张代宝
- 作品数:25 被引量:45H指数:4
- 供职机构:郑州市动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:河南省高等学校创新人才培养工程河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- 鸡白细胞介素-6-2嵌合基因的融合表达及其表达产物活性的研究被引量:4
- 2014年
- 为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方法对表达的rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白(重组融合蛋白)进行纯化。采用间接ELISA方法检测重组融合蛋白分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体的特异性免疫反应活性,采用MTS法检测重组融合蛋白体外促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示,成功构建了ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因及其重组表达质粒rpQE-30-ChIL-6-linker-ChIL-2,表达的重组融合蛋白的分子质量约为40ku,纯化后的纯度在96%以上。该重组融合蛋白可分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体发生特异性免疫反应,并具有显著的促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞增殖活性,其活性优于任一重组蛋白对照。本研究结果初步证明了rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在对鸡免疫细胞的增殖作用方面与rChIL-6和rChIL-2蛋白的作用相似,为进一步研究rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。
- 张书阳谢彩华闫若潜吴志明赵明军赵雪丽刘梅芬杨晓璐张代宝张林海
- 关键词:嵌合基因活性
- 口蹄疫病毒通用、A型二重实时荧光定量PCR检测引物及探针
- 本发明提供口蹄疫病毒通用、A型二重实时荧光定量PCR检测引物及探针,所述引物包括P0、P1、P2、P3和P4,所述探针包括P5和P6。本发明基于所述引物和探针建立的二重实时荧光定量PCR检测可实现一个反应同时对口蹄疫病毒...
- 吴志明闫若潜谢彩华赵雪丽陈涛赵明军郑岩严平王淑娟刘琨曹伟伟张代宝王翠韩庆斌朱凤霞王永强
- 文献传递
- H6亚型禽流感病毒受体结合特性的分子机制研究
- 2018年
- 本文围绕H6亚型禽流感病毒方面的受体结合特性分子机制进行研究,通过对相关研究方法的有效应用,对研究结果进行具体论述。
- 安利民张代宝
- 关键词:禽流感病毒分子机制
- 干扰素制剂冻干技术研究进展被引量:1
- 2012年
- 干扰素制剂具有广谱的抗病毒和免疫调节活性,在医学和兽医临床上具有广阔的应用前景。但在实际生产中,液体剂型干扰素制剂存在热稳定性差、不易长期保存和远距离运输等问题,冻干后则可延长保存期、增加稳定性。作者主要对冻干技术的原理、干扰素冻干保护剂和冻干工艺的筛选等进行了综述。
- 张代宝吴志明赵明军张林海闫若潜
- 关键词:干扰素冻干保护剂
- 鉴别猪圆环病毒2型和3型的二重FQ-PCR检测试剂盒
- 本发明提供一种鉴别猪圆环病毒2型和3型的二重FQ‑PCR检测试剂盒。本发明是针对PCV2和PCV3的Rep蛋白和Cap蛋白基因同源性较低的特点,分别以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为扩增靶区域,各设计1...
- 闫若潜班付国赵雪丽王东方王华俊马震原王淑娟谢彩华曹伟伟房大学李桂莲仲伟平闫志玲张代宝
- 文献传递
- 郑州市重大动物疫病防控综合管理软件开发及推广应用效果
- 2013年
- 通过科学严谨的方法,借鉴相关软件设计一个涵盖全市存栏畜禽疫病防控信息动态监控、办公信息传递、数据汇总等综合一体的动物防疫体系自动化办公软件。该软件是以市县乡三级动物疫病防控机构、规模化养殖场、村级防疫员为数据输入端,各级依据权限开展不同工作。包括畜禽养殖信息、疫病防控、疫苗管理、疫情预警预报、防疫员管理等十个功能板块,可涵盖重大动物疫病防控大部分工作内容。该软件还可通过对畜禽的生长信息、免疫情况、出栏率、疫苗使用率等基础信息进行科学、准确的统计,从而改变现有的大量人力资源运作、数据不统一、信息不准确、效率不高等弊端。
- 刘星刘炜贾松涛周婷婷王辉程遥张代宝
- 关键词:重大动物疫病
- 犬瘟热、犬细小病毒二重TaqMan MGB荧光定量PCR检测试剂及其检测方法
- 本发明属动物疫病检测检疫技术领域,公开了一种用于犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)二重TaqMan MGB荧光定量PCR检测试剂及其检测方法。本发明所述的CDV/CPV二重TaqMan MGB荧光定量PCR检测试...
- 吴志明闫若潜赵明军赵雪丽王淑娟刘毅王东方安春霞谢彩华钱勇刘梅芬张代宝张林海
- 文献传递
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究被引量:4
- 2014年
- 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试验组鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+百分含量以及CD4^+/CD8^+比值进行检测。结果表明,与对照组相比,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白在鸡体内接种后3~14d均可明显提高鸡外周血T淋巴细胞中CD3^+CD4^+细胞百分含量,降低CD3^+CD8^+细胞的百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值;接种后3~7d期间,第2组鸡的CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞含量及CD4^+/CD8^+比值与PBS对照组(第1组)相比差异均极显著(P〈0.01),第3组与第1组相比差异均显著(P〈0.05)。以上结果表明,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白接种鸡体后均可显著影响鸡PBLC中淋巴细胞亚群百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值,增强机体的细胞免疫功能;重组融合蛋白对鸡淋巴细胞亚群百分含量、CD4^+/CD8^+比值影响程度和细胞免疫功能的增强作用优于rChIFN-α蛋白;重组融合蛋白在体内发挥了鸡α干扰素和白细胞介素-2对细胞免疫功能的协同增强作用。
- 杨晓璐闫若潜吴志明刘梅芬张代宝张书阳王淑娟赵雪丽刘毅
- 关键词:T淋巴细胞亚群CD4^+/CD8^+比值免疫功能
- 三种猪瘟抗体检测方法的比对试验被引量:1
- 2016年
- 为找到猪瘟抗体检测的最佳方法,笔者分别选用正向间接血凝试验(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和猪瘟抗体免疫金标试纸条快速检测试验这3种不同方法对猪瘟抗体进行检测,从检测方法、检测成本和准确度3个方面进行结果比较和分析。结果表明,猪瘟正向间接血凝反应(IHA)试剂盒操作简便、准确实用、能最大程度地节约监测成本,是较为理想的猪瘟抗体检测方法。
- 刘炜张代宝贾松涛周婷婷张军
- 关键词:猪瘟抗体抗体检测试剂盒
- 河南新郑市的生猪保险联动被引量:2
- 2014年
- 文章介绍了河南新郑市推行生猪保险与病死猪无害化处理联动的情况和成效。针对这一工作存在的问题提出了建立联动机制的建议。
- 刘炜张代宝贾松涛赵立军周婷婷
- 关键词:生猪保险