康雅君
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 泰国红木β-葡萄糖苷酶在毕赤酵母细胞表面的高效展示及初步应用
- 毕赤酵母表面展示系统是近年来发展较快的微生物表面展示系统之一，表面展示外源蛋白的重组毕赤酵母菌株在经过冷冻干燥或冷冻喷干后可以制备成为全细胞催化剂参与下游应用。“绿色功能表面活性剂”烷基糖苷（alkyl polyglyc...
- 康雅君
- 关键词：毕赤酵母烷基糖苷填充床反应器
- 文献传递
- 棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶I的毕赤酵母多拷贝体系构建及其在高密度发酵中的表达被引量：1
- 2014年
- β-葡萄糖苷酶目前广泛应用于合成烷基糖苷、芳基糖苷和辅助纤维素酶水解纤维素。本研究将来自棘孢曲霉(Aspergilus aculeatus)的β-葡萄糖苷酶I(ABGL)在毕赤酵母中通过构建多拷贝表达盒的方法实现高效表达,利用同尾酶Bgl II/BamH I反复酶切和用DNA连接酶连接的方法,成功构建了含多拷贝表达盒5’AOX-ABGL-TT的pHKA-(ABGL)3的分泌重组质粒,并线性化重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过七叶苷显色筛选平板筛选获得高表达的GS115/pHKA-(ABGL)3菌株,且在50升发酵罐实现高密度发酵表达。研究表明,以pNPG为水解底物,在甲醇诱导120 h时摇瓶发酵液上清酶活可达83.15 U/mL,较之前报道的酶活提高了3.35倍;同时在50 L发酵罐实现高密度发酵,在甲醇诱导120 h时发酵罐上清酶活可达979 U/mL,较对照菌株的发酵罐上清液酶活提高2.94倍,且总蛋白表达量可以达到12 g/L。
- 陈文勇胡霞艳康雅君郑穗平
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶毕赤酵母分泌表达高密度发酵
