐受的作用机制被引量：6
- 2005年
- 目的探讨抗γ公共链单抗在诱导移植免疫耐受中的作用机制。方法将实验动物分为2组,每组20只。实验组:在Balb/c裸小鼠(H-2d)体内用CFSE标记的Balb/c小鼠(H-2d)T细胞(3×107个)重建其免疫系统,同时给予经丝裂霉素C处理的供者C57BL/6小鼠(H-2b)脾细胞(5×106个)静脉输注,24h后实验组受鼠经腹腔注射抗γc单克隆抗体(4G3,3E12,TUGm2,各0.5mg)和抗白细胞介素2受体(IL-2R)β链单克隆抗体(TM-β1,0.5mg)混合液;对照组:以IgG2a2.0mg作为同型对照代替抗体腹腔注射,余处理与实验组相同。经上述处理后12h和48h后处死受鼠,取其脾细胞及外周血,利用流式细胞技术检测T细胞的增殖及凋亡。结果经抗体处理12h和48h后,实验组T细胞未发生明显增殖;而对照组两时间点均可观察到CFSE标记细胞荧光强度明显地减低,表明T细胞发生了分裂增殖。同时AnnexinV法可见,实验组标记有CD3-PE单抗的T细胞12h发生了明显的凋亡,但48h却几乎无明显的凋亡细胞;而对照组两时间点则均未检测到明显的细胞凋亡。两组间12h结果差异有统计学意义(P<0.01),但48h差异无统计学意义(P>0.05)。结论移植术前给予抗γ公共链单抗联合供者细胞特异性输注,通过有效抑制针对供者抗原发生效应的T细胞增殖,可进一步促使其发生凋亡而被有效清除,从而最终实现免疫耐受,且此种耐受具有抗原特异性。
- 昌盛沈世乾陈必成张鑫杜敦峰周洁陈忠华
- 关键词：免疫耐受丝裂霉素C
- 免疫抑制状态下小鼠MD-1表达的影响因素及其在皮肤移植中的效应被引量：2
- 2006年
- 目的探讨免疫抑制状态下小鼠MD-1表达的影响因素及在皮肤移植中的效应。方法采用小鼠同种皮肤移植模型,以环孢霉素A(CsA)、他克莫司(FK506)、霉酚酸酯(MMF)或雷帕霉素(SRL)为免疫抑制手段。结果CsA和MMF能抑制脾细胞的MD-1表达和增殖反应强度,下调血清IL-2水平和上调IL-10水平,并显著延长皮肤移植物平均存活时间(MST);FK506对IL-10水平无明显影响;而SRL对MD-1表达及IL-2与IL-10水平均无明显影响。MD-1表达水平与脾细胞增殖反应强度和血清IL-2水平呈极显著正相关,和IL-10水平呈极显著负相关。结论CsA、FK506和MMF能抑制小鼠MD-1的表达,其作用与血清IL-2水平下调有关。在免疫抑制状态下,MD-1表达下调与同种皮肤移植物存活时间延长有关,而其表达上调对排斥反应的发生具有一定的指示作用。
- 张鑫陈必成昌盛陈忠华
- 关键词：免疫抑制剂皮肤移植
- 凋亡抑制蛋白survivin在活化T细胞中的表达及其意义被引量：3
- 2005年
- 目的: 探讨survivin在活化T细胞的表达及其意义.方法: 经丝裂原与同种抗原刺激激活T细胞, 免疫细胞化学染色后观察survivin和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.用流式细胞术检测CD3、 CD25、 Survivin的表达及细胞凋亡.给BALB/c裸鼠输注C57BL/6小鼠脾细胞后第4～7天, 观察肝脏内T细胞浸润和survivin的表达.结果: ConA刺激后培养的脾细胞可表达survivin(表达不局限于G2/M期).survivin+细胞为T细胞, T淋巴母细胞可同时表达CD25和survivin.survivin+细胞中仅部分细胞表达CD25.ConA刺激淋巴细胞后第6天, 凋亡细胞的百分率明显增加(22.90% vs 5.23% P<0.001).于BALB/c裸鼠输注C57BL/6小鼠的脾细胞后, 于第4～7天,在BALB/c裸鼠肝脏中可观察到T细胞浸润并表达Survivin.结论: T细胞激活后可表达survivin, 故可作为活化T细胞的标志.T细胞持续表达survivin, 需要在体内与抗原持续接触.
- 陈必成唐莉张鑫郭晖昌盛杜敦峰陈忠华
- 关键词：T细胞SURVIVINCD25
- 小鼠MD-1表达的影响因素及其在移植排斥反应中的作用被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨影响小鼠MD-1表达的因素以及MD-1在移植排斥反应中的作用。方法:实验采用C57BL/6-BALB/c小鼠同种皮肤移植模型,以非特异性免疫抑制剂CsA、FK506、MMF和SRL,以及特异性MD-1反义脱氧寡核苷酸(AS-ODNs)为干预手段,于术后第11天留取标本检测脾细胞MD-1表达水平和增殖反应强度、血清IL-2和IL-10水平以及皮肤移植物组织学改变,并记录移植物存活时间。结果:CsA、MMF和AS-ODNs处理能减少脾脏MD-1表达阳性细胞数、降低脾细胞增殖反应强度、下调血清IL-2水平和上调IL-10水平,并显著延长皮肤移植物平均存活时间(MST);FK506与CsA和MMF处理结果的差异在于其对血清IL-10水平无明显影响;SRL处理仅能减低脾细胞增殖反应强度和延长皮肤移植物MST,对MD-1表达及IL-2与IL-10分泌无明显影响。MD-1表达水平与脾细胞增殖反应强度和血清IL-2水平呈极显著正相关,和IL-10水平呈极显著负相关。结论:CsA、FK506、MMF和AS-ODNs处理均能有效抑制小鼠MD-1的表达。免疫抑制剂干预MD-1表达的作用与血清IL-2水平下调有关。MD-1通过影响淋巴细胞增殖反应和血清IL-2、IL-10水平,在移植排斥反应中发挥重要作用。
- 张鑫陈忠华(指导)
- 关键词：免疫抑制剂反义脱氧寡核苷酸
- 抗CD132抗体介导同种异型抗原激活的T细胞凋亡(英文)
- 2005年
- 目的研究抗CD132单抗在体外对T细胞增殖的抑制作用以及其可能的临床应用价值。方法分离BALB/c、C57BL/6小鼠的脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养(MLC)。分别于第一天(组1)或第三天(组2)加入抗CD132单抗(终浓度达到100mg·L-1)。用流式细胞技术检测细胞增殖(CFSE),T细胞凋亡(PE-CD3,FITC-Annexin-v)以及细胞分裂周期(propidiumiodidestain)。T细胞Survivin的表达则用免疫化学染色法检测。结果混合淋巴细胞培养的结果显示CFSE标记的脾细胞出现了不同程度的荧光强度减弱,提示不同分裂次数的细胞存在。与MLC组比较,组1和组2中均未发现有进一步细胞分裂的迹象存在。在第3天时,组1可以检测到部分T细胞凋亡,而在培养的最初两天并无此现象。在组2中,第4天处于G2/M期的细胞出现减少而凋亡细胞增多。对照组无此现象发生(P<0.01)。同时,在MLC组中可检测到survivin在T细胞表达,而在组1和组2中则未能检测到。结论研究表明阻断CD132信号途径可以通过诱导同种异型抗原活化的T细胞凋亡而抑制T细胞增殖。因此,抗CD132单抗很有希望成为器官移植中抗排斥的临床药物。
- 陈必成昌盛唐莉张鑫向芙莉郭晖陈忠华
- 关键词：细胞培养抗体介导细胞凋亡T细胞器官移植
- 2003年美国器官移植学会年会学术报道被引量：5
- 2004年
- 昌盛杜敦峰周鸿敏陈必成张鑫周洁袁劲陈忠华
- 关键词：器官移植活体供者免疫抑制剂
- DST诱导外周耐受小鼠不同组织细胞内NF-κBp65的活性变化被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨NF-κB在外周耐受发生中的活性改变及其意义。方法:以BALB/c小鼠为供者,输注1×108个供者脾细胞3d和7d的C3H小鼠为受者,建立皮肤移植模型。每天观察移植物的生长情况并于术后第7天取移植皮片和脾脏,通过对移植物的存活时间、组织病理学检查和抗原特异性淋巴细胞增殖试验来了解免疫功能的改变;以免疫组化染色法检测小鼠脾脏和皮肤移植物中NF-κBp65活性的变化。结果:供者特异性脾细胞输注后第7天进行手术,可使皮肤移植物的存活时间延长、抗原特异性淋巴细胞增殖反应明显受抑制;皮肤移植物中NF-κBp65的活性增加,脾脏NF-κBp65的活性降低。结论:输注供者特异性脾细胞诱导的外周耐受,可能与不同部位的免疫细胞内NF-κBp65活性改变有关。
- 闫冀焕张鑫陈忠华
- 关键词：核因子-ΚB
- 羧基荧光素乙酰乙酸在移植免疫研究中的应用被引量：4
- 2005年
- 目的:介绍和探讨活体荧光示踪染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA SE)在移植免疫研究中的应用及价值。 方法:以不同浓度的CFDA SE标记小鼠脾细胞用于体内外实验。标记Balb/c(H2d)和C57BL/6小鼠(H2b)脾细胞 行混合淋巴细胞培养,流式细胞术观察标记细胞的增殖情况。Balb/c裸小鼠(H2d)构建移植物抗宿主(GVHR)、宿 主抗移植物(HVGR)模型;通过流式细胞术检测标记细胞在外周血及脾的增殖情况。 结果:荧光显微镜观察到 标记细胞。流式细胞术检测到标记细胞荧光强度出现倍减现象,表明细胞发生了增殖;无抗原刺激组荧光强度无 明显变化,抗原刺激后24～72h标记细胞停留在脾,第3天后增殖细胞进入外周血液。 结论:羧基荧光素琥珀酰 亚胺酯(CFSE)标记技术可应用于体内、体外实验,有助于对细胞增殖及定位进行检测,在移植免疫实验研究中具 有很高的应用价值。
- 陈必成昌盛杜敦峰唐莉张鑫袁劲周洁陈忠华
- 关键词：移植免疫流式细胞术
- 供者特异性抗原静脉输注联合抗γ链单克隆抗体诱导小鼠皮肤移植物免疫耐受
- 2005年
- 目的 探讨静脉输注供者特异性抗原联合抗白细胞介素2受体(IL 2R)γ链单克隆抗体诱导移植免疫耐受的可行性。方法 在C57BL/6小鼠建立H Y皮肤移植模型,术前7 d给予5×106个供者脾细胞静脉输注,并分别于术前6 d和4 d给予抗白细胞介素2受体γ链单克隆抗体(4G3、3E12及TUGm2各0.5 mg)和抗IL 2Rβ单克隆抗体(TM β1,0.5 mg)混合液2.0 mg腹腔注射,以单纯行H Y皮肤移植模型和静脉输注供者特异性抗原的H Y皮肤移植模型为对照,观察皮肤移植物的存活时间。结果 联合给予抗白细胞介素2受体γ链单克隆抗体和供者特异性抗原输注组的皮肤移植物存活时间均超过100 d,显著长于单纯H Y皮肤移植组的33.42 d(P<0.01)及仅输注供者特异性抗原H Y皮肤移植组的14.71 d(P<0.01)。结论 在H Y皮肤移植模型中,静脉输注供者特异性抗原联合抗白细胞介素2受体γ链单克隆抗体可以成功地诱导受者对皮肤移植物的免疫耐受。
- 昌盛沈世乾陈必成杜敦峰周洁张鑫陈忠华
- 关键词：供者特异性抗原静脉输注白细胞介素2受体
