张茂祥
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- 经TAT和NLS多肽修饰的ΦC31整合酶蛋白及其应用
- 本发明属转基因技术领域，具体为一种新的经TAT和NLS修饰的ΦC31整合酶蛋白及其应用。其中包括经TAT修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT-ΦC31，以及经TAT和NLS共同修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT-ΦC31-NLS，...
- 张茂祥朱焕章陈金中薛京伦
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- 经TAT和NLS多肽修饰的ΦC31整合酶蛋白及其应用
- 本发明属转基因技术领域，具体为一种新的经TAT和NLS修饰的ΦC31整合酶蛋白及其应用。其中包括经TAT修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT－ΦC31，以及经TAT和NLS共同修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT－ΦC31－NLS，...
- 张茂祥朱焕章陈金中薛京伦
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- 用于检测整合酶ΦC31功能的真核细胞系统及其制备方法
- 本发明属生物技术和基因治疗技术领域，具体涉及一种用于检测整合酶ΦC31功能的真核细胞系统及其制备方法。该检测系统由重组报告PB[EGFP]转染人胚胎肾细胞系293后用G418筛选，挑选出单克隆细胞而获得，其中，PB[EG...
- 张茂祥朱焕章陈金中王韧诚贾韦国薛京伦
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- 链霉菌噬菌体φC31整合酶的性质和功能及其在哺乳动物细胞的应用研究
- 利用基因转移技术有效地将目的基因位点特异性地整合到哺乳动物细胞的基因组中,从而避免外源基因随机插入基因组,这是基因治疗和转基因动物研究中未解决的重要问题。链霉菌噬菌体ΦC31整合酶可以将外源核苷酸序列定点整合到哺乳动物细...
- 张茂祥
- 关键词：ΦC31整合酶蛋白二级结构蛋白转导DNA转染人凝血因子IX
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- ΦC31整合酶多克隆抗体及其应用
- 本发明属生物技术和基因治疗技术领域，具体为一种ΦC31整合酶的多克隆抗体及其制备方法和应用。首先表达和纯化ΦC31蛋白，然后由纯化的ΦC31蛋白直接与佐剂相混合，注射免疫动物，如家兔、小鼠、大鼠等，即制得ΦC31多克隆抗...
- 张茂祥陈金中朱焕章薛京伦贾韦国
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- ΦC31整合酶的表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2008年
- 目的:提供ΦC31整合酶研究所需的大量纯化蛋白质及特异性抗体。方法:将编码ΦC31整合酶的ORF插入到pET22b+载体构建表达质粒并转化E.coliBL21(DE3),用IPTG诱导表达His-C31整合酶融合蛋白,His-Bind Quick Car-tridge纯化表达产物。重组蛋白作为抗原常规免疫家兔制备相应的多克隆抗体,Western blotting确定抗体的特异性,体外线性底物分子内重组检测系统检测抗体的活性。最后用该抗体检测了ΦC31整合酶在真核细胞HEK293中的定位和分布。结果:16℃条件下0.2 mmol/LIPTG诱导培养30 h,携带pET22b-ΦC31质粒的E.coliBL21(DE3)在YTG培养基中,可表达出大量的融合蛋白,该蛋白经体外线性底物分子内重组检测系统检验具有较高的活性。使用该融合蛋白免疫新西兰大白兔后,分离兔血清可得到ΦC31整合酶多克隆抗体,Western blotting和荧光免疫细胞组织化学方法证实,该抗体可特异性地识别细菌及细胞表达的ΦC31整合酶蛋白抗原。结论:本实验建立了表达ΦC31整合酶的方法,并成功制备了ΦC31整合酶特异性抗体。
- 许正新张茂祥李智慧王秋娟陈金中
- 关键词：ΦC31整合酶蛋白表达多克隆抗体纯化
