张星朗
- 作品数：16 被引量：85H指数：6
- 供职机构：中国水产科学研究院更多>>
- 发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目国家科技基础条件平台建设计划国家社会科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 大鲵虹彩病毒的形态结构及其包涵体特征被引量：11
- 2015年
- 运用电镜和免疫荧光技术,对纯化的大鲵(Andrias davidianus)虹彩病毒粒子、感染病毒的EPC细胞以及确诊感染病毒的病鲵组织样品进行观察和分析。结果表明,纯化的大鲵虹彩病毒负染后电镜下显示球形结构,具囊膜,直径约150 nm;感染EPC细胞中的病毒颗粒呈典型的正二十面体结构,由核衣壳和核心构成,核衣壳呈正六边形,对角直径为(150±5)nm(N=30),核衣壳厚度约5 nm,核心直径为(98±18)nm(N=27)。在病鲵病变的肺和肾组织中发现存在大量聚集或分散的病毒颗粒,其形态特征和感染EPC细胞超薄切片观察的结果一致。免疫荧光电镜观察结果显示,感染病毒的细胞可观察到明显的红色荧光信号,且呈斑块状分布,大小不等。综合大鲵虹彩病毒初步的形态发生和免疫荧光观察结果,认为病毒感染细胞后在不同的发生时期会形成不同类型的病毒包涵体。
- 周小愿张星朗吉红韩亚慧贾秋红高宏伟
- 关键词：虹彩病毒包涵体
- 黄河兰州市区段秋季浮游动物群落结构特征被引量：19
- 2015年
- 通过研究浮游动物的种类组成、现存量及多样性，分析其群落结构特征和水质状况，为黄河兰州段水生态系统健康评价和渔业管理提供基础数据，于2014年秋季（11月）在黄河兰州市区段设定7个调查断面，市区上游工业集聚区设置3个断面（H1－H3），中游人口集聚区设置3个断面（H4－H6），下游人类活动较少区设置1个断面（H7），每个断面设3个采样点，共计21个采样点，进行浮游动物群落调查。结果表明，浮游动物共检出4大类、27种（属），其中原生动物9种（属），占总种（属）的33．3％，轮虫10种（属），占37．1％，枝角类5种（属），占18.5％，桡足类3种（属），占11．1％，种类组成主要以轮虫和原生动物为主。浮游动物密度为1.88～11．09个／L，均值为4．64个／L；生物量为1．3～4．4μg／L，均值为2．5μg／L。浮游动物优势种为5种（属），以小口钟虫（Vorticella microstoma）的优势度最高（0．539）。Shannon-Weiner 多样性指数、Pielou 均匀度指数和 Margalef 丰富度指数平均值分别为1．89、0．58和1．94。通过浮游动物密度聚类分析，7个采样断面的浮游动物可分为2大类群。根据物种多样性指数对水质进行评价，黄河兰州市区段水质处于轻－中度污染。
- 白海锋王丰张星朗袁永锋问思恩沈红保李瑞娇张军燕
- 关键词：黄河兰州段浮游动物群落结构
- 大鲵虹彩病毒MCP蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与纯化
- 2017年
- 为研制基于杆状病毒表达系统的大鲵虹彩病毒(Chinese giant salamander iridovirus,CGSIV)新型亚单位疫苗,将CGSIV主要衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因克隆至杆状病毒穿梭载体p Fast Bac1质粒中,构建了重组质粒p Fast Bac-MCP。转化E.coli DH10Bac感受态细胞,经PCR筛选和测序获得了阳性重组杆粒r Bacmid-MCP,在昆虫细胞转染试剂介导下将该重组杆粒转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒。重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞,经超薄切片电镜观察,可见大量重组杆状病毒存在于细胞中。按不同感染复数(MOI=2、5、10)将重组杆状病毒感染Sf9细胞进行CGSIV MCP的表达。SDS-PAGE检测结果表明,在MOI=10时,目的蛋白的表达量最高;间接免疫荧光观察结果显示,目的蛋白在感染细胞中得到表达,且分布在细胞表面。以抗CGSIV MCP单抗为抗体制备的免疫磁珠纯化目的蛋白并利用兔抗CGSIV MCP多抗血清检测目的蛋白的生物学活性。SDS-PAGE和Western blot结果显示,纯化的目的蛋白纯度很高,而且具有抗原活性,能够被兔抗大鲵虹彩病毒MCP多抗血清识别。利用杆状病毒表达系统成功进行了CGSIV MCP的表达,并应用免疫磁珠法进行了目的蛋白的纯化,为CGSIV新型亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 张星朗高志杨平凹周小愿贾秋红韩亚慧高宏伟
- 关键词：杆状病毒表达系统蛋白纯化
- 红碱淖浮游动物群落结构特征及其与环境因子的关系被引量：11
- 2022年
- 为了解红碱淖浮游动物群落结构特征及水质状况,科学保护沙漠湖泊生态健康,于2016-2017年调查了红碱淖浮游动物群落结构和主要水质理化指标,分析了该湖泊浮游动物现存量和多样性的季节变化规律及影响因子。结果表明,红碱淖全年共调查到浮游动物30属35种,种类组成以轮虫为主,占比为41.67%,优势种以小口钟虫(Vorticella microstoma)、唇形叶轮虫(Notholca labis)、虱形大眼溞(Polyphemus pediculus)、蒙古裸腹溞(Moina mongolica)、汤匙华哲水蚤(Sinocalanus dorrii)为主,种类数季节变化表现为冬季>春季>秋季>夏季。浮游动物年平均密度为61.9 L^(-1),变化范围4.2~326.3 L^(-1),年平均生物量为0.193 mg·L^(-1),变化范围为0.001~1.138 mg·L^(-1),浮游动物现存量存在季节差异,呈现出夏季>秋季>冬季>春季的特点。浮游动物Shannon-Weiner多样性指数和Pielou均匀度指数年平均值分别为2.040和0.712,多样性呈现出秋冬季高于春夏季。典范对应分析(CCA)显示,水温、电导率和溶解氧浓度是显著影响浮游动物群落分布的主要环境因子。根据生物多样性指数和综合营养状态指数(TLI)水质评价结果表明,红碱淖水质处于中污染状态,水体属轻度富营养类型,水量调控与水质管理对浮游动物群落结构具有较大影响。研究结果可为红碱淖的生态保护及水资源开发利用提供理论参考。
- 白海锋白海锋龙永清刘刚张星朗张星朗袁永锋
- 关键词：浮游动物群落结构水质评价环境因子
- 抗大鲵虹彩病毒MCPCOE蛋白单克隆抗体的制备及初步应用被引量：3
- 2016年
- 制备抗大鲵虹彩病毒(CGSIV)MCP COE蛋白的单克隆抗体,并对其基本特性进行鉴定及开展初步应用。用纯化的重组CGSIV MCP COE蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法检测阳性孔,经有限稀释法亚克隆,筛选单克隆杂交瘤细胞株。采用间接ELISA法、免疫印迹法和单克隆抗体亚型检测试剂盒等鉴定单抗的稳定性、特异性和亚型;采用腹水诱生法制备单抗腹水,饱和硫酸铵法纯化腹水单抗;间接ELISA法分别测定单抗杂交瘤细胞上清液和腹水单抗的效价;利用间接免疫荧光法观察CGSIV的增殖。结果显示,细胞融合克隆率为98.68%,阳性率为20.52%,得到1株能够稳定分泌特异性抗体的阳性杂交瘤细胞,命名为1M6。单克隆抗体的亚型属于Ig G2b,κ链;免疫印迹法和间接ELISA法测定结果显示,单抗具有很好的特异性;杂交瘤细胞株培养上清液的效价为1∶1600,腹水单抗效价为1∶2×106,亲和常数为2×105。间接免疫荧光显示CGSIV感染EPC细胞24 h后在宿主细胞质中可以观察到成熟的病毒粒子形成的包涵体,而且在宿主细胞核内也能发现病毒粒子。抗CGSIV MCP COE蛋白单克隆抗体的成功制备为CGSIV免疫学检测方法的建立和其他相关研究的开展奠定了基础。
- 周小愿张星朗贾秋红韩亚慧高宏伟
- 关键词：虹彩病毒单克隆抗体
- 大鲵肺肾囊肿的病原学研究被引量：4
- 2014年
- 为查明2010年以来陕西省养殖大鲵发病导致肺脏、肾脏囊肿的病原,在无菌条件下从发病大鲵内脏器官分离致病菌,结果从肝脏中分离到一株弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),从肺脏、肾脏中未分离到致病菌。病理组织学观察结果显示,病鲵的肺泡、肾小管等上皮细胞变性、坏死,肝细胞广泛性空泡变性。透射电镜观察结果表明,肺脏、肾脏存在大量聚集或分散的病毒颗粒,病毒颗粒切面呈正六边形,对角直径约150nm,形态与虹彩病毒相似。根据已知虹彩病毒主要衣壳蛋白基因序列设计特异引物,提取病鲵的肝脏、肺脏、肾脏组织的DNA进行PCR扩增,将扩增片段进行序列测定与分析,结果表明该序列和推导的氨基酸序列与已报道的大鲵虹彩病毒(CGSIV)主要衣壳蛋白基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性均为99%。综合试验结果判定引起病鲵肺脏、肾脏囊肿的病原是大鲵虹彩病毒。
- 周小愿贾秋红吉红韩亚慧张星朗高宏伟
- 关键词：肺脏肾脏囊肿
- 大鲵虹彩病毒主要衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及抗血清制备被引量：3
- 2016年
- 目的表达大鲵虹彩病毒(CGSIV)主要衣壳蛋白(MCP)主要抗原表位区蛋白,并制备兔抗血清。方法以大鲵虹彩病毒略阳株(CGSIV-LY)基因组为模板,PCR扩增MCP基因,然后克隆到p ET-21a(+)表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot法检测重组蛋白的表达和免疫活性,用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白。以纯化的重组蛋白为免疫原免疫兔制备抗血清,采用Western blot法和ELISA检测抗血清的免疫特异性并测定效价,利用间接免疫荧光法检测鲤鱼上皮瘤(EPC)细胞CGSIV。结果表达了相对分子质量(Mr)为29 000的重组蛋白。制备的兔抗MCP血清具有良好的特异性和高滴度,间接免疫荧光法检测结果显示制备的多抗血清能识别EPC细胞中的CGSIV。结论成功表达了大鲵虹彩病毒MCP主要抗原表位区蛋白,并制备高滴度和良好特异性的兔抗血清。
- 周小愿张星朗贾秋红韩亚慧高宏伟
- 关键词：原核表达抗血清
- 大鲵虹彩病毒-LY株主要衣壳蛋白基因克隆和分子特征研究被引量：5
- 2015年
- 为明确大鲵虹彩病毒-LY株主要衣壳蛋白（mcp）基因分子特征和中国不同CGSIV毒株mcp基因变异及病毒的系统进化关系。克隆了CGSIV-LY株mcp基因,并运用生物信息学软件对获得的基因信息进行了分析。结果表明CGSIV-LY株mcp基因全长1392 bp,可编码463个氨基酸。预测蛋白质分子量为50.03 ku,理论等电点是5.75,为亲水性可溶蛋白。CGSIV-LY株mcp不含有信号肽;没有跨膜区存在;抗原表位预测显示抗原性良好;结构预测显示,存在8个潜在的N-糖基化位点,存在17个潜在的O-糖基化位点和20个潜在的磷酸化位点。CGSIV-LY株mcp二级结构中无β-折叠,无规则卷曲占57.66%,延伸链占31.11%,α-螺旋占11.23%,主要以延伸链和无规则卷曲为主。氨基酸序列包含3个结构域：氨基酸N末端,氨基酸C末端和capsid_NCLDV保守区结构域,并在氨基酸序列的第414~436区存在一个低复杂度域。氨基酸序列多重比对和基于mcp氨基酸序列构建的蛙病毒属成员系统进化树分析结果显示,包括CGSIV-LY株在内的中国出现的不同CGSIV毒株之间mcp基因差异很小,为平行进化关系,共同聚为蛙病毒属成员独立的一支。中国出现的不同CGSIV毒株mcp基因应具有基本一致的分子结构和特征。
- 周小愿张星朗韩亚慧贾秋红高宏伟
- 关键词：虹彩病毒克隆
- 黄河宁蒙段鱼类多样性研究被引量：7
- 2011年
- 为了解黄河宁蒙段鱼类的生存状况,2008年5～6月和2009年5～6月在吴忠、陶乐和磴口3县13点对该河段的鱼类资源进行了2次调查。结果表明,黄河宁蒙段渔获物以小型黄河鮈(Gobio huanghensis)为主,占到总数量的58.8%,兰州鲇(Silurus lanzhouensis)仅占总数的5.9%;鱼类年龄结构以放流的1、2龄鲤(Cyprinuscarpio)、鲫(Carassius auratus)为主,占到分析样本的51.2%;生物多样性指数表现为:陶乐(0.9856)>吴忠(0.8903)>磴口(0.7432);均匀度指数的空间分布是:吴忠(0.6422)>磴口(0.5361)>陶乐(0.5065);丰富度指数为:陶乐(0.8364)>磴口(0.7357)>吴忠(0.4240)。黄河宁蒙段的鱼类资源量少,以低龄鱼类为主,组成结构不稳定;开展鱼类多样性研究,有利于进一步开发和保护黄河鱼类资源。
- 张星朗沈红保李引娣
- 关键词：优势度多样性鱼类
- 长丰鲢夏花高效培育技术被引量：5
- 2012年
- 2012年5月10日，西安大宗淡水鱼类综合试验站从水科院长江水产研究所引进长丰鲢水花200万尾，放养在我站草滩团头鲂良种场1#池，5月25日为5个示范县提供2厘米夏花63万尾，30日，为榆林市榆阳区水产站提供2．5厘米夏花68．5万尾。成活率为65．8％，毛利润13645元。
- 张星朗
- 关键词：夏花淡水鱼类水科院试验站良种场
