常静霞
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：汕头大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人胃癌细胞NGAL基因启动子区TPA核心反应元件
- 本发明涉及基因表达调控，公开了人胃癌细胞NGAL基因启动子区TPA核心反应元件，并将启动子序列逐渐缺失和部分调控元件被修饰的调控序列插入报告基因上游构建了一系列真核表达质粒，转染哺乳动物细胞瞬时表达，确定了人NGAL基因...
- 李恩民袁华敏许丽艳常静霞王子良
- 文献传递
- 食管癌细胞NGAL基因-152～-60区段存在TPA反应元件被引量：6
- 2006年
- 以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件.为了对NGAL的这一TPA反应元件进行更准确定位,采用PCR法结合嵌套缺失实验从食管癌细胞中克隆了NGAL5′侧翼区-152～+84、-140～+84、-78～+84、-59～+84、-50～+84、-41～+84、-37～+84、-29～+84和-10～+84等片段,并定向插入pGLB、pGLP或pGLE等萤火虫荧光素酶报告基因表达载体中,构建了pGLB-152、pGLP-152、pGLE-152、pGLB-140、pGLB-78、pGLB-59、pGLB-50、pGLB-41、pGLB-37、pGLB-29和pGLB-10等系列报告基因表达载体.将上述报告基因表达载体分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,并用TPA刺激,检测TPA刺激转染EC109的相对荧光素酶活力,综合判定NGAL-152～+84区不同长度片段的TPA反应性,对NGAL启动子区的TPA反应元件给予进一步分段定位.结果表明,NGAL启动子区的TPA反应元件位于-152～-60区段,而且应答TPA刺激的反应能力很强.生物信息学分析结果显示,NGAL启动子区所存在的TPA反应元件很可能是一种新结构类型.研究说明,NGAL在DNA序列上有应答TPA刺激的结构基础,将有助于深入到分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL过表达机制,也有助于进一步认识TPA信号细胞内传递途径网络在肿瘤发生发展中的作用.
- 许丽艳李恩民牛永东蔡唯佳袁华敏常静霞沈忠英曾毅
- 关键词：食管癌细胞基因表达调控
- 人肺癌细胞NGAL基因启动子区转录调控元件
- 本发明涉及基因表达调控，公开了一种人肺癌细胞的NGAL基因启动子区转录调控元件。本发明首次鉴定了人肺癌细胞NGAL基因启动子区，并将5′端序列逐渐缺失和部分调控元件被修饰的启动子序列插入报告基因上游构建了一系列真核表达质...
- 李恩民常静霞许丽艳袁华敏王子良
- 文献传递
- 食管癌细胞NGAL基因-416～+84区段存在TPA反应元件
- 2005年
- 目的本文旨在对NGAL基因启动子区及其附近是否存在TPA反应元件进行研究。方法(1)采用PCR法从食管癌细胞中克隆NGAL基因5′侧翼区416～+84片段,然后分别插入质粒pGLB和pGLE,构建pGLB416和pGLE416荧光素酶报告基因表达载体;(2)将pGLB416和pGLE416分别同pRLTK共转染食管癌细胞EC109;(3)用TPA刺激转染的EC109,检测细胞相对荧光素酶活力,通过相对荧光素酶活力变化判定NGAL基因5′侧翼416～+84区是否存在TPA反应元件,同时进行生物信息学分析。结果无论是pGLB416还是pGLE416,与pRLTK共转染食管癌细胞EC109后,用TPA刺激,与其相应的空载体相比,转染细胞荧光素酶活力均极显著升高(t检验,P<0.01),约分别升高46.82和46.41倍;而TPA刺激组与没有TPA刺激组相比,pGLB416和pGLE416转染EC109细胞荧光素酶活力分别显著升高了5.17倍和7.37倍(t检验,P<0.01)。生物信息学分析显示,NGAL基因5′侧翼416～+84区段至少存在4个潜在的TPA反应元件。结论食管癌细胞NGAL基因5′侧翼416～+84区段存在着TPA反应元件。
- 许丽艳李恩民蔡唯佳牛永东袁华敏常静霞沈忠英曾毅
- 关键词：NGAL基因食管癌细胞基因表达调控
- 肺癌细胞中NGAL基因的基础表达调控机制
- NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)基因的蛋白表达产物是1993年是由Kjeldsen等人在中性粒细胞中首先发现的。有关NGAL基因在各种组织中的表达及其生物学...
- 常静霞
- 关键词：NGAL基因转录因子肺癌
- 文献传递
- 食管癌细胞NGAL5′侧翼区存在TPA应答元件
- 2006年
- 在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中,NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)过表达,提示食管癌细胞NGAL转录调控区可能存在TPA应答元件.为了对食管癌细胞NGAL的这一TPA应答元件进行分段定位鉴定,首先将NGAL5′侧翼区不同长度片段-1 431^+84-、1 137^+84、-945^+84、-657^+84、-416^+84和-152^+84等依次插入质粒pGLP,构建NGAL/pGLP系列报告基因荧光素酶表达载体pGLP-1431、pGLP-1137、pGLP-945、pGLP-657、pGLP-416和pGLP-152;然后将上述质粒分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,最后用5 ng/ml的TPA刺激转染的EC109,检测报告基因荧光素酶活力,综合判定报告基因荧光素酶活力变化趋势,并以此对食管癌细胞NGAL5′侧翼区TPA应答元件进行分段定位.实验结果表明,食管癌细胞NGAL5′侧翼-657^-417区段内存在着较强的TPA应答元件.生物信息学分析显示,NGAL5′侧翼-657^-417区段至少存在3个潜在的TPA应答元件,表明有应答TPA刺激的结构基础.这些研究有助于从分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL基因过表达机制.
- 许丽艳李恩民王子良牛永东蔡唯佳袁华敏常静霞沈忠英曾毅
- 关键词：NGAL基因食管癌细胞基因表达调控
