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张贝贝: 作品数：10 被引量：9H指数：2; 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院更多>>; 发文基金：新疆维吾尔自治区科技支疆项目新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金博士科研启动基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>

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细胞因子GM-CSF对犬透明带3DNA疫苗免疫小鼠抗生育效果的研究: 2017年; 目的粒细胞-臣噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony-stimulating fac-tor，GM-CSF）作为免疫佐剂，能够影响犬透明带3（CZP3）DNA疫苗的免疫效果，有助于研制有效降低流浪犬生育的犬透明带3DNA疫苗。方法采用RT-PCR和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法，分析GM-CSF对小鼠肌肉注射部位的抗原提呈细胞（antigenpresentingcells，APCs）成熟和富集的影响。然后通过电脉冲刺激小鼠肌肉，将分子佐剂pcDNA3-GM-CSF与DNA疫苗pcDNA3．CZP3单独或联合免疫接种雌性BALB／c小鼠。ELISA方法检测了小鼠血清和生殖道中抗体IgG和sIgA（secretaryIgA）的水平以及血清中IL4和IFN-1，的含量，MTT方法检Nd,鼠脾脏T细胞的增殖，间接免疫荧光验证血清中CZP3抗体与小鼠卵细胞结合的能力，抗生育实验分析免疫不育效果。结果GM-CSF与peDNA3．CZP3共免疫小鼠能够显著促进CD80、CD83和CD86的表达，促进pcDNA3-CZP3免疫接种小鼠血清中IgG和生殖道中sIgA抗体水平的显著升高（P〈0．0k）。免疫小鼠的IL-4和IFN-γ的含量均显著增加（P〈0．05），MTF法证明脾脏T细胞增殖显著（P〈O．05），间接免疫荧光结果表明小鼠卵细胞表面的荧光强度和致密度与免疫组血清中抗体的水平成正相关．抗生育实验表明GM-CSF显著性（P〈0．05）地降低DNA疫苗pcDNA3-CZP3免疫小鼠的产仔数目。结论GM-CSF作为免疫佐剂能够显著增强犬透明带3DNA疫苗的免疫不育效果，可以作为增强犬透明带3DNA免疫不孕疫苗的有效佐剂。; 张贝贝王颖张富春; 关键词：卵透明带3 DNA疫苗免疫佐剂 GM-CSF

犬卵透明带3(CZP3)DNA疫苗免疫有效降低小鼠生育能力被引量：3: 2016年; 目的构建以犬卵透明带3(CZP3)为靶抗原的DNA避孕疫苗,并对其免疫效果及抗生育能力进行初步评价。方法提取犬卵巢总RNA,反转录PCR扩增CZP3基因,利用Prot Scale、TMHMM、Signal P、Inter Pro Scan、PREDICT PROTEIN、同源模建等生物信息学方法对CZP3基因进行分析,构建携带目标抗原CZP3的DNA疫苗pc DNA-CZP3,进行小鼠免疫实验,对DNA疫苗的免疫效果、抗生育水平进行综合评价。结果 CZP3基因序列共编码426个氨基酸,其在N端和C端各有1个疏水区,N端前22个氨基酸为信号肽,C端有1个由细胞外到细胞内的跨膜螺旋。CZP3有8个B细胞表位。DNA避孕疫苗pc DNA3-CZP3能够诱导小鼠产生较高的抗体水平,免疫组小鼠平均产仔数显著低于空白对照组和阴性对照组。结论成功构建能显著降低小鼠生育能力的犬避孕DNA疫苗pc DNA3-CZP3。; 王颖张贝贝张冀罗娇娇阿地拉.艾皮热张富春; 关键词：DNA疫苗免疫避孕

天山雪莲醇提液对连续光照雌性小鼠生殖激素水平及离体子宫活动能力的影响: 2015年; 为初步探讨天山雪莲醇提液对雌性小鼠血液生殖激素及离体子宫活动能力的影响,选择性周期正常的小鼠随机分为试验组和对照组,实施连续光照3周。试验组小鼠每天灌胃雪莲乙醇提取液0.5mL,对照组每天同法灌胃9g/L的NaCl 0.5mL。3周后小鼠眼眶采血,分离血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)分析雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的变化;处死小鼠,获得离体子宫,用Powerlab系统观察雪莲醇提液对小鼠离体子宫活动能力的影响。结果发现,试验组小鼠的E2、FSH和LH水平都高于对照组,差异显著(P<0.05);试验组小鼠子宫活动力明显好于对照组,差异显著(P<0.05)。表明适量雪莲醇提液可以增强雌性小鼠离体子宫平滑肌的活动能力,并可明显影响小鼠血清E2、FSH和LH的水平。; 庄淑珍张晓红张冀张贝贝侯宇周玉东姚刚; 关键词：生殖激素离体子宫

新疆雪莲提取液预防小鼠卵巢早衰的初步研究被引量：1: 2013年; [目的]初步探讨雪莲提取液调控雌性小鼠生殖生理的机制,为天山雪莲作为女性美容保健用品以及临床预防和治疗妇科疾病提供理论依据。[方法]选择60只性周期正常的小鼠,随机分为试验组和对照组,每组30只;分别于每天12:00灌胃0.5 ml雪莲提取液和浓度0.9%生理盐水,采用阴道脱落细胞涂片观察小鼠性周期变化,并提取双侧卵巢组织RNA,采用RT-PCR分析卵巢中Pten和FoxO3基因的表达情况。[结果]试验组和对照组的小鼠性周期紊乱率分别为50.0%和76.7%;FoxO3和Pten基因在试验组小鼠卵巢中的表达优于对照组小鼠。[结论]雪莲提取液对连续光照造成的小鼠卵巢早衰现象有一定的预防作用。; 张冀张曼曼王军张贝贝杨焕庄淑珍张晓红; 关键词：卵巢早衰 PTEN基因

盐穗木HcDMC1的原核表达和抗血清的制备被引量：2: 2018年; DMC1是减数分裂过程中同源染色体配对和重组修复所必需的减数分裂特异蛋白。根据盐胁迫下盐穗木转录组数据库,克隆获得的盐穗木DNA损伤修复基因命名为HcDMC1。为深入分析盐穗木HcDMC1基因的耐盐功能,通过原核表达获得盐穗木HcDMC1的融合蛋白,用于免疫小鼠制备特异性的HcDMC1抗血清。结果表明,利用pET30a-HcDMC1能够在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白His-HcDMC1,纯化融合蛋白His-Hc DMC1的含量为1.0 mg·m L^(-1)。每次每只小鼠免疫接种50μg融合蛋白,三次免疫接种后进行抗体效价及特异性检测。ELISA检测抗血清滴度约为1∶400 000,Western Blot检测证明了抗血清的特异性。本研究制备的小鼠抗血清能够为盐穗木Hc DMC1蛋白的功能鉴定和免疫检测提供实验材料。; 张冀张丽丽张贝贝张富春; 关键词：盐穗木原核表达融合蛋白抗血清

犬卵透明带3蛋白原核表达和抗血清的制备: [背景]城市流浪狗数量激增己成为一个全球性的问题.随之而来的扰民伤人、制造交通事故、污染环境和传播疾病等社会突出问题，极大地激起了与人类的矛盾并亟待解决.现已知有约100多种人畜共患病是由狗和猫所携带并传染的，因此，有效...; 张贝贝王颖张富春; 关键词：卵透明带3 原核表达融合蛋白抗血清

电脉冲法增强CZP3 DNA疫苗免疫不育效果的研究: 2017年; 目的:研究电脉冲法对CZP3 DNA疫苗免疫不育效果的影响。方法:在小鼠腿部肌肉分别注射5、10、20和50μg的pc DNA3.0-CZP3质粒,经电脉冲刺激,ELISA法检测免疫小鼠的CZP3抗体水平及最高抗体滴度。与雄鼠合笼三周后,计算各免疫组的不孕率及平均产仔数,统计学分析。结果:相比单独肌肉注射免疫,电脉冲法能极显著提高DNA疫苗的免疫水平,电脉冲50μg组的抗体效价可以达到1∶4 000。此外随着血清中CZP3抗体水平的增高,小鼠不孕率明显上升,平均产仔数显著减少。统计分析显示,免疫小鼠的CZP3抗体水平与产仔数呈负相关关系。结论:电脉冲法能够显著提高CZP3 DNA疫苗的免疫水平,降低小鼠生育能力,这为CZP3 DNA疫苗应用于流浪犬避孕奠定了基础。; 王颖张贝贝阿地拉·艾皮热张冀罗娇娇张富春; 关键词：卵透明带3 DNA疫苗电脉冲法免疫不育

犬卵透明带3蛋白原核表达和抗血清的制备被引量：1: 2016年; 在研发控制流浪犬卵透明带3(CZP3)免疫不育疫苗的过程中,需要制备特异性的CZP3抗血清进行免疫检测。本研究克隆获得CZP3的c DNA(全长1 281 bp)和除去跨膜区和信号肽的核心片段(CZP3C,984 bp),通过构建原核表达载体p ET28a-CZP3C,转化大肠杆菌BL21(DE3)。在28℃下以0.6 mmol·L^(-1)异丙基硫代β-D-半乳糖苷诱导表达4 h,获得CZP3C融合蛋白。利用CZP3C融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备特异性的抗血清,并对抗血清的特异性和效价进行评价。SDS-PAGE结果表明,融合蛋白以包涵体形式存在。经过镍柱亲和纯化及8 mmol·L^(-1)尿素复性后,获得了高纯度的CZP3C融合蛋白。用0.8μg·μL^(-1)的CZP3C融合蛋白免疫新西兰大白兔,免疫后的兔抗血清用Western blot及间接免疫荧光实验检测,结果证明CZP3C兔抗血清具有较高的特异性,ELISA检测效价为1∶409600。本研究所制备的抗血清能够为流浪犬免疫不育疫苗的研制提供检测材料。; 张贝贝王颖张冀张富春; 关键词：卵透明带3 原核表达融合蛋白抗血清

电脉冲法增强CZP3 DNA疫苗免疫不育效果的研究: [目的]自从研究者发现DNA疫苗以来已经将近三十年.虽然DNA疫苗具有众多优点，但是由于其免疫效果与传统的蛋白疫苗相比相差较大，成为阻止DNA疫苗走向市场的最大障碍.电脉冲能够改变细胞膜的通透性，促进外源DNA进入细胞内...; 王颖张贝贝张富春; 关键词：卵透明带3 DNA疫苗

山羊痘病毒P32抗原基因口服活载体DNA疫苗的构建被引量：3: 2017年; 以减毒鼠伤寒沙门菌X 4550为载体,构建编码缺失跨膜区和疏水区的山羊痘病毒P32基因的新型口服活载体D N A疫苗,通过体外传代培养、大剂量接种试验、免疫组织化学试验、ELISA等对其安全性、稳定性、免疫原性及免疫效果等进行综合检测评价。结果表明,X4550/pVAX1-P32在体外可稳定传代100代以上,小鼠口服1×10^(10)CF U X4550/pVAX1-P32后存活率为100%,接种后第10天仍能从脾中分离到X4550/pVAX1-P32,表明X4550/pVAX1-P32在体内外均具有良好的安全性和稳定性。免疫组织化学试验结果显示免疫小鼠脾细胞内有黄褐色粗颗粒,表明X4550能将pVAX1-P32有效递呈至免疫效应细胞并在其内表达具有生物活性的P32蛋白。ELISA结果显示,X4550/pVAX1-P32免疫组的抗体水平显著高于pVAX1-P32免疫组(0.01; 丁军涛王颖张雪彬吴金恩郑亚东孔贺磊张贝贝; 关键词：山羊痘病毒 P32基因

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