张贺吉
- 作品数:13 被引量:18H指数:3
- 供职机构:三峡大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省卫生厅青年科技人才基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 大鼠gremlin1真核表达载体的构建及表达
- 2010年
- 构建大鼠gremlin1的真核表达载体pcDNA-gremlin,并观察其在真核细胞中的表达。从大鼠脑组织中提取mR-NA通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及巢式聚合酶链反应(nest-PCR)获得编码gremlin1的cDNA,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中;经酶切和测序鉴定构建正确,应用脂质体法转染HSC-T6细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内grem-lin1的表达。结果显示,构建了大鼠gremlin1的真核表达载体,转染HSC-T6细胞培养48 h后,收集并裂解转染细胞,蛋白免疫印迹法检测到转染HSC-T6细胞内gremlin1的表达显著增高。成功构建了真核表达载体pcDNA-gremlin,为研究gremlin在大鼠肝纤维化发生发展过程中的作用及作用机制奠定了基础。
- 刘艳玲张贺吉吴江锋柳长柏
- 关键词:肝纤维化真核表达
- 新多胺类似物TBP对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡及迁移能力的影响
- :肿瘤细胞的快速生长高度依赖于细胞内的多胺(腐胺、精眯和精胺)含量,由此干扰多胺代谢和拮抗多胺促细胞生长与分化的功能成为抗肿瘤药物设计的新靶点和临床治疗的新策略.
- 杨建林韩钰王凯张贺吉王艳林
- 关键词:多胺类似物TBP膀胱癌细胞迁移凋亡
- 肝星状细胞的可塑性及其对肝纤维化的意义被引量:5
- 2011年
- 在肝纤维化形成过程中,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)发挥着重要的作用.基础和临床研究结果显示,在特殊的内环境因素的影响下HSC具有朝多方向分化的潜能.对HSC命运的干预能够在一定程度上预防肝纤维化的发生,甚至逆转肝纤维化,因此HSC的可塑性研究可能为慢性肝病治疗开辟一条新途径.本文就HSC的起源、结构、可塑性及其对肝纤维化的潜在治疗意义作一综述.
- 张贺吉吴江峰柳长柏
- 关键词:肝星状细胞肝纤维化干细胞分化
- RNA干扰引起的非特异性免疫反应及其机制研究探讨
- 2012年
- 基因的表达失控是疾病发生的主要原因之一,干扰靶基因的表达可能成为有效的治疗手段。RNA干扰技术是近年兴起的基因调控干预方法,其基础,特别是应用研究极受关注,人们期待RNA干扰能成为肿瘤、病毒感染等难治疾病的临床治疗手段。然而,这一新兴技术在应用研究过程中显现出诸多问题,如细胞毒性、引起机体非特异性反应等等。就RNA干扰引起的非特异性免疫反应展开综述,探讨其机制,期望为RNA干扰的应用研究提供一些思考。
- 吴江锋张贺吉柳长柏
- 关键词:RNA干扰小干扰RNA非特异性免疫
- 多胺类似物BENS和TBP对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响
- :探讨多胺类似物BENS 和TBP 对胰腺癌PANC-1 细胞生长抑制以及促进凋亡的机制.方法:MTT 法检测细胞的生长状况;亚凋亡峰流式细胞分析法及TUNEL 法检测细胞凋亡;化学分析法测定精胺氧化酶(SMO)活性,W...
- 杨建林王凯韩钰张贺吉张军王艳林
- 关键词:多胺类似物胰腺癌细胞细胞凋亡
- 四丁基丙二胺对人MG63骨髓瘤细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响被引量:6
- 2012年
- 目的分析新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutylpropanediamine,TBP)对人骨髓瘤MG63细胞生长的影响及其机制。方法 MTT法用于分析细胞增殖,流式细胞分析用于细胞周期和凋亡细胞鉴定,琼脂糖凝胶电泳用于分析DNA片段化,Western blot用于分析细胞凋亡相关蛋白的表达水平,Transwell技术用于分析细胞的迁移能力。结果TBP明显抑制MG63细胞的增殖和迁移能力,抑制效应呈时间和剂量依赖性。流式细胞分析发现,TBP干扰细胞周期,导致G1和G2期细胞比例升高,但S期细胞比例明显下降,同时凋亡细胞数量大幅增加。TBP处理后,细胞染色体DNA出现凋亡细胞典型的DNA片段化现象,细胞质中促凋亡蛋白Bax和细胞色素C含量明显升高。结论 TBP具有抑制人骨髓瘤MG63细胞增殖的药理活性,其机制与抑制细胞周期和诱导细胞凋亡有关,提示TBP具有用于临床骨髓瘤治疗的潜在价值。
- 张贺吉王凯韩钰杨建林王艳林
- 关键词:多胺多胺类似物骨髓瘤细胞
- 多胺类似物BENS和TBP对胰腺癌PANC-1细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响被引量:3
- 2014年
- 为探讨多胺类似物BENS和TBP对胰腺癌PANC-1细胞生长的影响、促进细胞凋亡的机制以及迁移能力的影响,运用MTT法检测药物对细胞生长的影响;亚凋亡峰流式细胞分析法及TUNEL法检测细胞凋亡;Western blotting法测定Bax蛋白、细胞色素C蛋白的表达变化;Ranswell技术检测细胞迁移能力的改变。分析发现,两种多胺类似物均可显著抑制PANC1癌细胞增殖,抑制作用随药物浓度加大而增加,其细胞毒性大小依次为BENS>TBP。细胞凋亡分析发现,BENS和TBP均可诱导PANC1发生细胞程序性凋亡,导致亚凋亡峰出现和明显的DNA断裂现象。胞浆中Bax蛋白和细胞色素C含量显著增加,同时显著性抑制PANC1细胞的迁移能力。表明BENS和TBP能够抑制人胰腺癌PANC1细胞增殖;阻止PANC1细胞迁移的能力;同时诱导细胞发生凋亡,其作用机制可能与改变肿瘤细胞正常的细胞周期,活化线粒体参与的细胞凋亡途径相关。
- 杨建林韩钰王凯张贺吉张军王艳林
- 关键词:多胺类似物
- 多胺类似物四丁基丙二胺对人A549肺癌细胞的影响被引量:2
- 2012年
- 目的:研究新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutyl propanediamine,TBP)对人A549肺癌细胞增殖、细胞迁移能力和多胺代谢的影响及其机制。方法:MTT法用于分析细胞增殖;流式细胞术用于分析细胞周期;QT-RT-PCR技术用于分析多胺代谢酶的表达水平;高效液相色谱用于检测细胞内多胺含量。结果:TBP处理A549细胞后导致:(1)显著抑制人A549细胞增殖,其抑制效应呈浓度和时间的依赖性;(2)G1期和G2期细胞显著减少,但S期细胞显著性增加;(3)显著诱导多胺降解代谢限速酶SSAT的表达,但对其他酶影响较小;(4)细胞内多胺含量显著性下降。结论:上述研究结果提示TBP具有抑制人A549肺癌细胞增殖的药理活性,有作为肺癌治疗药物的潜在临床应用前景。其机制可能与干扰DNA复制、抑制细胞周期和降低细胞内多胺水平相关。
- 龚裴培韩钰张贺吉张军王艳林
- 关键词:肺肿瘤多胺类似物A549肺癌细胞
- 新多胺类似物TBP对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡及迁移能力的影响被引量:2
- 2012年
- 目的:研究新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutyl propaneadiamine,TBP)对人膀胱移行细胞癌T24细胞生长、凋亡及迁移能力的影响。方法:MTT比色法分析细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期改变,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot用于分析细胞凋亡相关蛋白Bax和细胞色素C的表达水平,Transwell技术检测细胞迁移能力的变化。结果:TBP有效抑制T24细胞增殖及迁移能力。细胞周期分析显示TBP抑制细胞发生G_1/S期转换,导致S期细胞比例显著性下降,G_0/G_1期细胞比例升高,同时出现SubG_1亚凋亡峰。TBP处理后,细胞呈现典型凋亡现象,细胞浆中促凋亡蛋白Bax和细胞色素C含量明显升高。结论:TBP能够抑制人膀胱移行细胞癌T24细胞增殖、降低T24细胞迁移能力,诱导细胞凋亡,其机制可能与影响肿瘤细胞的细胞周期,活化线粒体相关的细胞凋亡途径有关。
- 杨建林韩钰王凯张贺吉王艳林
- 关键词:多胺类似物迁移凋亡
- 新多胺类似物四丁基丙二胺对人肝癌HepG2细胞增殖及侵袭迁移的影响被引量:2
- 2012年
- 目的研究新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutyl propanediamine,TBP)对人肝癌HepG2细胞增殖及侵袭迁移的影响。方法 MTT比色法分析细胞增殖影响,流式细胞术检测细胞周期改变,Transwell体外迁移/侵袭实验检测迁移侵袭能力的变化,Western Blot用于分析细胞多胺代谢相关蛋白精胺氧化酶(SMO)的表达水平,化学发光法测定SMO活性,反相高效液相色谱法分析TBP对细胞多胺含量的影响。结果 TBP有效抑制HepG2细胞增殖水平,对细胞的侵袭、迁移能力也有明显抑制作用。TBP抑制细胞DNA复制,导致S期细胞比例显著性下降,G0/G1期细胞比例升高。细胞浆中SMO含量明显升高,但其酶活性下降。TBP显著性增加了细胞的腐胺水平,但对精脒和精胺无影响。结论 TBP能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖、降低HepG2细胞侵袭和迁移的能力,其机制可能与影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布有关。
- 杨建林韩钰王凯张贺吉张军王艳林
- 关键词:多胺类似物TBPHEPG2细胞