目的:探讨Plac8l1(placenta-specific 8 like 1)基因在小鼠睾丸组织的表达特征,及其与精子发生的相关性。方法:经生物信息学方法初步筛选到一个睾丸特异性表达候选基因Plac8l1,并推测其可能与小鼠精子发生相关;采用半定量RT-PCR和实时定量RT-PCR对Plac8l1表达的时空特异进行了研究;应用原位杂交技术对Plac8l1 m RNA在成年小鼠睾丸中的细胞类群表达特征进行初步研究;通过构建过表达PLAC8L1-EGFP重组蛋白质粒及生物信息学分析进行亚细胞定位研究与功能预测。结果:(1)Plac8l1是1个睾丸特异性转录基因。(2)在成年小鼠,Plac8l1只在睾丸和附睾组织发生特异性转录,而且睾丸中的表达水平明显高于附睾[睾丸vs.附睾=[(1.000±0.000)vs.(0.036±0.018),P=0.000]。(3)随着小鼠精子发生的起始,睾丸中Plac8l1转录水平逐渐升高(P=0.000)。(4)m RNA原位杂交结果显示Plac8l1 m RNA主要定位在成年小鼠睾丸中的间质细胞和精母细胞。(5)经生物信息学分析,PLAC8L1也有着一个类似于PLAC8的功能域,过表达重组蛋白显示PLAC8L1在细胞膜上聚集。结论:Plac8l1是1个睾丸特异性基因,可能与精子发生过程中的精母细胞分化相关;PLAC8L1具有1个富含半胱氨酸的PLAC8结构域,这一结构域可能介导了PLAC8L1在细胞膜上聚集并与其他蛋白相互作用,并可能在精母细胞分化中发挥重要作用。
为探讨妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder of pregnancy,HDP)患者外周血炎性因子水平变化及与妊娠结局的相关性,选取192例HDP患者为HDP组,其中妊娠期高血压患者64例、轻度子痫前期患者82例、重度子痫前期患者46例,另选取同期100例正常产检孕妇为对照组。采用ELISA检测外周血IL-2、IL-10、IL-12、TNF-α、IFN-γ水平,免疫透射比浊法测定CRP水平。比较HDP组与对照组的炎性因子水平和不良妊娠结局;比较HDP患者妊娠结局良好组与不良组炎性因子水平,并分析其与不良妊娠结局的相关性;绘制ROC曲线,分析炎性因子对不良妊娠结局的预测价值。结果显示,不同HDP分期组患者外周血IL-2、IL-12、TNF-α水平较对照组升高(P<0.05),IL-10水平较对照组降低(P<0.05);重度子痫前期组IL-12、TNF-α水平高于其他HDP分期组(P<0.05)。HDP组有指征的剖宫产、产后出血、早产或过期产、低体重儿、新生儿窒息发生率均显著高于对照组(P<0.05)。HDP患者中妊娠结局良好组外周血IL-12、TNF-α水平均显著低于妊娠结局不良组(P<0.05)。HDP组外周血IL-12、TNF-α水平均与有指征的剖宫产、产后出血、早产或过期产、低体重儿、新生儿窒息发生率呈正相关(P<0.05)。外周血IL-12、TNF-α及二者联合预测不良妊娠结局ROC曲线的AUC分别为0.890、0.845、0.956。该研究提示,HDP患者外周血多种炎性因子水平异常波动,其中IL-12、TNF-α水平升高与病情严重程度、不良妊娠结局密切相关,IL-12、TNF-α有望成为HDP不良妊娠结局的预测指标。
